Молекулярно-генетический анализ классов I и II главного комплекса гистосовместимости в связи с устойчивостью и восприимчивостью к гемобластозам крупного рогатого скота айрширской породы

• Автор: Карамышева, Елена Евгеньевна
• Шифр специальности: 16.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1998
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 193 с. : ил.

Введение
1. Обзор литературы
1.1. Определение , современная терминология и происхождение
гемобластозов
1.2.Этиология и патогенез гемобластозов
1.3. История открытия и изучения Главного комплекса гистосовместимости человека и млекопитающих. Его номенклатура
1.4. Главный комплекс гистосовместимости крупного рогатого скота (ВоЬА)
1.5. Антигены Главного комплекса гистосовместимости и
болезни
1.5.1. Механизмы возможных связей между антигенами Главного комплекса гистосовместимости и болезнями
1.5.2. Связь НЬА-антигенов с опухолями и лейкозами
1.5.3. Связь антигенов Главного комплекса гистосовместимости сельскохозяйственных животных и птиц с болезнями
2. Собственные исследования
2.1. Материалы и методы исследования
2.1.1. Характеристика животных
2.1.2. Гематологические методы исследования
2.1.3. Серологические и вирусологические методы исследования
2.1.4. Приготовление гистопрепаратов
2.1.5. Характеристика сывороток
2.1.6. Выделение чистых лимфоцитов из крови крупного рогатого скота
2.1.7. Постановка микроцитотоксического теста
2.1.8. Методы иммуногенетического анализа
2.1.9. Выделение ДНК
2.1.10. Определение концентрации ДНК

2.1.11. Переосаждение ДНК
2.1.12. Полимеразная цепная реакция (ПЦР)
2.1.13. Рестрикция продуктов амплификации
2.1.14. Аллельспецифичная ПЦР
2.1.15. Электрофорез продуктов амплификации
2.2. Результаты собственных исследований
2.2.1. Результаты патоморфологических и гистологических исследований
2.2.2. Особенности распределения ВоЬА-антигенов в популяции айрширской породы крупного рогатого скота
2.2.3. Сравнительная характеристика антигенов гистосовместимости в связи с заболеваемостью лейкозом
2.2.4. Оценка коров айрширской породы на устойчивость и восприимчивость к гемобластозам крупного рогатого скота методом статусметрии
2.2.5. ПЦР - ПДРФ типирование больных, вирусоносителей и здоровых животных по локусу ВоЬА
2.2.6. Наблюдаемая и ожидаемая гетерозиготность в популяции айрширского скота
2.2.7. Продуктивность коров айршиской породы и ее связь с устойчивостью и восприимчивостью к гемобластозам крупного рогатого скота
2.3. Обсуждение полученных результатов
3. Выводы
Практические предложения
Список используемой литературы
Приложение
Введение.

Актуальность темы. Гемобластозы занимают одно из ведущих мест среди широко распространеных инфекционных болезней крупного рогатого скота.
Гемобластозы сельскохозяйственных животных представляют актуальную проблему современной науки и имеют общебиологическое, медиковетеринарное, социальное и народнохозяйственное значение. В настоящий момент накоплен большой материал по изучению заболеваемости лейкозом разных пород крупного рогатого скота.
Гемобластозы животных относятся к тяжелым, с летальным исходом, заболеваниям опухолевой природы, основным признаком которых является злокачественное распространение клеток кроветворных органов с нарушением их созревания.
Заболевание наносит большой экономический ущерб народному хозяйству, который состоит из потери от ограничений реализации племенного молодняка, утраты генофонда высокопродуктивных животных и недоброкачественной продукции. В тканях животных, больных гемобластозами, накапливаются метаболиты, являющиеся онкогенными веществами. В настоящее время установлено, что основным этиологическим фактором лейкоза является вирус лейкоза крупного рогатого скота (ВЛ КРС). Изучены структура, химические, биологические, иммунологические свойства данного вируса, найден метод культивирования в лабораторных и промышленных условиях. Одновременно с выделением ВЛ КРС был изолирован вирус, который отнесен к иммунодефицитоподобному вирусу крупного рогатого скота. Интерес к данному возбудителю возрос после выделения вируса иммунодефицита человека (ШУ), так как этот возбудитель мог быть использован в качестве модели для изучения вируса человека. Установлено также, что ретровирус типа С, также вызывающий лейкозы у крупного рогатого скота, структурно и функционально сходен с ви-

mura T. et al., 1992). Величина относительного риска отражает выраженность ассоциации с болезнью и показывает во сколько раз больше риск возникновения заболевания у индивидуумов, несущих в фенотипе определенный тканевой антиген по сравнению с теми, кто не имеет этого антигена.
Предполагается два вида связей МНС с болезнями:
1. Сцепление локусов “disease’ и МНС (локуса класса I), находящихся на одной хромосоме.
2. Структурное строение генов класса II, ответственных за восприимчивость к болезням.
В большинстве случаев болезни зависят не только от генотипа и поэтому недоступны анализу на сцепление. С другой стороны, поскольку многие механизмы, не вовлекаемые в неравновесное сцепление, предполагают тесную связь между антигенами, сама по себе ассоциация с HLA указывает на то, что в ней имеются генетические факторы, принимающие участие в возникновении и процессе развития заболевания (Lamm L., Petersen G., 1979).
Поэтому следует отметить три группы биологических процессов, лежащих в основе генетических и структурных ассоциаций между МНС и болезнями: с иммунологической реактивностью, с разными типами межклеточных взаимодействий и некоторыми антигенами плода, определяющими, по-видимому, морфогенез.
N. Sinclair и C. Stiller (1988) указывают на несколько категорий связей между комплексом HLA и заболеваниями. Первая из них представляет собой ряд связей либо с HLA-A, -В, -С, либо с локусами HLA-D. В этом случае у больных, подверженных заболеваниям, определенный HLA антиген представлен с большей частотой. Такого типа связи представляют собой очевидно доминантный признак, но с переменной степенью пенентрантности. Полная пе-нентрантность не обнаруживается никогда; присутствие определенного HLA-антигена не связано с обязательным наличием заболевания. Наличие опреде-