Влияние синтетического регуляторного пептида селанк на экспрессию генов в мозге и селезёнке

• Автор: Коломин, Тимур Александрович
• Шифр специальности: 03.01.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 160 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
Список сокращений
ВВЕДЕНИЕ
Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Природные регуляторные пептиды
1.1.1. Общая характеристика
1 Л.2. Классификация регуляторных пептидов
1 Л.2Л. Нейропептиды
1Л.2.2. Пептиды желудочно-кишечного тракта
1Л.2.3. Регуляторные пептиды иммунной системы
1Л.2.4. Атриопептиды
1.2. Тафтцин
1.2.1. Общая характеристика тафтцина
1.2.2. Действие тафтцина на иммунную систему
1.2.3. Действие тафтцина на ЦНС
1.2.4. Противоопухолевое действие тафтцина
1.3. Синтетический регуляторный селективный анксиолитик селанк
1.3.1. Синтетические регуляторные пептиды
1.3.2. Структура селанка
1.3.3. Анксиолитическое действие селанка
1.3.4. Действие селанка на ЦНС
1.3.5. Действие селанка на иммунную систему
1.3.6. Другие свойства селанка
1.4. Подходы к изучению механизма действия регуляторных пептидов
1.4.1. Физиологические методы
1.4.1.1. Классификация экспериментальных моделей
1.4.1.2. Физиологические методы оценки влияния

регуляторных пептидов на поведение животных
1.4.2. Биохимические методы
1.4.2.1. Изучение биодеградации регуляторных пептидов
1.4.2.2. Поиск взаимодействий регуляторных пептидов с рецепторами
1.4.3. Молекулярно-биологические методы
1.4.3.1. Анализ экспрессии генов на уровне мРНК
1.4.3.2. Анализ экспрессии генов на уровне белка
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. Приготовление и хранение препаратов селанка
2.2. Анализ влияния однократного и курсового введения селанка на экспрессию генов в мозге и селезёнке крысы
2.2.1. Характеристика экспериментальных групп животных
2.2.2. Выделение тотальной РЕПС из тканей мозга и селезёнки крысы
2.2.3. Оценка уровня экспрессии мРНК генов в гиппокампе крысы с использованием кДНК-микрочипов
2.2.4. Оценка уровня экспрессии мРНК генов АсШ1, СхЗсг1, Ptprnl, 81с6а20 в гиппокампе, лобной коре, мозжечке и селезёнке крысы
2.2.5. Статистическая оценка результатов
2.3. Анализ влияния селанка и его фрагментов на экспрессию генов, вовлеченных в процессы воспаления, в селезёнке мыши
2.3.1. Характеристика экспериментальных групп животных
2.3.2. Выделение тотальной РЕПС из тканей селезёнки мыши
2.3.3. Оценка уровня экспрессии мРЕПС генов, вовлеченных в процессы воспаления, в селезёнке мыши под действием селанка I
и его фрагментов с использованием ЕЕЦР-чипов
2.3.4. Статистическая оценка результатов
2.4. Временная динамика экспрессии мРНК гена Вс1б, генов-мишеней и генов-корепрессоров белка ВСЬб в селезёнке мыши под действием селанка и его фрагментов
2.4.1. Характеристика экспериментальных групп животных
2.4.2. Выделение тотальной РНК из тканей селезёнки мыши
2.4.3. Оценка уровня экспрессии мРНК гена В с 16, генов-мишеней и генов-корепрессоров белка ВСЬб в селезёнке мыши под действием селанка и его фрагментов
2.4.4. Статистическая оценка результатов
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.1. Анализ влияния однократного и курсового введения селанка на изменение транскриптома клеток мозга и селезёнки крысы
3.1.1. Анализ влияния однократного и курсового введения селанка на изменение транскриптома клеток гиппокампа крысы
с использованием кДНК-микрочипов
3.1.2. Анализ влияния однократного и курсового введения селанка на изменение экспрессии генов АсШ1, СхЗсг!, Д§/7,
1Врт2 и 81с6а20 в гиппокампе, лобной коре и мозжечке крысы
3.1.3. Анализ влияния однократного и курсового введения селанка на изменение экспрессии генов А&п1, СхЗсг 1, Рр7,
Р1ргп2 и 51сба20 в селезёнке крысы
3.2. Анализ влияния селанка и его фрагментов (тафтцина, АщРСР и вР) на экспрессию генов, вовлеченных в процессы воспаления, в селезёнке мыши через 6 и 24 часа после введения
3.3. Временная динамика экспрессии гена Вс16, генов-мишеней и генов-корепрессоров белка ВСЕ6 в селезёнке мыши под действием селанка и его фрагментов
3.3.1. Временная динамика экспрессии гена Вс16 под действием селанка и его фрагментов

Специфические рецепторы для тафтцина обнаружены исключительно на клетках, обладающих Fc-рецепторами к IgG - моноцитах/макрофагах, нейтрофилах и NK-клетках. После взаимодействия тафтцина с рецептором, состоящим из двух субъединиц, комплекс интернализируется макрофагом (Bump и др., 1986). В естественных условиях тафтцин может быть доставлен в составе комплекса «антиген - антитело» к клеткам, которые обладают специфическими рецепторами к нему. Имеются данные, позволяющие считать, что тафтцин попадает с объектом фагоцитоза в конечном итоге в фаголизосомы. Таким образом, основным результатом присоединения тафтцина к его рецептору является стимуляция функциональной активности макрофагов и нейтрофилов, заканчивающаяся завершенным фагоцитозом в лимфоидных образованиях и очагах воспаления (Chaudhuri и др., 1983).
1.2.2. Действие тафтцина на иммунную систему
Основная биологическая активность тафтцина направлена на стимулирование всех известных функций клеточных линий полиморфноядерных лейкоцитов и макрофагов. Он активирует фагоцитоз, пиноцитоз, способствует клеточной подвижности и хемотаксису, увеличивает «респираторный взрыв» фагоцитирующих клеток, стимулируя таким образом их бактерицидную активность, а также влияет на формирование антител. Тафтцин стимулирует образование макрофагами супероксидных радикалов (СОР) и нитроксидных радикалов (НОР), что приводит к усилению их переваривающей способности (Siemion и др. 1981; Nishioka и др., 1984; Cillari и др., 1994).
В экспериментах in vivo показано, что тафтцин индуцирует сильную
антибактериальную активность без видимой токсичности. Он увеличивает
цитотоксическое действие Т-лимфоцитов, стимулирует синтез антител
(Wleklik и др., 1987; Morrow и др., 1991). Тафтцин обладает
иммуномодуляторным эффектом и способен вызывать широкий спектр