Участие лигнина и конденсированных дубильных веществ в защитной реакции хвойных на патогенные грибы

• Автор: Полякова, Галина Геннадьевна
• Шифр специальности: 03.00.16
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1999
• Место защиты: Красноярск
• Количество страниц: 123 с.

Оглавление
Введение
Глава!. Участие лигнина и проантоцианидинов в защитной
реакции растений на патогенные грибы
1.1. Защитная реакция растений на патогены
! .2. Метаболизм фенольных соединений при взаимодействия растения-хозяина и паразита
1.3. Характеристика лигнина и проантоцианидинов
1.3.1. Проантоцианидины, - строение и функции
1.3.2. Лигнин, - строение и функции
1.4. Защитная реакция хвойных на грибы, ассоциированные
с насекомыми-ксилофагами
Г л а в а 2. Объект и методы исследования
2.1. Характеристика объекта исследования в опытах
in vivo (на деревьях) и in vitro (на культуре ткани)
2.2. Инокуляция деревьев и воздействие на каллусные культуры
2.3. Отбор образцов для анализа
2.4. Приготовление мицелиальных препаратов
2.5. Анализ растительного материала
Г л а в а 3. Участие лигнина и проантоцианидинов в защитной
реакции флоэмы ствола пихты на грибы, различающиеся
по скорости распространения в тканях растения
Г л а в а 4. Участие лигнина и проантоцианидинов в защитной реакции флоэмы ствола пихты на инокуляцию гриба Verticillium sp. в разные фенофазы летнего периода
Г л а в a 5, Участие лигнина и проантоцианидинов в защитной реакции флоэмы ствола пихты на патогенные грибы у деревьев, устойчивых и неустойчивых к черному
пихтовому усачу
Г л а в а 6. Снижение активности физиологических механизмов
противоинфекционной защиты ели при подтоплении
Г л а в а 7. Индуцирование защитной реакции хвойных
элиситорами патогенных грибов в опытах in vitro и
in vivo
Заключение
Выводы
Литература

Введение
Оценка устойчивости и чувствительности хвойных к болезням и вредителям важна для прогнозирования вспышек численности насекомых и эпифитотий грибных болезней. Диагностика возможного развития очагов ксилофагов в хвойных лесах разработана слабо и основана, как правило, на определении активности смоловыделения (Положенцев, 1965). Этот показатель, названный П.А. Положенцевым, “живичным индикатором”, хорошо работает только на сосне и ели, имеющих регулярное расположение смоляных ходов. Для пихты и лиственницы характерно другое строение смолоносной системы, поэтому использование живичного индикатора невозможно. Это вызвало необходимость разработки иных методов биодиагностики, в частности, исследование реакции деревьев на патогенные грибы, ассоциированные с насекомыми-ксилофагами.
В течение последних десятилетий проводятся активные исследования индуцированных защитных реакций хвойных в ответ на инокулирование патогенов с целью изучения механизмов их устойчивости (Reid et а!., (967, Wong, Berryman, 1977, Hain (983, Cook, Hain, 1987, DeMars et ah, 1988, Paine et al., 1997). В качестве грибов, индуцирующих защитную реакцию флоэмы хвойных, используют фитопатогенные ассоцианты стволовых вредителей, причем значительная часть работ в данной области выполнена с применением возбудителей синевы древесины из семейства Ophiostomataceae Nannf. Признаком патогенности этих грибов является возникновение обширных некрозов флоэмы после инокуляции гриба в проводящие ткани хвойных. Исследования показали, что грибы Verticillium sp. и Leptographium sp., переносимые черным пихтовым усачом Monochamus urussovi Fisch., будучи занесены во флоэму ствола

2.3. Отбор образцов для анализа
Образцы флоэмы дата химического анализа отбирали в день инокуляции (контроль), через 7 и 1 4 суток после инфицирования ствола пихты и лиственницы и через 6 и 12 суток после инфицирования ели. При этом наружную часть коры вокруг отверстий удаляли и вырезали луб из сформировавшейся реактивной зоны. Для определения динамики накопления полифенолов с 7-10 деревьев отбирали прямоугольные образцы флоэмы размером 2 на 4 см таким образом, чтобы отверстие располагалось в центре образца. На 3 деревьях пихты исследовали локализацию фенольных соединений относительно места инфицирования. При этом реактивную зону делили на три части: некротическую, примыкающую к ней переходную (шириной 5 мм) и околораневую зону (шириной 10 мм).
Образцы флоэмы фиксировали и хранили до начала анализа в 96%-ном этаноле.
Каллуеные культуры фиксировали через 48 часов после действия мицелия, либо мицелиальных препаратов.
2.4. Приготовление мицелиальных препаратов.
Мицелиальные экстракты готовили по методике Л.В.Метлицкого
(Метлицкий и др., 1976). Мицелий выращивали в течение 5 суток на жидком сусле (4Б) в колбах на качалке АВУ-6Ц со скоростью 120 об/мин. Отмытый от среды мицелий (3 г) гомогенизировали в жидком азоте с кварцевым песком с дополнительным разрушением клеточных стенок гиф ультразвуком в течение 10 минут в установке УЗДН-1 (15 килоциклов в сек). Качество дезинтеграции проверяли микро-скопированием и посевом гомогената на питательную среду. Гомогенат мицелия экстрагировали 70% этанолом на водяной кипящей бане в