Структурно-функциональная организация хромосом и изменение генома у трансгенных сельскохозяйственных животных

• Автор: Козикова, Лариса Васильевна
• Шифр специальности: 03.00.15
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2005
• Место защиты: Санкт-Петербург, Пушкин
• Количество страниц: 321 с. : ил.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ГЕНЫ :
hGRF - рилизинг фактор гормона роста человека
hGH - гормон роста человека
hGH - гормон роста свиньи
rGH - гормон роста крысы
bGH - гормон роста быка
IGF-I - инсулин-подобный фактор роста человека
ТК - тимидин киназа
trHSV - тимидин киназа вируса простого герпеса
F IX - фактор IX свертываемости крови человека
MT-I - промотор гена металлотионеина мыши
MT-II - промотор гена металлотионеина человека
МТ - микроядерный тест
ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота
РНК - рибонуклеиновая кислота
т.п.н. - тысяч пар нуклеотидов Tris - гидроксиметил-аминометан
ЭДТА - этилендиаминтетрауксусная кислота BLG - бычий лактоглобулин
BST - бычий соматотропин
BSA - фетальная сыворотка телят
hCG - хорионический гонадотропин
PMSG -сывороточный гонадотропин Gl; G2; S; и М- периоды клеточного цикла BrdU - бромдезоксиуридин

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
І.І.Структурно-функциональная характеристика хромосом и гетсрохроматина
1.1.2. Характеристика генома птиц
1.1.3. Нарушения структуры и функции хромосом
1.1.4. Использование методов трансгеноза для изучения структурно-функциональных характеристик хромосом
1.2. Линейная дифференцированность хромосом
1.2.1. Дифференциальная окраска хромосом
1.2.2.0рганизация генома и линейная дифференцированность хромосом
1.3. Репродукция хромосом
1.3.1 .Молекулярные аспекты репликации ДНК
1.3.2.Клеточный цикл
1.3.3.Меж- и внутрихромосомная асинхронность синтеза ДНК
1.4. Трансгеноз
1.4.1. Методы генетической модификации генома млекопитающих
1.4.2. Введение рекомбинантных плазмид в ядро оплодотворенной яйцеклетки
1.4.3. Эффективность трансгеноза у лабораторных и сельскохозяйственных животных

1.4.4. Молекулярные механизмы трансгеноза
1.4.5. Экспрессия генных конструкций
1.4.6. Выведение линий трансгенных животных
1.4.7. Особенности роста трансгенных животных
1.4.8. Активация эмбрионального генома
1.4.9. Перспективы использования трансгенных животных
1.5. Заключение к обзору литературы
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
2.1. Материал исследования
2.2. Приготовление препаратов митотических хромосом
2.2.1 .Получение препаратов митотических хромосом из культуры эмбриональных фибробластов кур
2.2.2. Приготовление препаратов хромосом из клеток костного мозга
2.2.3. Культивирование лейкоцитов периферической крови и приготовление препаратов хромосом
2.3 Метод авторадиографии
2.3.1. Применение авторадиографии для исследования репродукции хромосом
2.3.2. Анализ радиоавтографов
2.3.3. Авторадиографический анализ зигот кроликов и получение ультратонких срезов
2.4. Методы, выявляющие линейную дифференцированность хромосом
2.4.1. О-окраска хромосом кур и свиней
2.4.2. ЯВА-окраска хромосом кролика
2.5. Денситометрия

серебра на единицу длины хромосомы оказалось, что длительность процесса репликации хромосом не зависит от размера хромосомы. Ярким примером межхромосомной репликации служит синтез ДНК в ХХ-хромосомах млекопитающих. Одна из половых хромосом по характеру репликации не выделяется среди хромосом группы G. Другая, гетерохроматизированная X-хромосома, в течение первых двух часов остается не меченой, а к концу S-периода реплицируется (Giannelli, 1970).
При сопоставлении картин репликации ДНК в различных типах клеток были получены противоречивые результаты. По данным одних авторов при сравнении характера синтеза ДНК в хромосомах культуры лейкоцитов и фибробластов человека были обнаружены различия в поведении хромосом ( Prokofieva-Belgovskaya, 1968 ). Полученные различия автор объясняет особенностями состояния (конденсированное и деконденсированное), а также дифференциальным функционированием разных типов клеток. Другие исследователи не выявили различий по репликации ДНК хромосом в тканях китайского хомячка: роговица, тимус, селезенка, костный мозг и в клетках гемопоэтической ткани человека: лимфоциты, эритробласты, клетки костного мозга ( Martin, 1967 ).
Как показали многочисленные исследования, выполненные на разных клетках эукариотов, каждая хромосома обладает специфичным и постоянным рисунком репликации (Захаров, 1977 ).
Первая авторадиографическая работа на хромосомах птиц была проведена с целью выяснения характера репликации ДНК в трудно идентифицируемой половой W-хромосомы самок. Фредерик (Frederic, 1961 ) показал, что в кариотипе птиц W-хромосома является самым поздним репликантом. Учитывая это свойство, автор предложил использовать метод авторадиографии для идентификации W-хромосомы.
По данным В. Шмида (Schmid, 1962), период G2 занимает 2 часа в клетках костного мозга кур. Кроме того, автор выявил синхронный характер репликации на протяжении последних двух часов S-периода обеих ZZ-