Свойства и механизм действия декапептида, соответствующего кортикотропин-подобной последовательности иммуноглобулина G1 человека

• Автор: Лепихова, Татьяна Николаевна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2001
• Место защиты: Пущино
• Количество страниц: 133 с.

Список сокращений
Часть I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. Механизмы взаимосвязи нейроэндокринной и иммунной систем на примере гормонов гипоталамуса и гипофиза
1. Влияние нейроэндокринных гормонов на клетки иммунной системы
1.1. Гипоталамические рилизинг-гормоны
1.2. Кортикотропин
1.2.1. Экспрессия кортикотропина и его предшественника РОМС иммунокомпетентными клетками
1.2.2. Семейство меланокортнновых рецепторов
1.2.3. Рецептор кортикотропина
1.2.4. Влияние кортикотропина на активность иммунокомпетентных клеток
1.3. Тиреотропин, лютеинизирующий гормон и фолликулостимулирующий гормон
1.4. Пролактин и гормон роста
2. Продукция цитокинов нейроэндокринной системой
3. Влияние цитокинов на нейроэндокринную систему
3.1.1Ь
3.2.1Ь
3.3.1Ь
3.4. ПЧ4--у
3.5. ТЫЕ-а
3.6. 1ЛР; 1Ь
3.7. Тимозин аі

Заключение
Часть II. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
Глава I. Материалы и методы
1. Реактивы
2. Экспериментальные животные
3. Клеточные линии
4. Синтетические пептиды
5. Штаммы бактерий
6. Методы выделения и оценки функциональной активности иммунокомпетентных клеток
6.1. Получение спленоцитов мышей
6.2. Плучение тимоцитов мышей
6.3. Реакция бласт-трансформации спленоцитов и тимоцитов мышей in vitro
6.4. Получение макрофагов брюшной полости мышей
6.5. Получение плазматических мембран тимоцитов и макрофагов мыши
6.6. Определение фагоцитарной активности перитонеальных макрофагов in vitro
6.7. Изучение спонтанной миграции макрофагов из капли агарозы
6.8. Определение способности макрофагов к адгезии
6.9. Определение жизнеспособности макрофагов
6.10. Определение способности макрофагов к распластыванию
6.11. Определение активности аденилатциклазы
6.12. Определение внутриклеточного уровня цАМФ
7. Методы культивирования и оценки ростовой активности лейкемических клеток
7.1. Культивирование лейкемических клеток
7.2. Определение пролиферативной активности

8. Кинетическая характеристика взаимодействия изучаемых пептидов с рецепторами методом радиолигандного анализа
8.1. Иодирование пептида - фрагмента кортикотропина 13
8.2. Радиолигандный анализ
8.3. Связывание [3Н]иммунокортина с тимоцитами и перитонеальными макрофагами мыши
8.4. Связывание [3Н]иммунокортина с плазматическими мембранами, выделенными из тимоцитов и перитонеальных макрофагов мыши
Глава II. Результаты работы и их обсуждение
1. Влияние иммунокортина на активность иммунокомпетентных клеток мыши
in vitro
1.1. Влияние иммунокортина на бласт-трансформацию тимоцитов и спленоцитов мыши in vitro. Связывание [|2з1]кортикотропина(13-24) с тимоцитами мыши
1.2. Влияние иммунокортина на активность перитонеальных макрофагов мыши in vitro
1.3. Связывание [3Н]иммунокортина с тимоцитами и макрофагами мыши
1.4. Влияние иммунокортина и кортикотропина(13-24) на активность аденилатциклазы и внутриклеточную концентрацию цАМФ
2. Влияние иммунокортина на пролиферацию лейкемических клеток человека и клеток нейробластомы В103 крысы in vitro
2.1. Влияние иммунокортина на рост клеток человеческой Т-лимфобластной линии МТ-4 in vitro. Связывание [|251]кортикотропина(13-24) с МТ-4 клетками
2.2. Влияние иммунокортина на рост клеток человеческой Т-лимфобластной линии Jurkat, клеток человеческих лейкемических линий промиелоцитарной HL-60 и

продукцию в печени белков острой фазы и нейроэндокринную функцию. В нейроэндокринной системе IL-6 может стимулировать освобождение CRF и таким образом увеличивать уровень кортикотропина и глюкокортикоидов в плазме. Глюкокортикоиды ингибируют синтез и освобождение IL-6 в иммунной и нейроэндокринной системах, и таким образом, предотвращают перепроизводство этого цитокина.
3. Влияние цитокинов на нейроэндокринную систему
Секреция гормонов передней долей гипофиза регулируется с помощью многочисленных механизмов. Они включают действие пептидов, продуцируемых клетками гипоталамуса, и механизмы обратной связи, которые в свою очередь включают гормоны, освобождаемые тканями-мишенями, или гормоны гипофиза. В дополнение к этим хорошо изученным путям, сейчас ясно, что иммунная система оказывает важные эффекты на нейроэндокринную систему. Эффекты цитокинов и присутствие их рецепторов в нейроэндокринной системе являются в настоящее время объектом многочисленных исследований. Особый интерес вызывают IL-2, IL-6, TNF, IFN-y и особенно IL-1. Стимулирование иммунной системы цитокинами оказывает воздействие на секрецию нейроэндокринных гормонов (Таблица 5). Интересно, что увеличение секреции кортикотропина сопровождается ингибированием освобождения TSH, в то время как механизмы действия других гормонов менее взаимозависимы. Очевидно, что цитокины влияют на освобождение гормонов с помощью многочисленных прямых и непрямых механизмов.
С другой стороны связывание ряда гормонов с рецепторами иммунокомпетентных клеток приводит к увеличению внутриклеточной концентрации цАМФ, что в свою очередь вызывает уменьшение синтеза TNF-a [266, 267], IL-2 [268], IFN-y [269, 270] и IL-12 [271, 272], но стимулирует синтез IL-4 [273], 1L-5 [274-275], IL-6 [276] и IL-10 [277, 278].