Влияние хорионического гонадотропина на антигеннезависимую дифференцировку Т-лимфоцитов и функциональную активность нейтрофилов человека

• Автор: Куклина, Елена Михайловна
• Шифр специальности: 14.00.36
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1999
• Место защиты: Пермь
• Количество страниц: 145 с.

ОГЛАВЛЕНИЕ
Список основных сокращений
ВВЕДЕНИЕ
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
Глава 1. ГОРМОНЫ РЕПРОДУКЦИИ В РЕГУЛЯЦИИ ИММУННЫХ ПРОЦЕССОВ
1.1. Характеристика иммунной системы в период беременности
1.2. Гормоны и белки беременности как регуляторы иммунных реакций
1.3. Роль хорионического гонадотропина в регуляции иммунитета
РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Глава 3. РОЛЬ ХГ В АНТИГЕННЕЗАВИСИМОЙ ДИФФЕРЕНЦИ-РОВКЕ Т-ЛИМФОЦИТОВ И ИХ АКТИВАЦИЙ ДНА РАЗНЫХ СТАДИЯХ СОЗРЕВАНИЯ
3.1. ХГ как регулятор дифференцировки и пролиферации тимоцитов
3.2. Влияние ХГ на пролиферативную активность МПК
3.3. ХГ-зависимая модуляция уровня сАМФ в Т-лимфоцитах перифе-
рической крови
Глава 4. ХГ КАК РЕГУЛЯТОР ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ НЕЙТРОФИЛОВ
4.1. Влияние ХГ на основные функции нейтрофилов
4.2. Влияние женских половых стероидов на чувствительность нейт-
рофилов к действию ХГ
4.3. Роль циклооксигеназы нейтрофилов в реализации гормональных
эффектов
4.4. ХГ-зависимая регуляция пролиферативной активности МПК
в присутствии аутологичных нейтрофилов. Роль циклооксигеназы
4.5. Влияние ХГ на уровень цАМФ в нейтрофилах человека
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
Список основных сокращений
цАМФ - циклический аденозинмонофосфат
АОК - антителообразующие клетки
АФП - альфа-фетопротеин
АЦ - аденилатциклаза
АЭТ - аминоэтилизотиурониум бромид
ГЗТ - гиперчувствительность замедленного типа
ГМ-КСФ - гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор цГМФ - циклический гуанозинмонофосфат ГнРГ - гонадотропин-рилизинг гормон ДН-тимоциты - дубль-негативные тимоциты (CD4 CD8 )
ДП-тимоциты - дубль-позитивные тимоциты (CD4+CD8+)
ЕК - естественные киллеры ИФЗ - инозитол 1,4,5-трифосфат ИФНу - интерферон гамма ЛГ - лютеинизирующий гормон
ЛГ7ХГ-Р - рецептор для лютеинизирующего гормона и хорионического хонадотропина
ЛЗХЛ - люминол-зависимая хемилюминесценция
МкАТ - моноклональные антитела
МПК - мононуклеары периферической крови
НАДФ - никотинамидадениндинуклеотидфосфат
НСТ- нитросиний тетразолий
ПГЕ2, nTF2a - простагландины Е2 и 2а
ПИБФ - прогестерон-индуцируемый блокирующий фактор
ПКА - протеинкиназа А
ПКС - протеинкиназа С
ПЛ - пролактин

Клетки осаждали с помощью харвестера “Titertek” на стекловолокнистые фильтры “Titertek”, которые помещали в 10 мл диоксановой сцинтилляционной жидкости ЖС-103 и определяли включение метки на счетчике “Бета-2” (Россия) в имп/мин. В ряде экспериментов пролиферативную активность МПК одновременно оценивали в присутствии аутологичных нейтрофилов (6-106 /мл). В этом случае клетки культивировали в течение 48 часов. Тимидин вносили в культуру за 18 часов до окончания культивирования.
2.4. Изучение функциональной активности нейтрофилов
2.4.1. Определение экспрессии нейтрофилами CD18
Экспрессию антигена CD 18 определяли иммунофлуоресцентным методом методом аналогично фенотипированию тимоцитов с использованием МкАТ ICO 108 ("Медбиоспектр", Россия) и F(abr)2-FITC ("Сорбент", Россия). Число CD18-клеток подсчитывали под масляной иммерсией (объектив х90) в микроскопе МБИ 15-2 (“ЛОМО”, Россия), снабженном люминесцентной приставкой. Количество антиген-позитивных клеток определяли как процент светящихся клеток при просматривании 200 нейтрофилов за вычетом процента флуоресцирующих клеток в препарате отрицательного контроля. В качестве отрицательного контроля использовали препараты, в которых вместо моноклональных антител клетки обрабатывали раствором Хенкса.
2.4.2. Оценка фагоцитарной активности нейтрофилов
В качестве объектов фагоцитоза использовали формалинизированные эритроциты барана [9]. Для этого к 0,1 мл цельной гепаринизированной крови или фракционированных нейтрофилов (5-106/ мл) добавляли 0,1 мл отмытых эритроцитов (1-108/ мл). Пробы инкубировали при 37°С в течение 20 мин. Содержимое пробирок перемешивали и готовили мазок, который фиксировали