Разработка комплекса диагностических наборов для выявления, идентификации и определения чувствительности к антибиотикам урогенитальных микоплазм

• Автор: Заручейнова, Ольга Валентиновна
• Шифр специальности: 03.02.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2015
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 141 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
Введение
Актуальность темы исследования
Степень разработанности темы исследования
Цель исследования
Основные задачи исследования
Научная новизна исследования
Теоретическая и практическая значимость исследования
Методология и методы исследования
Личный вклад автора в получении результатов
Основные положения диссертации, выносимые на защиту
Степень достоверности и апробация результатов 3
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Характеристика Mycoplasma hominis и Ureaplasma spp.
1.2. Факторы патогенности микоплазм
1.3. Распространенность микоплазменной инфекции, ассоциированной
с М. hominis и Ureaplasma spp.
1.4 Лабораторная диагностика микоплазменных инфекций
1.4.1. Микробиологическая (культуральная) диагностика
1.4.2. Серологические методы исследования
1.4.3. Молекулярно-биологические методы лабораторной диагностики
1.5. Лечение микоплазменных инфекций 5
СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
ГЛАВА 2. Разработка селективных питательных сред для выявления
М. hominis и Ureaplasma spp.
2.1. Питательная основа для конструирования селективных питательных
сред для выявления М. hominis и Ureaplasma spp.
2.2. Конструирование питательных сред для выявления М. hominis
(и для выявления Ureaplasma spp.)
2.3. Повышение селективности питательных сред для культивирования урогенитальных микоплазм
2.4. Оценка ростовых и селективных свойств разработанных питательных сред для культивирования урогенитальных микоплазм
2.5. Разработка защитной среды
2.6. Разработка транспортной среды для обеспечения сохранения жизнеспособности урогенитальных микоплазм и универсальной питательной среды для одновременного выявления М. hominis и Ureaplasma spp.
2.7. Определение сроков годности разработанных питательных сред Г ЛАВА 3. Разработка диагностических наборов для определения чувствительности М. hominis и Ureaplasma spp.
к антибактериальным препаратам в биоматериале
3.1. Изучение чувствительности к антибактериальным препаратам М. hominis и Ureaplasma spp.
3.2. Разработка наборов реагентов для выявления и определения антибиотикочувствительности М. hominis и Ureaplasma spp.
3.3. Разработка набора реагентов для одновременного выявления М. hominis и Ureaplasma spp. и определения их антибиотикочувствительности
3.4. Определение сроков годности стрипов с антибиотиками и определение их специфической активности
ГЛАВА 4. Изучение диагностической эффективности разработанных питательных сред и наборов
4.1. Сравнение выявляемое микоплазменной инфекции культуральным методом и методом полимеразной цепной реакции
4.2. Результаты испытания разработанных наборов, предназначенных для выявления и определения антибиотикочувствительности урогенитальных микоплазм, с зарубежными аналогами ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
ПЕРЕСПЕКТИВЫ ДАЛЬНЕЙШЕЙ РАЗРАБОТКИ ТЕМЫ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
Приложение № 1
Приложение № 2
Приложение № 3
Приложение № 4
Приложение № 5

Основные положения диссертации, выносимые на защиту
1. Разработанные селективные питательные среды позволяют выявлять М. hominis и Ureaplasma spp. и определять их количественное содержание в биоматериале, а разработанная универсальная питательная среда дает возможность проводить одновременное выявление и количественное определение М. hominis и Ureaplasma spp. в лунках стрипов с сорбированными в них специфическими субстратами.
2. На основании установленных минимальных подавляющих концентраций 19 антибиотиков разработаны три набора реагентов для определения антибиотикочувствительности М. hominis и Ureaplasma spp. с использованием полученных селективных питательных сред.
3. Совпадение результатов по выявляемое возбудителей культуральным методом и методом ПЦР составляет 97,5% для Ureaplasma spp. и 93,5% для М. hominis, а разработанные наборы реагентов для определения антибиотикочувствительности сравнимы по эффективности с наборами зарубежных аналогов.
Степень достоверности и апробация результатов
О достоверности результатов работы свидетельствует использование как классического метода исследования - культуральной диагностики, которая является «золотым стандартом» при исследовании микоплазменных инфекций, так и современного молекулярно-генетического метода исследования - ПЦР Достоверность полученных данных основана на большом объеме исследованного материала, воспроизводимости результатов и основных характеристик на каждом этапе разработки питательных сред и диагностических наборов согласно научно-технической документации, таких как стерильность, специфичность, селективность. Экспериментальные данные подвергнуты статистической обработке.
Диссертация апробирована на заседании Ученого совета Федерального бюджетного учреждения науки «Санкт-Петербургский научно-исследовательский