Изучение семейства генов d4

• Автор: Честков, Александр Викторович
• Шифр специальности: 03.00.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1999
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 124 с.

1, ВВЕДЕНИЕ
2.ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
5.1. Транскрипционные факторы к их экспрессия в нервной системе
2.2. Металлосвязывающие домены, особенности их структуры и функций
3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
3.1. Материалы
3.Е. Методы
4. РЕЗУЛЬТАТЫ
4.1. Экспрессия neuro-d4 в центральной нервной системе крысы в постнатальыом развитии
4.2. Последовательности» гомологичные neuro-соприсутствуют в геномах других позвоночных и экспрессируются в нервных омотемах
4.3. Экспрессия neuro-d4 в эмбриогенезе мыши
4.4. Клонирование кЦНК гена neuro-d4 человека
4.5. Структура кдНК клонов
4.6. Первичная структура кДНК гена neuro-d4 человека
4.7. Первичная структура предполагаемого белка,
4.8. Хромосомная локализация neuro-d4 гена человека,
на панели соматических гибридов
4.9. Клонирование геномных последовательностей, гомологичных neuro-d4 из космидной библиотеки
генов человека
4.10. Анализ нуклеотидной последовательности космидных клонов в области, соответствующей зкзону 11 neuro-d4 гена крысы
4.11. Локализация космид, соответствующих генам ubi-d4 и oer-d4. на метафазных хромосомах человека
4.12. Клонирование кДНК транскриптов других членов
Ü4-семейства у позвоночных
4.13. Поиск последовательностей. гомологичных
□4-домену, в GenBank
ОБСУЖДЕНИЕ
5.1. Neuro-d4 ген детектируется в геномах
млекопитающих с помощью neuro-а4-кДНК крысы
5.3. Кинетика экспрессии neuro-d4 гена в развивающейся нервной системе грызунов,
5.3. Сравнение нуклеотидных и аминокислотных последовательностей neuro-d4 крысы и человека
5.4. Множественность d4-генов человека и хромосомная локализация
5.5. Строение и конформация 64-домена
5.6. Семейство о4-генов в геномах позвоночных
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
АГАГР) - зденовин (АТФ)
С(СТР) - цитозин (ЦТФ)
ВСВТР) - гуанин (ГТФ)
Т(ТТР) - тимидин (ТТФ)
N(МТР) - любой из вышеперечисленных нуклеотидов (тришоофзтов) и(ЦТР) - уридин (УТФ)
ОПТА - этиленлиаминтетраацетат (Трилок Б)
МеОН - метанол
НаРп - буферный раствор натрия фосфорнокислого одно/двух/трехзамещенного о ооотв. pH ТАЕ - ТРИС-ацетатный буферный раствор ТВЕ - ТРКС-боратный буферный раствор ДЕАЕ - диз тиламиноэтилцеллюлоза,
ДМСО - диметилоульфоксид ДМВА - диметилформамнд ДТТ - дитиотрейтол ФИТЦ - фенилизотиоцианат ’ - время в минутах " - время в секундах
плацента, кат-N HL1095)
3,1.2. Ферментные препараты.
Бое рестрикционные эндонуклеазы, применявшиеся при выполнении настоящей работы производства НПО "Фермент” (Вильнюс); ДНК-лигаза фага 14 собственного производства, щелочная фосфатаза С IP из кишечника теленка фирмы "Boeringer Mannheim" (Австрия), ДНКаза и ДКК-полимераза I фирмы "Pharmacia" (Швеция), фрагмент Кленова предоставлен Б.Л.Бухманом и С.Л. Киселевым.
Т7-ДКК полимераза - производства НПО "Фермент" (Вильнюс), Нуклеаза SI - производства фирмы "Pharmacia" (Швеция), Нуклеаза ЕхоШ производства фирмы "Fromega" (США). РНКаза А- производства фирмы "Serva" (Германия).
Протеиказа К - производства фирмы "Merck" (Германия).
Для определения последовательности использовали набор
Sequenases Verson 2,0 kit фирмы USB (США).
3.1.3. Реактивы.
Для приготовления растворов и сред использовались реактивы: ТРИС, ЭДТА, додецияоульфат натрия (SDS), MOPS, HEPES, лизсцнм, DTI, ATP - фирмы "Sigma" (США), Na-цитрат производства фирмы "Merck" (Германия).
В составе гибридизационной смеси использовались ДКК спермы
лосося (Sigma Type-III, натриевая соль), предварительно очищенная; подивинилпирролидон и фиколл 400 - фирмы "Sigma"; бычий
сывороточный альбумин (BSA) (Pentax, фракция V),
Для мечения ДКК в работе применялись дезокоирибонуклеоэидтрифосфаты [«-РЗдНТФ - производства ВО "Изотоп" (г,Обнинск) и (й-’РЭдАТФ (С,-Петербург.РФ),
В качестве стандартов для определения величин линейных