Влияние эндоморфина-2, сойморфина и N-концевого фрагмента ноцицептина на поведение детенышей белых крыс

• Автор: Чеснокова, Екатерина Алексеевна
• Шифр специальности: 03.03.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 204 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1. Опиоидная медиаторная система и исследуемые в работе опиоидные пептиды..
Общие свойства опиоидных рецепторов. Типы опиоидных рецепторов
Онтогенез опиоидной и ноцицептиновой систем мозга
Пептидные лиганды опиоидных рецепторов. Их проникновение через кишечный и
гемато-энцефалический барьеры
Эндоморфины и их опиоидные свойства
Сойморфины и их опиоидные свойства
Антиопиоидный пептид ноцицептин - лиганд рецептора ORLi
2. Зависимость поведения лабораторных крыс от пола, возраста, схемы введения препаратов и сроков тестирования. Зависимость эффектов опиоидных пептидов от
этих факторов
Зависимость поведения лабораторных крыс от пола
Различия в действии опиоидных лигандов на животных разного пола
Зависимость поведения лабораторных крыс от возраста
Эффекты повторного тестирования
Отставленные эффекты фармакологических препаратов при неонатальном введении
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Острое и хроническое введение эндоморфина-
Острое и хроническое введение сойморфин-5-амида
Острое и хроническое введение аналога ноцицептина FGGF-NH
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
Влияние острого введения пептидов на поведение детенышей крыс
разного возраста
Влияние хронического неонатального введения пептидов на поведение детенышей
крыс разного возраста
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
Список основных сокращений
ГЭБ - гемато-энцефалический барьер ЛП - латентный период
ОИР - ориентировочно-исследовательская реакция ОП - открытое поле
ПКЛ - приподнятый крестообразный лабиринт СЛ - сложный лабиринт
УРПР1 - условная реакция пассивного избегания
ЦНС - центральная нервная система
ANOVA - ANalysis Of Variance
BDNF - brain-derived neurotrophic factor
DMSO - диметилсульфоксид
i.c.v. - интрацеребровентрикулярно
N/OFQ - nociceptin/orphanin FQ
NTS - nucleus tractus solitarius
ORL] - opioid receptor-like receptor
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность проблемы
В настоящее время в организме человека и животных обнаружены сотни эндогенных олигопептидов. Короткие пептиды действуют на всех уровнях межклеточной сигнализации - от ауто- и паракринного до гормонального. В нервных клетках пептиды могут служить нейромедиаторами или модуляторами действия медиаторов иной химической природы (Ашмарин, 1996). Некоторые пептиды, обладающие биологической активностью, не являются эндогенными, а всасываются в кровь через слизистую кишечника после неполного расщепления белков пищи (Hartmann, Meisel, 2007). Доля пептидов среди продуктов ферментативного расщепления белков особенно велика в кишечнике грудных детей в связи с возрастными особенностями пищеварения (Зуфаров, 1998).
Одной из наиболее активно изучаемых групп регуляторных пептидов является семейство опиоидов. Эндогенные опиоидные пептиды играют важную роль в контроле болевой чувствительности, врожденных поведенческих реакций, обучения и других функций центральной и периферической нервной системы. Опиоидные пептиды, попадающие в организм с пищей, объединяются под общим названием «экзорфины». У ряда опиоидных пептидов обнаружены не только эффекты, проявляющиеся сразу после введения, но и отставленное действие, регистрируемое через несколько недель и даже месяцев после получения пептида. Отставленные эффекты особенно выражены при хроническом введении пептида в раннем возрасте (Малиновская, 2001; Беляева, 2008).
Все опиоидные пептиды обладают рядом общих свойств, но отличаются друг от друга по первичной структуре и по сродству к разным типам опиоидных рецепторов, а следовательно, и по спектру физиологического действия. При изучении влияния пептидов на центральную нервную систему обычно используют интрацеребровентрикулярный (i.c.v.) способ введения, гарантирующий попадание рассматриваемого вещества в мозг в нужной дозе. Однако i.c.v. введение плохо подходит для изучения поведения, поскольку эксперимент включает хирургическую операцию по вживлению канюли, вызывающую сильный стресс у подопытных животных. В то же время внутрибрюшинная инъекция является одним из наименее травматичных способов введения веществ и при этом обеспечивает

условного рефлекса пассивного избегания (Ukai, Watanabe, 2001; Ukai, Lin, 2002).
В подавлении эндоморфинами долговременной памяти задействованы, как минимум, холинергическая и дофаминергическая системы мозга. Показано, что оба пептида уменьшают выброс ацетилхолина в ответственных за память зонах ЦНС, и такое уменьшение опосредуется р-рецепторами (Ragozzino et al., 1994). Было обнаружено, что центральное введение эндоморфинов увеличивает экспрессию мРНК BDNF в гиппокампе и миндалине (Zhang et al., 2006). BDNF участвует в механизмах синаптической пластичности, таких как долговременная потенциация, обучение и память (Huang and Reichardt, 2001; Malcangio and Lessmann, 2003).
Эндоморфины также вызывают повышение уровня горизонтальной и вертикальной двигательной активности. Интересно, что кривая дозозависимости в этом случае имеет колоколообразную форму; эффект эндоморфина-2 проявляется при введении в меньших концентрациях, чем в случае эндоморфина-1 (Bujdoso et al., 2001а, b). Возможно, что повышение эндоморфином-2 локомоторной активности животных (как и активация гипоталамо-гипофизарно-адреналовой системы) опосредуется кортикотропин-рилизинг гормоном (Bujdoso et al., 2001а).
Помимо этого, с помощью эндоморфинов осуществляется регуляция полового поведения - например, эндоморфин-1 ингибирует прогестин-вызванный лордоз, воздействуя на р-рецепторы медиальной преоптической зоны (Sinchak, Micevych, 2001). Показано также, что подавление полового поведения самок эстрогеном опосредуется через активацию опиоидами р-рецепторов с их последующей интернализацией, а прогестерон оказывает обратное действие (Sinchak, Micevych, 2001).
Влияние эндоморфинов на потребление пищи имеет орексигенную направленность (Asakawa et al., 1998). Обнаружено, что опиоидная система (и в том числе эндоморфины-1 и -2) играет важную роль в поддержании целостности слизистой оболочки кишечника (Gyires, Zadori, 2008). К протекторным эффектам эндоморфинов можно отнести снижение эндоморфином-1 вызванного кадмием повреждения печени за счет антиоксидантного действия (Gong, Chen, 2008).
Помимо нервной системы р-опиоидные рецепторы есть также на лимфоцитах, моноцитах и полиморфноядерных лейкоцитах, что указывает на участие их лигандов в регуляции иммунитета. Показано, что эндоморфины-1 и -2 выделяются