Регуляция созревания ооцитов амфибий гонадотропными гормонами гипофиза

• Автор: Скоблина, Мария Николаевна
• Шифр специальности: 03.00.11
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 1998
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 60 с. : ил.; 21х15 см

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность проблемы. Оогенез - одаи из важнейших этапов индивидуального развития. Он завершается созреванием ооцига и формированием зрелого яцйа. Термином “созревание“ в работе обозначается комплекс изменений, происходящих в ооците под действием стимулирующего фактора: изменение структуры и свойств поверхностного (кортикального) слоя цитоплазмы, эндоплазмы и ядра ооцига (Детлаф и др., 1964, 1965). Последнее претерпевает мейоз и у всех позвоночных до оплодотворения находится на метафазе второго деления созревания. Для того, чтобы снермий мог проникнуть в зрелый ооцит, последний должен овулировать - выйти из оболочек, окружающих его в период оогенеза и обеспечивающих его связь с материнским организмом.
В теле самки ооцит созревают и овулируют под влиянием
гонадотропных гормонов гипофиза. Незадолго до наступления сезона
размножения окруженный фолликулярными оболочками ооциг приобретает
способность созревать, а иногда и овулировать при перенесении в солевой
раствор, без дополнительной стимуляции. Это так называемые спонтанные
созревание и овуляция. Чжу-Си и Ван Ю-лан (Tchou-Su and Wang Yu-Lan, 1958)
воспроизвели созревание окруженных фолликулярными оболочками ооцитов
амфибий in vitro. Эго позволило подойти к изучению механизмов
взаимодействия стимулирующих созревание факторов с ооцитом и
окружающими его фолликулярными оболочками. Так, было показано, что
обработка энуклеированных ооцитов жаб суспензией гипофизов не приводит к
изменению их свойств (Детлаф и др., 1964, 1965), а ингибиторы синтеза РНК и
белка (акхиномицин Д и пуромицин) подавляют созревание интактных ооцитов
!'сд влиянием суспензии гипофизов (Детлаф, 1966). На основании этих данных
было высказано предположение о том, что, вызывая созревание ооцига,
гонадотропные гормоны гипофиза действуют на его ядро (зародышевый I
пузырек) (Детлаф и др., 1964, 1965; Детлаф, 1966). Поскольку ооциты, у которых

зародышевый пузырек был заменен ядром со стадии бластулы, не приобретали

ф -'собность к цитотомии, был сделан вывод о необходимости кариоплазмы для
приобретения цитоплазмой ооцига способности к щгготомии (Детлаф и др., 1964, 1965).
Основные цели нашего исследования состояли в дальнейшем изучении механизма действия гонадотропных гормонов гипофиза, стимулирующих созревание и овуляцию ооцитов амфибий, и роли кариоплазмы в становлении свойств зрелого яйца.
Научная новизна работы. Автором впервые показано, что генетический материал ооцига не принимает участия в регуляции реинициации мейоза и независимо и параллельно с Шуетцом (Schuetz, 1967) и Масуи (Masui, 1967) высказано предположение о том, что действие гонадотропинов на созревание ооцитов опосредованно фолликулярными клетками (Скоблина, 1968). В ходе дальнейших исследований удалось разрешить существовавшее в литературе противоречие относительно роли ядер фолликулярных клеток в стимулированном гонадотропинами созревании ооцитов. Было показано, что подавление актиномицином Д (АД) созревания ооцитов, стимулированного гонадотропными гормонами, которое рассматривалось как доказательство участия ядер фолликулярных клеток в контроле созревания, обнаруживается только при использовании высоких концентраций гормонов и обусловлено гиперстимуляцией образования циклического аденозинмонофосфата (цАМФ). Ядра фолликулярных клеток не контролируют стимулированное гонадотропинами созревание ооцитов, но контролируют стимулированный ими сгероидогенез. Поскольку после обработки фолликулов АД и гонадотропином образуется достаточное для созревания ооцитов количество прогестерона, можно думать, что в фолликуле амфибий, как и в ряде стеровдогенных систем млекопитающих, существуют два пути регуляции стероидогенеза: зависимый и независимый от ядра. Показано, что ядра фолликулярных клеток контролируют процесс овуляции. Действие гонадотропинов на овуляцию ооцитов травяной лягушки опосредуется не только просгагландином F, как предполагалось ранее (Schuetz, 1986; Chang et al., 1995), но и прогестероном. Впервые удалось воспроизвести созревание ооцитов амфибий и осетровых рыб под действием холестерина. Показано, что действие холестерина и гонадотропных гормонов

Рис. 7. Влияние SITS на образование прогестерона фолликулами шпорцевой лягушки, стимулированными хорионическим гонадотропином человека (а) и созревание ооцитов (б).
По оси абсцисс - концентрация SITS, мкМ; по оси ординат (а) - содержание прогестерона, пг/фол . (б) - созревание ооцитов, %. Условные обозначения: 0-5 МЕ/мл хориогокина, - 10 МЕ/мл, Л - 20 МЕ/мл. Достоверность различий - как на рис. 5. Остальное - как на рис. 3.
ооцитов при их обработке ДД и низкими концентрациями СГ. Для ответа на этот вопрос мы определили влияние SITS (10 мкМ) на содержание прогестерона и тестостерона в фолликулах трех самок травяной лягушки, стимулированных