Влияние полипептида с молекулярной массой 22 КД на свойства клеточной поверхности штаммов возбудителя чумы

• Автор: Заднова, Светлана Петровна
• Шифр специальности: 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1998
• Место защиты: Саратов
• Количество страниц: 139 с.

СПИСОК ПРИНЯТЫХ 8 РАБОТЕ СОКРАЩЕНИЙ
ЛПС - липополисахарид;
белок 22 RD (по- - зона на протеинограмме, соответствующая липептид 22 kD) биополимеру с молекулярной массой 22 kD; м. к. - микробные клетки;
11-ОКС - 11-оксикортикостероиды;
ПААГ-SDS - полиакриламидный гель с додецилсульфатом
натрия;
п/к - подкожно;
ПАФ - полный адъювант Фрейнда;
РА - реакция агглютинации;
РНАТ - реакция нейтрализации антител;
РИГА - реакция непрямой гемагглютинации;
ЭБ - эритроциты барана;
ЭФП - электрофоретическая ПОДВИЖНОСТЬ,
BSA - бычий сывороточный альбумин;
kD - килодальтон;
2МЕ - 2- меркаптоэтанол;
МО - мегадальтон;
PBS - фосфатно-солевой буфер;
PBST - фосфатно-солевой буфер с добавлением
Tween-20;
SDS - натрия додецилсульфат;
TEMED - N,N,N,N,- тетраметилэтилендиамин,
ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ОБЗОР .ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Белки клеточной поверхности грамотрицательных бактерий с адгезивной функцией как факторы патогенности
1.2. Свойства ахромогенных вариантов возбудителя чумы
СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
ГЛАВА 2, МАТЕРИАЛЫ й МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
2.1. Бактериальные штаммы
2.2. Питательные среды, реактивы, оборудование
2.3. Методы исследований
ГЛАВА 3. ИЗУЧЕНИЕ КУЛЬТУРАЛЬНО-МОРФОЛОГИЧЕСКИХ И БИОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ АХРОМОГЕННЫХ ВАРИАНТОВ ВОЗБУДИТЕЛЯ ЧУМЫ
3.1. Выяснение условий появления ахромогенных вариантов возбудителя чумы
3.2. Культурально-морфологические свойства, ультра-структура колоний и чувствительность ахромогенных вариантов к чумным, псевдотуберкулезному, кишечным бактериофагам
3.3. Плазмидный профиль и белковый спектр ахромогенных вариантов
3.4. Определение электрокинетического потенциала кле-

ток ахромогенных вариантов
3.5. Изучение иммунобиологической активности ахромогенных вариантов
ГЛАВА 4. РОЛЬ ПОЛИПЕПТИДА О МОЛЕКУЛЯРНОЙ МАССОЙ 22 kD В
АДГЕЗИВНОЙ АКТИВНОСТИ ШТАММОВ ЧУМНОГО МИКРОБА
4.1. Гемагглютинирушая активность вакцинного штамма Y.pestis EV и ахромогенных вариантов
4.2. Динамика фагоцитарных реакций с перитонеальными макрофагами культуры Y.pestis ЕV и вариантов,
не содержащих полипептида с молекулярной
массой 22 kD
4.3. Электронно-микроскопическое изучение процесса фагоцитоза вакцинного штамма и ахромогенного
варианта
ГЛАВА 5. ПОЛУЧЕНИЕ И СВОЙСТВА БЕЛКОВОГО ПРЕПАРАТА, СОДЕРЖАЩЕГО ПОЛИПЕПТИД С МОЛЕКУЛЯРНОЙ МАССОЙ 22 KD
5.1. Выделение белкового препарата из внешней мембраны штамма Y.pestis EV
5.2. Физико-химическая и нммунохимическая характеристика полученного белкового препарата
5.3. Адгезивные свойства препарата, содержащего полипептид с молекулярной массой 22 kD
5.4. Изучение иммунобиологических свойств препарата, содержащего полипептид с молекулярной массой
22 kD
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

дения бактериальной суспензии. Морские свинки, получившие подкожно
дозы 107 и 1G9 м,т. остались живы. Бактерии исходного штамма и его морфологического мутанта приблизительно в одинаковой степени были способны вызывать образование блоков преджелудка у блох (Классовс-кий с соавт.,1971). Ахромогенный вариант штамма Y.pestis 711, выделенный от обыкновенной полевки, оказался слабо вирулентным для морских свинок (Елкин с соавт.,1972).
Несомненно, что вирулентность как мера патогенности бактерий сформировалась в ходе их эволюционного взаимодействия с хозяевами. В конечном итоге весь ход адаптации бактерий к хозяину нашел отражение в изменении генного аппарата бактерий. В этой связи хотелось бы упомянуть авирулентные аргининзависимые мутанты возбудителя чумы. При изучении их свойств было выявлено, что повреждения близлежащего с Arg“ F-хромосомного локуса проводили к утрате вирулентности и снижению иммуногенности, при этом изменение биологических свойств культур было связано с отсутствием синтеза белка с молекулярной массой 23 kD. Высказано предположение, что это является одной из причин образования вакцинного.штамма (Гуревич,Некляев,1993). йзоэ-V лектрическим осаждением в IT 4.8 получены комплексные препараты липидов и белков, отличающиеся высокой протективностью для Balb/c мышей, только из Y.pestis 231 и 1290, но не из их мутантов по arg F-генам (Коссе с соавт.,1994).
На поверхностный антиген чумного микроба, содержащий фракции 23 kD и 46 kD, получены моноклональные антитела, которые выявляли бактерий возбудителя чумы, выращенные при 37 0 и 28 °С, независимо от плазмидного состава, способности синтезировать капсульный антиген, фазы диссоциации. Показана возможность проведения с помощью полученных моноклональных антител дифференциальной диагностики ти-