Высокоэффективная мембранная хроматография : Формирование структуры порового пространства полимер. носителей для межфаз. разделения белков

• Автор: Тенникова, Татьяна Борисовна
• Шифр специальности: 02.00.20
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 1998
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 177 с.

Оглавление

Глава 1. Введение
Глава 2. Аналитический обзор
2.1. Биосепарация - основной этап биотехнологии: новые разделительные
фазы и методы
2.1.1. Усовершенствование технологии производства хроматографических сорбентов
2.1.2. Привлечение мембранной техники к решению хроматографических задач
2.1.3. Введение в практику непрерывных разделительных слоев
2.2. Использование “аффинности” (биологической комплементарное™) в йомдгеат процессах
2.2.1. Сорбенты для биоспецифических (аффинных) межфазовых разделений биологических субстанций
2.2.2. Аффинные лиганды
2.2.2.1. Лиганды высокой специфичности
2.2.2.2. Общеспецифические аффинные лиганды
2.3. Иммобилизованные ферменты и ферментная технология
2.4. Краткий обзор существующих теоретических моделей интеракцион-ных тапов хроматографических разделений
2.4.1. Градиентная и изократическая адсорбционная хроматография
2.4.2. Перфузионная хроматография и другие виды хроматографических разделений с улучшенным массопереносом
2.4.3. Стехиометрическая модель удерживания
2.4.. 4. Теоретическая модель существования
“рабочего слоя сорбента ”

2.5. Сорбентные материалы на основе макропористого сополимера 2,3 -эпокси-пропилметакрилата (глицидилметакрилата) и этиленгликольдиметакрила-та (эталендиметакрилата) (ГМА-ЭДМА)
Литература
Глава 3. Основная часть
3.1. Макропористые полимеры на основе сшитого этилендиметакрилатом глицидилметакрилата (ГМА-ЭДМА)
3.1.1. Тонкое конструирование норового пространства на примере синтеза полимерных макропористых ГМА-ЭДМА сорбентов для эксклюзионной жидкостной хроматографии (ЭЖХ) различных классов макромолекуляр-ных веществ
3.1.2. Формирование топографии адсорбционной поверхности ГМА-ЭДМА сорбентов
3.1.3. Монолитные ГМА-ЭДА макропористые слои контролируемой морфологии и топографии
3.2. “Одноактный” десорбционный процесс и “многоактная” адсорбция -десорбция в хроматографических разделениях
3.3. Принципы разделения белков в мембранной хроматографии
3.3.1. Особенности белков как макромолекулярных объектов транспортного сепарационного процесса
3.3.2. Статистическое описание процесса одноактной десорбции
3.3.3. Чем определяются параметры пика в десорбционной хроматографии ?
3.3.4. Чем определяется разрешение пиков (эффективность разделения) в мембранной хроматографии?

3.3.5. Внутрипоровая гидродинамика - важный параметр
оптимизации разделения в мембранной хроматографии

3.5. Практическое применение ГМА-ЭДМА макропористых стационарных фаз с контролируемым поровым пространством для различных видов процессов, связанных с межфазовым распределением биополимеров, но отличающихся от классического динамического разделения (хроматографии)
3.5.1. Образование аффинных (биоспецифических) комплексов
3.5.1.1. Выделение рецепторных белков стрептококков
3.5.1.2. Комбинаторная хроматография: использование нескольких дисков различной функциональности в одном акте биосепарации

3.5.1.3. Использование синтетических пептидов в качестве
биоспецифических лигандов. Эффективные иммуносорбенты
3.5.1.4. Практическое построение in vitro моделей биологических взаимодействий

3.5.2. Проточные реакторы непрерывного действия на основе иммобилизованных ферментов.

Литература

Выводы

Общий лист библиографии

Приложения

отношения, выведенные из обсуждаемых выше равновесий. Поскольку разделение веществ происходит, по нашему утверждению, практически в одном акте адсорбции-десорбции (а точнее говоря, на единственной стадии десорбции), чрезвычайно важным оказывается начальное распределение молекул белка по энергии их взаимодействия (распределение по параметру Т) при их адсорбции на поверхности пор (каналов). Десорбированные молекулы мгновенно покидают свои “посадочные места” и уходят с потоком подвижной фазы из "мембраны". В данной ситуации параметр Z не усредняется, как в случае хроматографического многоактного процесса в колонке, которое обязательно имеет место как в изократическом режиме элюирования, так и при наложении градиента вытеснителя. В литературе, посвященной теории интеракционных типов колоночной ВЭЖХ принцип усреднения параметров подразумевался, однако нигде не был приведен четкий физический аргумент данного усреднения.
2.4..4. Теоретическая модель существования "рабочего слоя сорбента”
Важным для хроматографии в тонких ("мембранных") слоях нам представляется рассмотрение выраженного как во времени [2], так и, эквивалентно, в пространстве [109, 110] параметра, учитывающего нестационарность начального этапа процесса градиентного элюирования в колонке. Этот параметр следует принимать во внимание при практическом выборе формы градиента, сопоставляя ее с длиной рабочего слоя (толщиной мембраны).
Существует ряд недавно опубликованных работ [111-115], где также обсуждается стратегия и тактика хроматографических разделений с использованием ультракоротких слоев ("мембранные колонки"). Чаще всего, в качестве стационарных фаз действительно используются мембраны различной химической природы и случайной пористости, но с привитыми адсорбционно-активными группами. Подобные мембраны, для обеспечения достаточной оперативной поверхности складываются в "стопку" со всеми вытекающими обстоятельствами, приводящими к искажению истиной сепарационной картины за счет