Изучение тканеспецифичности генной экспрессии структурных белков мышечной ткани человека

• Автор: Ковалева, Марина Анатольевна
• Шифр специальности: 03.00.15
• Научная степень: Кандидатская
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 178 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1.ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. ИЗУЧЕНИИЕ ИНФОРМАЦИОННОГО СОДЕРЖАНИЯ ГЕНОМА ЧЕЛОВЕКА С; ПОМОЩЬЮ АНАЛИЗА ПРОДУКТОВ ГЕННОЙ ЭКСПРЕССИИ НА ПРИМЕРЕ МЫШЕЧНЫХ ТКАНЕЙ ЧЕЛОВЕКА
1.1. Системный подход к изучению БПГЭ в биохимической генетике ßf;
1.2. Исследования БПГЭ в миокарде, скелетных и гладких тканях человека
1.3. Некоторые структурные белки мышечной ткани
1.4. Биохимическая и молекулярная генетика бокового амиотрофического склероза
1.5. Молекулярные иродедования БПГЭ при некоторых прогрессирующих; мышечных дистрофиях
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. Реактивы и биологические материалы
2.1.1. Реактивы ррй
2.1.2. Биологические материалы
2.2. Подготовка образцов для проведения двумерного электрофореза. &. ч>
2.3. Фракционирование белков двумерным электрофорезом

2. 4. Иммуноблоттинг
2.5. Денситометрия одномерных и двумерных электрофоре-грамм. Компьютерный анализ результатов и статистическая обработка ..данных
2. 6. Микросеквенирование белков
2.6.1. Подготовка белка к микросеквенированию и хроматографическое разделение пептидов
2. 6.2. М-концевое микросеквенирование
2.7. Определение концентрации белка
2. 8. Фотографирование и сушка гелей
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Исследование специфичности экспрессии некоторых структурных белков мышечной ткани человека
3.1.1. Идентификациядгредсердноспецифичного белка
3.1.2. Выявление редкого варианта белка легкой цепи миозина 1 человека
3.2. Построение двумерной электрофоретической карты и каталога белков поперечнополосатой скелетной мышцы человека
3.3. Построение двумерной карты белков гладкой мышцы человека
3.4. Идентификация белков на двумерной карте поперечнополосатой и гладкой мускулатуры
3.5. Изучение генетических изменений в белках поперечнополосатой мышечной ткани человека
3.5.1. Исследование-.генетического полиморфизма в ткани
лове

сердца человека
3.5.2. Исследование генетического полиморфизма в ткани
скелетной мышцы человека
3.6. Изучение изменений спектра белкового состава мышечной ткани человека при различных наследственных нервно-мышечных заболеваниях
3.6.1. Изучение белкового состава скелетной мышцы человека при боковом амиотрофическом склерозе
3.6.2. Изучение белкового состава скелетной мышцы человека при некоторых формах прогрессирующих мышечных дистрофий
3.6.3. Анализ изменений белкового состава при патологии гладкой мышцы
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ЛИТЕРАТУРА
ПРИЛОЖЕНИЕ

TM, что позволяет подтверждать соответствующую гистохимическую недостаточность и проводить дифференциальный диагноз [Giometti
C., Danon М., 1990; Barany K. et al., 1995; Danon М. et al
1997].
Отдельные работы были посвящены специфическому вопросу - изучению изменений белков ткани скелетной мышцы при ее трансформации в сердечную, что рассматривается как серьезная альтернатива пересадке сердца (аллопластика)[. Пересадка аутологичной скелетной
мышцы пациентов с сердечно-сосудистыми заболеваниями позволяет решить вопросы гистосовместимости тканей.
На первоначальном этапе рассматривались, на модельных животных, вопросы трансформации, под воздействием электрической стимуляции изоформ белков в тканеспецифичные изоформы [0'Brian G. et al., 1988,1992]. Как показано, при таких пересадках скелетная
мышца после экстрааортальной пластики трансформируется в сердечную. В течении 4 мес происходит увеличение не менее чем в 4 раза количества медленных изоформ ЛЦМ, как на белковом уровне, так и на уровне мРНК, что также было подтвержденно и иммуноцитохимичес-ким исследованием, и 2ДЭФ служит удобным методом биохимического контроля изменения фенотипа:мышцы.
Для другого типа мышечной ткани - гладкой мышцы человека, с использованием 2ДЭФ проводилось изучение распределения актина, виментина, десмина и ТМ в /средней оболочке аорты, коронарных артерий и плечевой артерии как в норме, так и при фиброзном атероматозе [Kocher 0., Gallianl G., 1986]. Было показано, что коли-
чество десмин-содержащих кдещок составляло в аорте 4%, в коронарных артериях 11% и 37% в .плечевой артерии. При фиброзном атероматозе десмин-содержащие клетки отсутствовали. Содержание белка