Хроматографическое исследование физико-химических процессов получения агара

• Автор: Суховерхов, Святослав Валерьевич
• Шифр специальности: 02.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2000
• Место защиты: Владивосток
• Количество страниц: 129 с.

Список сокращений
ВЭЖХ - высокоэффективная жидкостная хроматография
ВЭЭХ - высокоэффективная эксклюзионная хроматография
ГЖХ - газожидкостная хроматография
ДМСО - диметилсульфоксид
ММР - молекулярно-массовое распределение
A/G - молярное отношение производных 3,6-ангидрогалактозы и
галактозы
G - остаток 3-связанной ß-D-галактопиранозы
L - остаток 4-связанной a-L-галактопиранозы
LA - остаток 4-связанной 3,б-ангидро-а-Ь-галактопиранозы
LA2M - остаток 4-связанной 2-0-метил-3,6-ангидро-а-Ь-галактозы
Мп - среднечисленная молекулярная масса
Mw - среднемассовая молекулярная масса

Оглавление

Введение б
Глава 1. Обзор литературы
1.1. Высокоэффективная эксклюзионная хроматография биополимеров
1.1.1. Механизм эксклюзионного разделения
1.1.2. Сорбенты для эксклюзионной хроматографии
1.1.3. Неэксклюзионные взаимодействия при анализе
белков и полисахаридов
1.1.3.1. Ионные эффекты
1.1.3.2. Гидрофобные взаимодействия
1.1.3.3. Адсорбция
1.1.3.4. Внутримолекулярные и межмолекулярные взаимодействия
1.1.4. Калибровка хроматографической системы и расчет
молекулярно-массовых характеристик
1.1.4.1. Калибровка колонок по коммерческим стандартам полисахаридов
1.1.4.2. Калибровка колонок по узким фракциям
данного полисахарида
1.1.4.3. Калибровка колонок по полидисперсным
образцам данного полисахарида
1.1.4.4. “Универсальная” калибровка
1.2. Строение агара и агарозы
1.3. Методы исследования строения агара и агарозы
1.3.1. Химические методы

1.3.2. Спектральные методы З
1.4. Производство агара и агарозы
1.4.1. Технология получения агара из А. ґоВискіетія
1.4.2. Технология получения агара из & ататп
1.4.3. Способы получения агарозы
Глава 2. Объекты и методы исследования
2.1. Объекты исследования
2.1.1. Получение агара из А. іоЬисїііетіх
2.1.2. Получение агара из О. атапвіі
2.2. Методы исследования
2.2.1. Источники случайных и систематических ошибок в хроматографическом анализе и методы их устранения
2.2.2. Методика исследования основных физикохимических процессов получения агара
2.2.3. Определение молекулярной массы полисахаридов
2.2.4. Определение структуры полисахаридов
2.2.5. Физико-химическая характеристика полисахаридов
Глава 3. Результаты и их обсуждение
3.1. Разделение и идентификация смесей белков и
полисахаридов методом ВЭЭХ
3.2 Исследование основных физико-химических процессов
получения агара из А. їоЬисНіеті&
3.2.1. Исследование процесса предварительной обработки
водоросли
3.2.2. Исследование процесса экстракции агара
3.2.3. Исследование процесса очистки гелей экстрактов

остатки р-D-галактопиранозы обозначают буквой G, буквой L обозначают 4-связанные остатки a-L-галактопиранозы и LA обозначают 4-связанные остатки 3,6-ангидро-а-Ь-галактопиранозы [105, 163, 164]. Согласно этой номенклатуре GP обозначают 4,6-0-(Г-карбоксиэтилиден)-0-галактозу, L6S - б-сульфат-L-галактозы, LA2M - 2-0-метил-3,6-ангидро-Ь-галактозу и т.д. Для обозначения

сигналов в С ЯМР-спектре указывают обозначение моносахарида и номер соответствующего атома углерода. Например, сигнал 3 атома углерода в 6-0-метил-О-галактопиранозе обозначают G6Mc-3, или сокращенно G6M-3 [105].
Таким образом, основные показатели, характеризующие структуру агара (общее содержание сульфата, моносахаридный состав, величина А/G) можно определить химическими методами. Однако для окончательного подтверждения строения полисахарида и при расшифровке сложных структур с “замаскированной регулярностью” необходимо использовать 13С ЯМР-спектроскопию.
1.4. Производство агара и агарозы
До 1920 г. основным производителем агара была Япония [165]. Считается, что японцы заимствовали способ производства агара из Китая в 1658 или 1662 г., а промышленная выработка начата с 1760 г. [88, 165]. До середины XX века производство агара в Японии носило кустарный характер, и для выработки применялись специально составленные смеси красных водорослей Gelidium, Gracilaria, Campylaephora и Acanthopeltis [1, 86, 166-168]. Технология производства агара включала отбеливание водорослей на солнце, измельчение в ступах, промывку водой и варку в кипящей воде от 6 до 20 ч. Горячий агар фильтровали через ткань и желировали в деревянных ящиках. Гель резали на кусочки, очистку, обезвоживание и сушку проводили путем вымораживания агара естественным путем в течении одной-двух недель [86-88,