Пластичность нигростриатной дофаминергической системы при моделировании паркинсонизма у мышей

• Автор: Козина, Елена Александровна
• Шифр специальности: 03.03.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 143 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1Л. Общие характеристики дофаминергических нейронов
1.1.1. Общие представления о дофамине
1.1.2. Ферменты синтеза дофамина
1.1.3. Ферменты деградации дофамина
1.1.4. Высвобождение и обратный захват дофамина
1.1.5. Рецепторы к дофамину
1.1.6. Топография групп дофаминергических нейронов в мозге
1.2. Дофаминергическая нигростриатная система взрослых млекопитающих
в норме и патологии
1.2.1. Морфологические и функциональные характеристики
дофаминергических нейронов черной субстанции
1.2.2. Нервная и гуморальная регуляция дофаминергических нейронов
нигростриатной системы
1.2.3. Афферентная дофаминергическая иннервация стриатума
1.2.4. Нейроны-мишени для дофамина в стриатуме
1.2.5. Роль дофаминергической нигростриатной системы в регуляции
моторного поведения
1.2.6. Функциональная недостаточность дофаминергической
нигростриатной системы при болезни Паркинсона
1.2.6.1. Этиология и патогенез Болезни Паркинсона
1.2.6.2. Компенсаторные механизмы при болезни Паркинсона
1.2.6.3. Возможная роль нейротоксинов в развитии болезни Паркинсона
1.3. Создание экспериментальных моделей болезни Паркинсона на животных
1.3.1. Фармакологические модели
1.3.1.1. Резерпин вызванная модель
1.3.1.2. а-метш-пара-тирозин вызванная модель
1.3.2. Генетические модели
1.3.3. Нейротоксические модели
1.3.3.1. 6-гидроксидофамин-вызванная модель
1.3.3.2. Ротенон-вызванная модель
1.3.3.3. Паракват-вызванная модель
1.3.3.4. 1-метил-4-фенил-1,2,3,6-тетрагидропиридин-вызван1шя модель
1.3.3.4.1. МФТП-МОДЕЛИ НА МЫШАХ
1.3.3.4.2. МФТП-МОДЕЛИ НА ПРИМАТАХ
2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2Л. Животные, схемы введения МФТП
2.2. Оценка двигательной активности животных при хроническом моделировании болезни Паркинсона
2.3. Взятие материала
2.4. Высокоэффективная жидкостная хроматография при хроническом моделировании болезни Паркинсона
2.4.1. Определение содержания моноаминов и метаболитов
2.4.2. Определение содержания МФП+
2.5. Стереотаксическое введение нейронального трейсера в стриатум при остром моделировании болезни Паркинсона
2.6. Иммуноцитохимия
2.6.1. Моноиммуномечение тирозингидроксилазы при хроническом
моделировании болезни Паркинсона
2.6.2. Двойное иммуномечение тирозингидроксилазы и декарбоксилазы ароматических аминокислот при хроническом моделировании болезни Паркинсона
2.6.3. Моноиммуномечение тирозингидроксилазы и двойное иммуномечение тирозингидроксилазы и декарбоксилазы ароматических аминокислот при остром моделировании болезни Паркинсона
2.7. Микроскопия и анализ изображений
2.7.1. Световая микроскопия и количественная оценка дофаминергических
нейронов черной субстанции при хроническом моделировании болезни Паркинсона
2.7.2. Конфокальная микроскопия и количественная оценка
дофаминергических терминалей стриатума при хроническом моделировании болезни Паркинсона
2.7.3. Флуоресцентная микроскопия и анализ нейронов, содержащих трейсер
и экспрессирующих ферменты синтеза дофамина при остром моделировании
болезни Паркинсона
2.7.4. Полуколичественный анализ тирозингидроксилазы в нейронах черной
субстанции и терминалях стриатума при хроническом моделировании болезни Паркинсона
2.8. Полимеразная цепная реакция в реальном времени при остром и хроническом моделировании болезни Паркинсона
2.9. Определение активности тирозингидроксилазы при хроническом моделировании болезни Паркинсона
2.10. Определение скорости захвата 3Н-дофамина в срезах мозга ex vivo при хроническом моделировании болезни Паркинсона
2.11. Статистика
3. РЕЗУЛЬТАТЫ
3.1. Характеристика дофаминергических нейронов нигростриатной системы при остром моделировании досимптомной и симптомной стадий болезни Паркинсона у мышей
3.1.1. Содержание мРНК тирозингидроксилазы в черной субстанции и
стриатуме
3.1.2. Содержание мРНК Д2-рецепторов в стриатуме
3.1.3. Моноферментные тирозингидроксилаза- и декарбоксилаза-
иммунореактивные нейроны в мозге до и после введения МФТП
3.2. Моделирование хронической досимптомной стадии болезни Паркинсона на мышах
3.2.1. Двигательная активность животных
3.2.2. Содержание катехоламинов в черной субстанции и стриатуме
3.2.3. Количественный анализ дофаминергических нейронов в компактной
части черной субстанции
3.2.4. Количественный анализ аксональных терминалей стриатума
3.3. Компенсаторные процессы при хроническом моделировании досимптомной стадии болезни Паркинсона на мышах

подгруппа лиц с юношеским (ювенильным) паркинсонизмом, у которых первичный паркинсонизм проявляется в первые два десятилетия жизни. Подавляющая часть случаев ювенильного паркинсонизма связана с рецессивными мутациями генов паркина, DJ-1 и PINK1, продукты которых контролируют процессинг нейрональных белков и особенности окислительного метаболизма нигростриатных нейронов. Эти случаи обозначаются как аутосомно-рецессивный ювенильный паркинсонизм (Черникова и Иоффе, 2010).
При БП происходит разрушение ДА-ергических нейронов и волокон, что приводит к изменениям активности стриатных нейронов как в прямом, так и непрямом путях. В прямом пути дефицит ДА приводит к снижению ингибиторной активности ГАМК-ергических стриопаллидарных волокон, а в непрямом идет увеличение ингибиторной активности стриопаллидарных волокон (рис. 9) (Walter and Vitek, 2004).
Норма
Болезнь Паркинсона
БШв/ЧСр j
активация торможение
Рис. 9. Схематическое изображение прямого и непрямого путей, соединяющих базальные ганглии, таламус и моторную кору в норме и при болезни Паркинсона (Walter and Vitek, 2004).
БШн — наружная часть бледного шара, БШвн — внутренняя часть бледного шара, СТЯ — субталамичское ядро, ЧСк - компактная часть черной субстанции, ЧСр -ретикулярная часть черной субстанции, D1 —Д1 рецепторы к дофамину, D2 — Д2 рецепторы к дофамину.
Уменьшение ингибиторного влияния БШн на СТЯ приводит к усилению возбуждения СТЯ, БШвн и ЧСр, что приводит к увеличению торможения таламуса и снижению