Сравнительная характеристика лакказ высших базидиальных грибов и возможность их практического применения

• Автор: Степанова, Елена Владимировна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1999
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 172 с. : ил.

Оглавление

Введение
Обзор литературы
1.1 Лакказа- распространение в природе и физиологические функции
1.2 Некоторые физико - химические характеристики и субстратная специфичность лакказ
1.3 Окислительно востановительные свойства и структура активного центра
1.4 Механизм катализа лакказы
1.5 Практическое применеие лакказ 41 Материалыи и методы
1.1 Материалы
1.2 Методы 50 Результаты исследования и их обсуждение
1. Культивирование базидиомицетов СогЫия МгзШш и Сопо1т 1опаШ
1.1. Изучение поверхностного и глубинного культивирования базидиомицетов Сопо1т ктШш и СогЫш гопаШя в колбах

1.2. Оптимизация условий культивирования базидиомицета Сопо1ш МгзиШ в ферментере
1.3 Влияние индукторов на биосинтез лакказ
2. Получение лакказы из базидиальных грибов Сопо1ш ЫгтШз и Сопо1ш 1опМш. Определение их некоторых физико - химических характеристик.
2.1. Выделение и очистка лакказы из базидиомицета Сопо1ш
ктШт
2.2 Некоторые физико - химические свойства базидиомицетов СогЫш НтШш и СогЫш 10пШш
2.3 Субстратная специфичность лакказ
3. Стабильность ферментных препаратов.
3.1 pH и термостабильность лакказ
3.2. Стабилизация ферментных препаратов путем лиофилизации
4. Изучение доменной структуры лакказы методом дифферинциальной сканирующей микрокалориметрии
4.1. Сравнительная характеристика методов удаления Си (II) из активного центра лакказ грибного происхождения.

4.2. Исследование лакказ Coriolus hirsutus u Coriolus zonatus методом дифферинциальной сканирующей калориметрии

5. Использование лакказы как фермент - маркер в иммуноферментном анализе
Выводы
Список литературы

скорость-лимитирующей стадией этой реакции, что, очевидно, связано со значительным энергетическим барьером Франка-Кондона, необходимым для расщепления связи О-О.
Механизм восстановления окисленной лакказы очень сложен. Было предпринято множество попыток для его установления (28,29,86). Как было указано ранее, скорость окисления субстрата зависит в значительной степени от его окислительно-восстановительного потенциала. Очевидно, что стадия переноса электрона на медь первого типа является скорость-лимитирующей для всего каталитического цикла. Изучение стационарной кинетики (90) показало, что при pH 7,5 и 25°С константы скорости второго порядка составляют 1.17x103 М-1 с-1 и 259 М'1 с-1 для гидрохинона и аскорбата,
соответственно. В этих исследованиях максимальная скорость оборота для субстратов составляла 560 с-1, означая, что скорость переноса электрона от меди первого типа на трехъядерный медный кластер должна значительно превышать эту цифру. При кинетическом изучении отдельных переходных стадий восстановления “отдыхающего, полностью восстановленного” (“resting fully reduced”) фермента, Рейнхаммер с соавт. показали, что эта кинетика носит сложный многостадийный характер (65,