Ультраструктурное и иммунногистохимическое исследование скелетной мускулатуры человека в норме и при некоторых видах нервно-мышечной патологии

• Автор: Бубнова, Елена Николаевна
• Шифр специальности: 14.00.23
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2000
• Место защиты: Саранск
• Количество страниц: 130 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

Введение
Глава 1. Обзор литературы
1.1. Развитие скелетной мускулатуры
1.2. Классификация и типы мышечных волокон
1.3. Ультраструктура скелетных мышц человека
1.3.1. Цитоскелет и якорные белки сарколеммы мышечного
волокна
1.4. Нервно-мышечные взаимодействия
1.5. Основные морфологические характеристики нервно-мышечных заболеваний
1.6. Классификация нервно-мышечных заболеваний
Глава 2. Материалы и методы исследования
Глава 3. Результаты собственных исследований и их обсуждение
3.1. Получение первичной культуры миобластов человека
3.2. Иммуногистохимические исследования скелетной мышцы человека
3.2.1. Анализ распределения дистрофина в скелетной мышце человека
3.2.2. Экспрессия аденилатциклазы в скелетной мускулатуре
3.3. Ультраструктурное исследование скелетной мышцы
человека
3.4. Обсуждение
Заключение
Выводы
Список литературы

ВВЕДЕНИЕ
Актуальность темы. Одной из наиболее сложных в теоретической и практической невропатологии является проблема наследственных нервно-мышечных заболеваний. Относительно высокая частота этих заболеваний, тяжелая инвалидизация при большинстве из них, поражение в детском или цветущем возрасте делают их весьма актуальными (Гехт Б.М. и Ильина Н.А., 1982; Bethlem J., Knobbout C., 1987; Dubowitz V., 1991; McMillan J., Harper P., 1994).
Нервно-мышечная патология полиморфна по своим проявлениям, в связи с этим возникают трудности в распознавании наследственных форм нервно-мышечных болезней и их дифференциальной диагностики. (Goebel H., Halbig L, 1990; Emery A., 1991; Waclawik A., 1993; Лобзин B.C. и др., 1998; Темин П.А., Никанорова М.Ю., 1998). Большое значение для диагностики наследственных нервно-мышечных заболеваний имеют патоморфологические исследования мышечной ткани. Как правило, различные нервно-мышечные болезни характеризуются индивидуальной патоморфологической картиной, хотя отдельные признаки в различных сочетаниях и с разной степенью выраженности могут проявляться при различных заболеваниях (Rice С. et al., 1988; Bushby K., 1994; Noguchi S. et al., 1995; Anderson L. et al., 1996).
Большое значение в выяснении патогенеза и диагностики болезней имеют ультраструктурные исследования. Описаны характерные изменения ультраструктуры мышечных волокон при ряде нервно-мышечных заболеваний (Engel F., Lambert E., 1977; Watkins S. et al., 1988; Samitt C., Bonilla E., 1990; Tritschler H. et al., 1992; Ozawa E. et al., 1995), вместе с тем многие положения остаются маловыясненными или противоречивыми. В настоящее время в анализе нервно-мышечной

патологии преобладают исследования, направленные на выяснения распределения белков цитоскелета и основных внутриклеточных сигнальных путей (Ткачук В.А. и др., 1976; Ervasti J. et al. 1990; Matsumura K., Campbell K., 1994; Lim L. et al., 1995; Worton R., 1995; Brown R., DPhil J., 1997). Среди многих регуляторных систем мышечного волокна особое значение имеет дистрофии - ассоциирующий белковый комплекс и аденилатциклазная система.
Применение морфологических методов исследований биопсийного материала скелетных мышц у больных с нервно-мышечной патологией позволяет провести дифференциальный диагноз между отдельными формами прогрессирующих мышечных дистрофий и денервационных амиотрофий, а также диагностировать отдельные формы структурных миопатий.
Для установления точного диагноза, выработки методов лечения и профилактики необходимо понять молекулярные механизмы возникновения нервно-мышечных заболеваний. В связи с этим значительный интерес представляет изучение экспрессии некоторых белков и компонентов сигнальных путей в скелетной мышце человека, дефект которых может привести к патологии.
Цель и задачи исследования. Выяснить общие закономерности структурной перестройки скелетной мышцы человека при некоторых видах мышечной патологии.
В задачи исследования входило:
1. Получение и цитохимический анализ первичных культур миобластов человека.
2. Иммуногистохимический анализ распределения белка дистрофина и экспрессии аденилатциклазы в скелетной мышце человека.

ней и наружной мембранами или в пределах крист (Оі Майю Б. й аі., 1993). Наряду с паракристаллическими включениями отмечаются и шаровидные включения. Паракристаллические включения состоят преимущественно из белка, шаровидные, представляют собой агрегаты гранулярного материала, располагающегося в матриксе и состоящего главным образом из триглицеридов. Гликоген распределен равномерно. Липиды большей частью распределены равномерно, но есть субсарколем-мапьные скопления (Вельтищев Ю., Темин П., 1998).
Проблема наследственных нервно-мышечных заболеваний является одной из наиболее сложных в теоретической и практической невропатологии. Мышечная патология отличается очень большим разнообразием, в связи с этим возникают трудности в распознавании наследственных форм нервно-мышечных болезней и их дифференциальной диагностики. Поэтому большое значение для диагностики мышечной патологии имеет патоморфологические исследования биопсийного материала скелетной мышцы человека.