Функциональные свойства культивируемых клеток сердца крыс: зрелых кардиомиоцитов, стволовых клеток и клеток-предшественников

• Автор: Голованова, Татьяна Александровна
• Шифр специальности: 03.03.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 141 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
СОКРАЩЕНИЯ
ВВЕДЕНИЕ
I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Структурно-функциональная организация сердечной мышцы
1.1.1. Структура сердечной мышцы
1.1.2. Роль Са2+ в мышечном сокращении и Са2+ как внутриклеточный регулятор
1.1.3. Патогенные и адаптивные изменения в сердце при ишемии/реперфузии
1.2. История открытия, терминология и современные представления о стволовых клетках
1.3. Сравнительные аспекты регенерации миокарда
1.3.1. Регенеративная способность сердца Zebrafish
1.3.2. Регенеративная способность сердца амфибий
1.3.3. Регенеративная способность сердца млекопитающих
1.4. Стволовые клетки миокарда млекопитающих
И. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. Выделение и культивирование клеток миокарда крыс
2.2. Определение [Са2+]; в культивируемых клетках миокарда крыс
2.3. Иммуноцитохимическое выявление стволовых клеток и клеток-предшественников в культуре
2.4. Моделирование окислительного стресса in vitro и оценка активности антиоксидантных препаратов
2.5. Получение апоптозных тел в первичной культуре клеток миокарда крыс
III. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Морфофункциональные характеристики культивируемых кардиомиоцитов новорожденных крыс
3.2. Выявление и характеристика клеток неонатального миокарда, способных к пролиферации и дифференцировке
3.2.1. Колонии сокращающихся кардиомиоцитов в первичной культуре
3.2.2. Идентификация клеток, формирующих колонии сокращающихся кардиомиоцитов in vitro
3.3. Способность стволовых клеток и кардиопредшественников сердца взрослых крыс к пролиферации и дифференцировке in vitro
3.4. Оценка функциональной активности свежевыделенных клеток миокарда новорожденных крыс
3.5. Применение разработанных клеточных моделей миокарда новорожденных крыс
3.5.1. Неонатальные кардиомиоциты как тест-система для скрининга антиоксидантных препаратов
3.5.2. Изучение влияния продуктов апопгоза на клетки-предшесгвенники кардиомиоцитов
ОБСУЖДЕНИЕ
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
СОКРАЩЕНИЯ
[Са2+]і Внутриклеточная концентрация свободных ионов кальция
CICR Кальций зависимый выброс кальция из саркоплазматического
ретикулума
4-ХмК 4-хлор-м-крезол
SP Side population cells
АКР Активные кислородные радикалы
АцХ Ацетилхолин
ДГПР Дигидропиридиновые рецепторы
изп Изопротеренол
Кф Кофеин
Кх Колхицин
МСАО (Д+Ф) Макромолекулярная система с антиоксидантними свойствами
МИ ПК РиР СК СР ЭМС

на основе декстрана (Д) и феноксана (Ф) Митотический индекс Предшественники кардиомиоцитов Рианодиновые рецепторы Стволовые клетки Саркоплазматический ретикулум Электромеханическое сопряжение
Последовательность событий, которые происходят после ампутации верхушки желудочка, была впервые описана в работе Оберприллер с соавт. [ОЬегргШег й а1., 1974]. После ампутации сгусток крови быстро затягивает повреждение, через неделю он растворяется, и к 10-му дню в крайней зоне сгустка накапливаются лимфоциты. В это время в области, прилегающей к повреждению, происходят первые митотические события. Через две недели после ампутации в кровяном сгустке наблюдается активность макрофагов, и тонкий слой эпикардиальных клеток затягивает внутреннюю поверхность сгустка, а некроз в прилегающей трабекуле исчезает. На третьей неделе в области раны появляются волокна соединительной ткани, и в трабекуле увеличивается митоз. Одновременно в трабекулярных структурах вблизи раны появляются первые миофибриллы. После четвертой недели, зона повреждения уже в основном состоит из соединительной ткани. Последняя распространяется в рану, содержащую только рассредоточенные миоциты. Миофибриллы этих миоцитов меньше миофибрилл миоцитов здоровых животных. Таким образом, сделан вывод, что у тритона полного восстановления сердца не происходит, а образуется полуфункциональная ткань, содержащая смесь сократительной и соединительной ткани [ОЬегргШег й а1., 1974].
В другой серии экспериментов, также посвященной изучению регенеративной способности сердца тритона, авторы использовали такой способ повреждения миокарда, который позволяет поддерживать внешнюю морфологию желудочка. Большая часть внутренней массы желудочка была дезорганизована путем механического разрушения вентрикулярного миокарда. Они показали, что сердце тритона способно эффективно регенерировать в течение 10-12 недель после повреждения. При этом наблюдалась полная функциональная реорганизация трабекулярной структуры миокарда без существенных остатков соединительной или рубцовой ткани. Авторы пришли к выводу, что сердце тритона в состоянии полностью восстанавливаться в