Доставка любой диссертации в формате PDF и WORD за 499 руб. на e-mail - 20 мин. 800 000 наименований диссертаций и авторефератов. Все авторефераты диссертаций - БЕСПЛАТНО
Доманицкая, Наталья Васильевна
03.01.04
Кандидатская
2014
Новосибирск
97 с. : ил.
Стоимость:
499 руб.
ОГЛАВЛЕНИЕ
ОГЛАВЛЕНИЕ
Список сокращений
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность проблемы
Основные цели и задачи исследования
Научная новизна работы
Научно-практическая значимость
Основные положения, выносимые на защиту
Апробация работы
Публикации
Структура и объем диссертации
Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1 Л. Рак молочной железы. Классификация
1.1.1. Химиотерапия опухолей
1.1.2. Таксаны: механизм действия
1.2. Множественная лекарственная устойчивость
1.2.1. Механизмы множественной лекарственной устойчивости
1.2.2. АВС-транспортеры: структура и механизм действия
1.2.3. АВСС - подсемейство белков множественной лекарственной устойчивости (MRP)
1.2.4. АВСС 10 белок множественной лекарственной устойчивости
1.2.5. Мышиная модель, нокаутная по гену AbcclO
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. Материалы
2.2. Методы
2.2.1. Клеточные культуры
2.2.2. Доклиническая мышиная модель рака молочной железы MMTV-PyVmT
2.2.3. Ортотопическая модель рака молочной железы
2.2.4. Получение первичных клеточных культур из опухолей, развившихся у MMTV-PyVT ;АЬсс10+/+ и MMTV-PyVT^ôcc/O'7' мышей
2.2.5. Определение клеточной пролиферации in vitro
2.2.6. Тест на формирование колоний
2.2.7. Тест на "зарастание раны"
2.2.8. Определение адгезионной активности клеток
2.2.9. Анализ апоптоза
2.2.10. Анализ клеточного цикла
2.2.11. Измерение накопления [3Н]-доцетаксела в клетках
2.2.12. Количественная ПЦР в реальном времени
2.2.13. Вестерн-блот анализ
2.2.14. Иммуннофлуоресцентный анализ
2.2.15. Иммуногистохимический анализ
2.2.16. Статистическая обработка результатов
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ
3.1. Экспрессия АВСС
3.1.1. Анализ экспрессии белка АВСС10 в клеточных линиях рака молочной железы человека
3.1.2. Анализ экспрессии гена АВСС10 в нормальной и опухолевой тканях молочной железы человека
3.1.3. Анализ экспрессии белка АВСС10 в опухолевой ткани молочной железы
человека методом иммуногистохимического анализа
3.2. Влияние экспрессии АВСС10 на развитие рака молочной железы и
терапевтический эффект доцетаксела
3.2.1. Характеристика опухолей молочной железы MMTV-PyVmTAbcclO*1' и
MMTV-PyVmT;^6cc70'A мышей
3.2.1.1....Влияние АВСС10 на скорость роста опухолей молочной железы PyVmT мышей
3.2.1.2 Влияние AbcclO на агрессивность и метастазирование рака молочной
железы
3.2.2. Характеристика первичных культур клеток, полученных из MMTV-PyVmT'^4bccl0+/+ и MMTV-PyVmT^4^cc/0’A опухолей
3.2.2.1. Морфофизиологические характеристики MMTV-PyVmT',AbcclO+/l и MMTV-PyVmT;A6cc./(7/' первичных культур клеток
3.2.2.2. Влияние экспрессии АВСС10 на экспрессию ABC-транспортеров
3.2.3. Цитотоксическая характеристика MMTV-PyVmT;AbcclO+/+ и MMTV-РуУтТ;АЬсс10_/" клеточных линий in vitro
3.2.3.1. Повышенная чувствительность AbcclO нокаутных клеточных линий к химиотерапевтическим препаратам
3.2.3.2. Влияние доцетаксела и паклитаксела на развитие апоптоза и арест клеточного цикла
3.2.3.3. Накопление доцетаксела, как субстрата АВСС10, в MMTV-PyVmT;A6cc70+/+ и MMTV-PyVmT;^6cc70'A клетках
3.2.4. Цитотоксическая характеристика MMTV-PyVmT;A7>cc70+A" и MMTV-РуУтТ;Л&сс70"л клеточных линий in vivo
3.2.5. Влияние экспрессии АВСС10 на терапевтический эффект доцетаксела
Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2Л. Материалы
В работе использовались следующие материалы и реактивы: этиловый спирт, фенол, ксилол, изопропиловый спирт - категории ОСЧ
• Трис-НС
• Протеазные ингибиторы: 5 мкг/мл апротинин, 5 мкг/мл леупептин, 2 мкг/мл пепстатин, 100 мМ фенил-метил-сульфонил флуорид (PMSF)
• Бычий сывороточный альбумин
• PBS (без содержания магния и кальция)
• Питательная среда DMEM 20% FBS
• Поликлональные антитела к АВСС
• Моноклональные антитела к АВСС
• Антитела к АВСВ
• Антитела к АВСС
• Антитела к Кт-
• Антитела к Саяразе
• Антитела к СОЗ
• Вторичные анти-мышиные антитела, конъюгированные с пероксидазой хрена
• Вторичные анти-кроличьи 1§С антитела, конъюгированные с пероксидазой хрена
Sigma-Aldrich (США)
Sigma-Aldrich (США)
Sigma-Aldrich (США) Invitrogen (США) Invitrogen (США)
E. Hopper-Borge (Fox Chace Cancer Center, США)
E. Hopper-Borge (Fox Chace Cancer Center, США)
Santa Cruz
Biotechnology (США) Santa Cruz
Biotechnology (США) Abeam (США)
Abeam (США)
Abeam (США)
NEN (США)
NEN (США)
Название работы | Автор | Дата защиты |
---|---|---|
Маркеры нейродегенерации при рассеянном склерозе (клинико-биохимическое исследование) | Воробьева, Анна Александровна | 2014 |
Структурно-функциональная характеристика вольт-сенсорного домена калиевого канала KvAP и k-терафотоксина-Gr3a полученных в бесклеточных белоксинтезирующих системах | Карбышев, Михаил Сергеевич | 2014 |
Биохимическая оценка эффективности альбуминового и цитозольного диализа на аппарате "биоискусственная печень" | Полевщикова Елена Евгеньевна | 2017 |