Сравнительное изучение и прикладная биохимия иммуноглобулина G куньих

• Автор: Кузнецов, Александр Иванович
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2009
• Место защиты: Ижевск
• Количество страниц: 146 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Биохимия и молекулярная биология 1§в представителей 14 семейства куньих
1.2. Препаративная и аналитическая биохимия выделения
1.3. Биохимические основы биотехнологических нововведений для 31 обеспечения инфекционной и биологической безопасности иммуноглобулинов
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
II МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
2.1. Оборудование и реактивы
2.2. Получение плазмы (сыворотки) крови
2.3. Биохимические методы
2.4. Иммунологические методы
2.5. Микробиологические методы
2.6. Способы расчета показателей
2.7. Статистическая обработка результатов
III РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
3. Схема выделения и сравнительное изучение гомологии ЫС 48 человека и животных
3.1. Получение видовых
3.2. Разработка лабораторного набора для определения 1§0 норки
3.3. Исследование антигенной структуры видовых 1рС в 70 гомологичной системе анализа (1§С норки - аити-1§С норки)
4. Прикладная биохимия фракционирования плазмы (сыворотки) 84 крови норки с целью получения биопрепаратов на основе
4.1. Способ получения и хранения фракции из плазмы

(сыворотки) крови
4.2 Характеристика Ст фракции, полученной с помощью риванола
4.3. Характеристика 1§С фракции, полученной с помощью 95 каприловой кислоты
4.4. Изучение инфекционных и антигенных свойств
экспериментальных серий иммуноглобулинового биопрепарата ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ДИД - двойная иммунодиффузия
ИПК - иммуннопероксидазный конъюгат ИФА - иммуноферментный анализ МПА - мясопептонный агар
ОП493 ~ оптическая плотность при длине волны 493 нм ПААГ - полиакриламидный гель ПЭГ - полиэтиленгликоль САН - сывороточный альбумин норки А - иммуноглобулин класса А 10 - иммуноглобулин класса в - иммуноглобулин класса М ТУ - технические условия ФС - фармакопейная статья ФСП - фармакопейная статья предприятия

Методы химической инактивации вирусов, основанные на способности проникновения веществ, в т.ч. через липидную оболочку, и нарушающие структуру-функцию вирусного генома, имеют как правило ограниченное применение. Б частности, этанол и фенол в концентрациях 40% и 3% обладают вирусинактивирующим эффектом. Одним из наиболее эффективных методов уничтожения парвовируса считается обработка Инактином -низкомолекулярным электрофильным соединением, которое связывается с вирусной ДНК или РНК, препятствуя их репликации [Lazo et al., 2002]. Подобным образом действует йодоацетальдегид при инактивации вируса гепатита А. Эти способы обработки совместимы с использованием сольвеит(три-н-бутилфосфат)/детергентной(твин-80 или тритон Х-100) инактивации [Панов, 2004]. Важно также, что сольвент-детергенная обработка не вызывает денатурации лабильных белков плазмы, таких, например, как фактор VIII [Kim et al., 2000]. Его использование позволяет инактивировать только оболочечные вирусы, такие как гепатит В и С, а также ВИЧ. Именно поэтому в практике фракционирования плазмы используется комбинированный прием инактин-йодоацетальдегид и сольвент-детергентная инактивация. Именно так удалось в значительной степени снизить риск передачи ВИЧ и в меньшей степени гепатитов. Сходная идеология заложена в систему двойной инактивации - химическая обработка дополнена ультрадиафильтрацией или прогревом [Terpstra et al., 2006; Teschner et al., 2007]. Комбинированные физико-химические методы обеззараживания построены аналогичным образом. Плазму или препараты плазмы подвергают облучению видимым либо УФ-светом в присутствии малых концентраций химических реагентов-красителей, таких как метиленовый синий или дельта-пропиолактон [Specht, 1994]. К недостаткам фотодинамических приемов инактивации относят их недостаточный обеззараживающий эффект в отношении вирусов, не имеющих липидной оболочки, а также необходимость удаления продуктов их распада [Wagner et al.,. 1994]. Для инактивации вирусов в препаратах фактора IX использовали нагревание концентрата в виде