Цитогенетические эффекты нейтронной терапии у больных злокачественными новообразованиями

• Автор: Мельников, Александр Александрович
• Шифр специальности: 03.02.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Томск
• Количество страниц: 142 с. : 16 ил.

СОДЕРЖАНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Радиационно-индуцированный хромосомный дисбаланс и методы его регистрации
1.1.1. Общие представления о закономерностях и механизмах возникновения радиационно-индуцированных хромосомных мутаций
1.1.2. Методы регистрации радиационно-индуцированных хромосомных аномалий
1.2. Особенности цитогенетических эффектов лучевой терапии у больных злокачественными новообразованиями
1.2.1. Уровень хромосомных мутаций в лимфоцитах периферической крови онкологических больных
1.2.2. Частота и спектр цитогенетических аномалий у больных злокачественными новообразованиями при различных видах лучевой терапии
1.2.3. Факторы, модифицирующие цитогенетические эффекты лучевой терапии у онкологических больных
1.3. Дистанционная нейтронная терапия
1.3.1. Радиобиологическое обоснование применения нейтронного излучения в онкологии
1.3.2. Лучевые повреждения нормальных тканей больных злокачественными новообразованиями при нейтронной терапии
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Объем и структура материала
2.2. Нейтронная терапия местных рецидивов рака молочной железы и опухолей головы и шеи

2.3. Методы цитогенетического анализа
2.3.1. Культивирование клеток и приготовление препаратов для цитогенетического анализа
2.3.2. Цитогенетический анализ хромосомных аберраций
2.4. Методы молекулярно-цитогенетического анализа
2.4.1. Приготовление препаратов двухъядерных цитокинез-блокированных лимфоцитов периферической крови человека
2.4.2. Получение центромеро-специфичных ДНК-зондов
2.4.3. Флуоресцентная in situ гибридизация (FISH)
2.4.4. Оценка частоты кластогенных и анеугенных нарушений
2.5. Метод детекции флуоресцентных фокусов белков репарации ДНК
2.5.1. Выделение лимфоцитов периферической крови и приготовление препаратов
2.5.2. Иммуноокрашивание препаратов лимфоцитов
2.5.3. Получение изображений и оценка фокусов белков
репарации ДНК
2.6. Статистические методы
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Динамика хромосомных мутаций у больных с местными рецидивами рака молочной железы и больных новообразованиями головы и шеи при нейтронной терапии
3.1.1. Аберрации хромосомного и хроматидного типа в лимфоцитах больных до лечения быстрыми нейтронами
3.1.2. Частота и спектр хромосомных аберраций при нейтронной терапии
3.2. Изучение кластогенных и анеугенных нарушений хромосом у больных с местными рецидивами рака молочной железы и больных новообразованиями головы и шеи при нейтронной терапии
3.2.1. Оценка частоты и спектра микроядер в лимфоцитах больных злокачественными новообразованиями до лечения быстрыми нейтронами
3.2.2. Частота кластогенных и анеугенных событий в лимфоцитах онкологических больных при нейтронной терапии
3.3. Межгрупповой анализ цитогенетических эффектов в лимфоцитах больных с местными рецидивами рака молочной железы и больных опухолями головы и шеи
3.4. Оценка связи активности репарационной системы и радиационно-индуцированного хромосомного дисбаланса в лимфоцитах больных
злокачественными новообразованиями после нейтронной терапии
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЯ

В работах по исследованию уровня цитогенетических аномалий в лимфоцитах онкологических больных обращает на себя внимание значительное повышение уровня обменных аберраций хромосомного типа. Так было показано, что уровень дицентрических и кольцевых хромосом в лимфоцитах больных с гиперплазией предстательной железы превышает контрольный уровень в 3 раза (0,0033 ± 0,0008 % на клетку против 0,001 ± 0,0001 %, р<0,05). При этом общий уровень хромосомных аберраций у данной когорты больных не отличался от общепопуляционного (0,029 ± 0,002 % и 0,026 ± 0,0009 %, соответственно) (Бочков с соавт., 2005). По мнению некоторых исследователей, наличие дицентрических и кольцевых хромосом в лимфоцитах периферической крови онкологических больных связано с повышенной чувствительностью генома соматических клеток к ионизирующей радиации у этой категории больных (Polishchuk, Nesina, 1995; Vodicka et al., 2010).
Механизм появления аберрантных клеток в лимфоцитах онкологических больных сложен и до настоящего времени неясен. По данным ряда авторов, хромосомная нестабильность, определяемая в лимфоцитах, может быть результатом влияния неопластических клонов и/или каких-либо субстанций кластогенной природы, выделяемых опухолью. Появление структурных аберраций хромосом может быть обусловлено также дефектами репарации ДНК, следствием чего является повышение чувствительности лимфоцитов к факторам экзогенной и эндогенной природы (Iarmarcovai et al., 2008). Ряд исследователей склонен утверждать, что повышенный уровень хромосомных аберраций в лимфоцитах периферической крови онкологических больных связан с изменением гормонального статуса организма (Бочков и соавт., 2005; Aristei et al., 2009).
Возникновение хромосомных нарушений может быть результатом влияния перикисно-модифицированных форм липопротеинов, которые выделяются иммуноцитами при иммунологических конфликтах и не инактивируются за счет дефектов в антиоксидантной системе клеток