Цитофизиологические последствия ультрафиолетового микрооблучения центросомы в клетках культуры ткани

• Автор: Неверова, Анна Леонидовна
• Шифр специальности: 03.00.11
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1998
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 111 с.

СОДЕРЖАНИЕ
1. Введение
2. Обзор литературы
2.1 Центросома в интерфазе
2.2 Центросома включает в себя сайты нуклеации микротрубочек
2.3 Система микротрубочек в интерфазной клетке: различные взгляды
2.4 Роль центросомы и системы микротрубочек в поддержании формы клеток
2.5 Роль центросомы и системы микротрубочек во внутриклеточном транспорте
2.6 Центросома в митозе
2.7 Переход клетки из митоза в интерфазу
2.8 Дальнейшее продвижение по клеточному циклу и переход в 8 период
2.9 Использование метода микрооблучения для изучения свойств центросомы
3. Материалы и методы
3.1 Культивирование клеток и прижизненные наблюдения
3.2 Микрооблучение
3.3 Иммунофлуоресцентные исследования
3.3.1 Визуализация белка В23
3.3.2 Визуализация системы микротрубочек
3.3.3 Регистрация синтеза ДНК
3.4 Регистрация синтеза РНК
3.5 Оценка степени распластывания
3.6 Регистрация сальтаторных движений гранул
4. Результаты
4.1 Ближайшие эффекты УФ микрооблучения центросомы
4.2 Особенности нуклеологенеза в клетках, содержащих облученную центросому

4.2.1 Формирование ядрышек в клетках, содержащих облученную центросому
4.2.2 Уровень синтеза РНК в клетках, содержащих облученную центросому
4.2.3 Распределение ядрышкового белка В23 в клетках, содержащих
облученную центросому
4.3 Сеть МТ в клетках, содержащих облученную центросому
4.4 Способность к распластыванию клеток с облученной центросомой
4.5 Сальтаторные движения гранул в клетках с облученной центросомой
4.6 Продвижение клеток, содержащих облученную центросому,
по клеточному циклу
5. Обсуждение
5.1 Фотоинактивация центросомы препятствует формированию нормальных функционирующих ядрышек
5.2 Фотоинактивация центросомы задерживает формирование радиальной сети микротрубочек после выхода из митоза
5.3 Фотоинактивация центросомы приводит к изменению характера сальтаторных движений в клетке
5.4 Фотоинактивация центросомы препятствует увеличению площади клеток после начального распластывания в ранней в1 фазе
5.6 Фотоинактивация центросомы блокирует вступление клетки в 8-фазу
6. Выводы
7. Список литературы
8. Благодарности

1. ВВЕДЕНИЕ
Цитоплазма клетки пронизана сетью филаментов - белковых нитей различной толщины: актиновых микрофиламентов, промежуточных филаментов и
микротрубочек. Все они в совокупности составляют цитоскелет клетки. Центром организации микротрубочек в клетке является центросома - особая структура, обычно расположенная вблизи ядра в геометрическом центре клетки. Центросома присутствует практически во всех животных клетках. Морфологически центросома включает в себя две центриоли и перицентриолярное пространство.
Наверное, не найдется другой такой клеточной структуры, о роли которой существовали бы столь противоречивые мнения, как о роли центросомы в животной клетке: от предоставления ей более чем скромного места пассивного “пассажира” в клеточных процессах до представлений о центросоме как о структуре, координирующей и программирующей внутриклеточные процессы на всех этапах клеточного цикла.
В последние годы центросома активно изучается в биохимическом плане. В составе центросомы сейчас описывают все новые и новые белки с различными свойствами, находящиеся там постоянно или в какой-либо промежуток клеточного цикла. Этот подход многое может прояснить в функциях центросомы. В то же время он подобен сложной мозаике - целостный взгляд может быть сформирован только при наличии большого числа мелких фрагментов. Но для собирания этой подробной картины нужно иметь некий предварительный план, общее понятие о функциях всей структуры в целом, возможность выделить основные направления, по которым можно двигаться в поисках отдельных фрагментов.
В формировании такого общего понятия о функциях центросомы очень важными являются прижизненные эксперименты. Основной прием таких

ФОТОКАМЕРА
Рисунок 1. Схема установки для УФ микрооблучения.