Поглощение и резервирование фосфата некоторыми ахеями и бактериями

• Автор: Смирнов, Алексей Вячеславович
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2003
• Место защиты: Пущино
• Количество страниц: 143 с. : ил.

Список принятых сокращений
Часть 1. Обзор литературы
Глава 1. Роль микроорганизмов в круговороте фосфора
Глава 2. Поглощение фосфата микроорганизмами
Глава 3. Формы и способы резервирования Фосфата у микроорганизмов
3.1. ПолиР - основной резерв фосфата в клетках микроорганизмов
3.2. ГР, в качестве фосфорного резерва
3.3. Полимерные ортофосфаты металлов (П())
3.4. Минерализаиия цианобактерии необычный способ резервирования фосфата
3.5. Накопление ортофосфата
3.6. Резервирование фосфата в виде органических соединений
Часть 2. Материалы и методы исследования
1. Объекты исследования
2. Состав сред культивирования
3. Подготовка биомассы для анализов
4. Разрушение биомассы
5. Экстракция фосфорсодержащих фракций из биомассы
6. Экстракция полимерного ортофосфата Мс 2+ (ПОи„)
7. Осаждение полифосфатов
8. Хроматография полифосфатов на бумаге
9. Электрофорез полифосфатов в ПААГ
10. Очистка полифосфитов от примесей ортофосфата и пирофосфата
11. Определение ФосФогидролазных активностей
12. Ультратонкие срезы
13. Аналитические методы
13.1. Определение общего фосфора
13.2 Определение ортофосфата
13.3. Определение пиоофосфата
13.4. Определение элементного состава водонерастворимых осадков
13.5. Определение бечка
13.6. Определение ДНК

Часть 3. Результаты исследования и их обсуждение
3.1. Поглощение фосфата клетками галофильных аухей На/оЬаНепит
salinarium и Haloruhrum distributum и галотолерантной эубактерии Brevibacterium antiquum
3.1.1. Поглощение фосфата галофильными археями Halobacterium salinarium
и Haloruhrum distributum
3.1.2. Влияние кониентраиии Р, на рост галофильных архей Halobacterium salinarium и Halorubrum distributum
3.1.3. Поглощение P, галотолеуаптной эубактерией Brevibacterium antiquum
3.1.4. Влияние кониентраиии Р, на рост галотолерантной эубактерии Brevibacterium antiquum в среде с нормальной и
повышенной соленостью
3.2. Влияние некоторых эффекторов на процесс поглощения Р, галофильными археями Halobacterium salinarium и Halorubrum distributum и галотолерантной эубактерией Brex’ibacterium antiquum
3.2.1. Влияние протонофора карбонилиианид
п - (трифторметокси) фенилгидразон (ФКФ)
3.2.2. Влияние Ms2* и ЭЛТА на поглощение Р, галотолерантной
эубактерией Brevibacterium antiquum
3.3. Содержания некоторых Фосфорных соединений в биомассе галофильных архей Halobacterium salinarium и Halorubrum distributum
и галотолерантной эубактерии Brevibacterium antiquum
3.4. Получение водонерастворимого осадка фосфата из биомассы и его
анализ
3.5. Изменение морфологии клеток галофильных архей Halobacterium salinarium и Halorubrum distributum и галотолерантной эубактерии Brevibacterium antiquum в проиессе накопления Р
3.6. Использование Фосфата магния в качестве фосфатного резерва изучаемыми микроорганизмами при росте на РгдеФииитной среде
3.7. ПолиР и некоторые фосфогидролазы у галофильных архей Halobacterium salinarium и Halorubrum distributum
3.7.1. Показательство наличия полиР
3.7.2. Динамит содержания полиР в процессе роста галофильных архей Halobacterium salinarium и Halorubrum distributum на средах с
различной начальной кониентраиией Р

3.7.3. Изменение длины пени полиР у галофильных археи Halobacterium
salinarium и Halorubrum distributum в проиессе роста на среде с начальной концентрацией фосфата 2.3 мМ
3.7.4. Влияние начальной кониентраиии Р,_ в среде на активность некоторых фосфогидролаз в проиессе роста галофильных археи Halobacterium salinarium и Halorubrum distributum
3.8. Влияние условий повышеной солености на полиР и экзополиФосФатазную активность у галотолерантной эубактерии Brevibacterium antiquum
3.8.1. Сравнение содержания различных фракций полиР в проиессе роста Brevibacterium antiquum в отсутствии и в присутствии ЗМ NaCl в среде культивирования
3.8.2. Свойства экзополифосфатазы галотолерантной эубактерии Brevibacterium antiquum
3.8.3. Влияние условий культивирования на экзополифосфатазную активность галотолерантной эубактерии Brevibacterium antiquum
Заключение
Выводы
Список литературы

течение 3 часов при 20 °С. После обезвоживания в серии спиртов материал заключали в эпоксидную смолу Ероп 812. Ультратонкие срезы монтировали на опорные сеточки, контрастировали в течение 30 мин в 3% растворе уранилацегата в 70 % спирте и дополнительно контрастировали цитратом свинца по Рейнольдсу (Reynolds, 1963). Ультратонкие срезы просматривали в электронном микроскопе JEM-100В (JEOL, Япония) при ускоряющем напряжении 80 кв.
13. Аналитические методы
13. 1. Определение общего фосфора
Предварительно взвешенную сырую биомассу ресуспендировали в определенном объеме дистиллированной воды. Из полученной суспензии отбирали пробы (0,2 мл) и сжигали с концентрированной HCIO4 (0,2 мл). Процесс сжигания начинали со 100 °С, а затем через каждые 15 минут прибавляли по 5 °С, в конечном счете, температуру доводили до 150 °С. При сжигании проба темнеет. Процесс сжигания считали завершенным, когда происходило осветление пробы. Содержание общего фосфора в пробе определяли по количеству ортофосфата
13.2. Определение ортофосфата
Ортофосфат определяли, как описано в (Andreeva & Okorokov, 1993).
Реактивы: