Развитие Bdellovibrio в иммобилизованных бактериальных системах хищник-жертва

• Автор: Шорохова, Анна Павловна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1999
• Место защиты: Пущино
• Количество страниц: 152 с.

ОГЛАВЛЕНИЕ
Список сокращений, используемых в диссертации
ВВЕДЕНИЕ
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
ГЛАВА Е Характеристика бактерий рода ВбеПоуШпо
ГЛАВА 2. Экология бактерий рода ВбеНоуНэпо
2.1. Распространение бделловибрионов в природе
2.2. Роль ВбеПоуНэпо в природе
ГЛАВА 3. Иммобилизация бактериальных клеток
3.1. Адгезия микроорганизмов на твердых поверхностях.
Адгезия и когезия - процесс взаимодействия двух
поверхностей
3.2. Роль твердой поверхности в жизнедеятельности микроорганизмов
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ г*'
ГЛАВА 4. Объекты и методы исследования
4.1. Штаммы ВбеПоуШпо и бактерий-жертв
4.2. Среды для культивирования
4.3. Культивирование ВбеНоУЙэпо и клеток бактерии-жертвы
4.3.1. Определение числа клеток бделловибрионов
4.3.2. Определение количества интактных и инфицированных клеток бактерии- жертвы
4.4. Световая микроскопия
4.5. Электронная микроскопия
4.5.1. Ультратонкие срезы
4.5.2. Электронно-микроскопическая криофрактография
4.5.3. Приготовление препаратов для сканирующей микроскопии
4.6. Отделение Вс1е11омЬпо от клеток и мембран бактерии -жертвы

4.7. Изучение гидрофобных свойств клеток.
4.8. Получение бделлопластов бактерии -жертвы.
4.9. Изучение агрегатной устойчивости двухкомпонентной бактериальной системы.
4.10. Определение внеклеточных полисахаридов.
4.10.1. Определение содержания глюкозы в культуральной среде.
4.11. Иммобилизация двухкомпонентной бактериальной системы в ПААГ.
4.12. Иммобилизация Bdellovibrio и бактерии -жертвы на гранулированных и волокнистых носителях.
4.12.1. Взаимодействие Bdellovibrio с углеродноволокнистым носителем.
4.12.2. Подбор оптимальных условий адсорбции.
4.13. Ингибировани внутриклеточного роста бделловибрионов.
4.14. Изучения влияния физико- химических факторов на процессы десорбции клеток двухкомпонентной бактериальной системы с углеродно- волокнистого носителя.
4.15. Эксперименты в искусственно изолированных экосистемах in situ.
4.15.1. Определение общего количества микроорганизмов.
4.15.2. Определение общего количества сапрофитных микроорганизмов.
4.15.3. Определение количества грамотрицательных микроорганизмов.
4.15.4. Определение количества E.coli.
4.15.5. Определение количества псевдомонад.
4.16. Изучение поведения двухкомпонентной бактериальной системы, иммобилизованной на АУВМ-Ш в условиях

непрерывного культивирования.
4.17. Статистический анализ экспериментальных данных. РЕЗУЛЬТАТЫ.
ГЛАВА 5. Иммобилизация двухкомпонентной бактериальной системы в полиакриламидный гель.
5.1. Подбор оптимальных условий иммобилизации.
5.2. Изучение взаимодействия Вс1е11отЬпо с жертвой в матриксе носителя
ГЛАВА 6. Иммобилизация ВйеПохэЬпо и бактерии- жертвы на поверхности гранулированных и волокнистых носителей
6.1.Изучение адгезивной способности Вс1е11оТЬгю и жертвы в отношении различных носителей.
6.2.Влияние времени экспозиции, температуры, pH и плотности бактериальной суспензии на связывание клеток двухкомпонентной системы с носителем.
6.3.Определение удельной емкости АУВМ-3.
6.4.Изучение взаимодействия Вс1е11оу]Ьпо и жертвы на поверхности АУВМ
6.5.Изучение природы сил адгезии клеток двухкомпонентной системы на АУВМ-3.
ГЛАВА 7 Когезия клеток в периодической культуре ВёеИоуйэпо - жертва.
7.1 .Динамика когезии бделлопластов в двухкомпонентной бактериальной системе.
7.2.Изучение агрегатной устойчивости двухкомпонентной системы
Г ЛАВА 8 Иммобилизация Вс1е11о4Ьпо как подход для разработки новых биотехнологических способов обеззараживания загрязненных вод.
8.1 .Влияние интродукции Е сой на динамику численности

детергенты, хлороформ, бензол, фенол и толуол ингибируют процесс взаимодействия Bdellovibrio с клетками бактерий-жертв (Varon a Shilo, 1981).
Выживание Bdellovibrio в природе можно было бы объяснить наличием у этого рода бактерий форм длительного переживания неблагоприятных условий, таких как цисты. Некоторые штаммы Bdellovibrio способны к образованию цист (Burger et al.,1968, Hoenigen et al, 1972, Tudor a Conti, 1977 a,6) -"бделлоцист". Бделлоцисты более устойчивы, чем вегетативные клетки к действию высоких температур, ультрафиолета, ультразвуку, высушиванию.
Однако покоящиеся формы до настоящего времени обнаружены только у двух штаммов бделловибрионов - Bdellovibrio sp. W (Burger et al.,1968, Hoenigen et al, 1972, Tudor a Conti, 1977 а,б) и почвенного штамма, описанного Мишустиным и Никитиной (Мишустин и Никитина, 1972) из более, чем двухсот выделенных к настоящему времени штаммов Bdellovibrio. В то же время, данные о выделении бделловибрионов из почв, хранившихся в высушенном состоянии два года (Germida, 1987), могут свидетельствовать еще недостаточной изученности этого явления и его роли в переживании неблагоприятных условий. По мнению Никитина и Никитиной (1978) образование цист у почвенных штаммов Bdellovibrio является основным путем выживания при уменьшении численности бактерий-жертв, высыхании, изменении аэрации, истощении среды. В двухкомпонентных бактериальных системах этими исследователями были обнаружены мелкие эллипсоидные и палочковидные клетки, поверхность которых покрывала волокнистая капсула толщиной 300 -700А0 (Мишустин и Никитина, 1972).
При общем сходстве ультраструктурной организации бделлоцист Bdellovibrio sp W. и цист почвенного штамма Мишустина и Никитиной, обнаруживается принципиальное различие в топографии процесса цистообразова-ния. Образование покоящихся клеток Bdellovibrio sp. W начинается и заканчивается в периплазме инфицированной клетки жертвы. У почвенного штамма Bdellovibrio все стадии этого процесса осуществляются вне клетки бактерии-жертвы. Являются ли эти пути цистообразования (Tudor a Conti, 1977 а,б;