Клинико-лабораторный мониторинг за развитием повреждающего воздействия Staphylococcus aureus на лизосомальный и генетический аппараты лейкоцитов крови человека

• Автор: Бобылева, Елена Владимировна
• Шифр специальности: 14.00.46
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2004
• Место защиты: Саратов
• Количество страниц: 153 с. : 28 ил.

ВВЕДЕНИЕ. НОВЫЕ ВОЗМОЖНОСТИ ДЛЯ ОЦЕНКИ АПОПТОЗА, ДЕГРАНУЛЯЦИИ И ФАГОЦИТАРНОЙ АКТИВНОСТИ ЛЕЙКОЦИТОВ, СВЯЗАННЫЕ С ВНЕДРЕНИЕМ В КЛИНИЧЕСКУЮ ПРАКТИКУ МЕТОДА ПРОТОЧНОЙ ЦИТОМЕТРИИ. МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ. Выращивание бактерий и приготовление бактериальных взвесей . Оценка жизнеспособности бактерий и бактерицидного эффекта лейкоцитов на клетки . Приготовление смесей клеток . Инактивация сывороточного комплемента. Приготовление экстрактов лизосомальных гранул лейкоцитов для биохимических исследований. Определение активности эластазы. Определение содержания внутриклеточной ДНК. Оценка состояния структуры хроматина лейкоцитов. ЦИТОМЕТРИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ. ЗАДЕРЖКА ДЕГРАНУЛЯЦИИ ЛЕЙКОЦИТОВ ПРИ СНИЖЕНИИ ЭФФЕКТИВНОСТИ КИЛЛИНГА СТАФИЛОКОККА В КУЛЬТУРАХ КЛЕТОК ЦЕЛЬНОЙ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА. ПОВЫШЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ ДНК В АКТИВНЫХ ФАГОЦИТАХ, ПОГЛОТИВШИХ МИКРОБНУЮ ДНК. ЗАДЕРЖКА ГИБЕЛИ ЛЕЙКОЦИТОВ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА ПРИ ИХ ПОНИЖЕННОЙ ФАГОЦИТАРНОЙ И БАКТЕРИЦИДНОЙ АКТИВНОСТИ В УСЛОВИЯХ V VI
i . Генетический дефект синтеза эластазы в лизосомальных гранулах лейкоцитов человека и животных при синдроме ЧедиакаХигаси Vi .


Для изучения образования лейкоцитарных антибиотиков 1, 2 и 3 протегринов и доказательства ключевой роли в этом процессе лейкоцитарной эластазы американские исследователи i . Очищенная эластаза расщепляла белкипредшественники пропротегрины с образованием зрелых протегринов. Количество образуемых антибио тиков зависело от концентрации фермента и времени инкубации. Однако, в присутствии специфического ингибитора эластазы процесс не начинался и прекращался после его добавления. В отличие от эластазы, катепсин не расщеплял белкипредшествснники с образованием антибактериальных пептидов. Белкипредшественники не обладали бактерицидными свойствами, но инкубация их вместе с
эластазой в течение мин приводила к появлению антибактериальной активности, достаточной для киллинга i vi. По данным i . Интенсивность этого процесса отражает эффективность киллинга стафилококка в условиях i vi. С другой стороны, известно, что лейкоцитарная эластаза и антибактеральные пептиды не принимают участия в киллинге i vi кальцийзависимых штаммов ii iii, обладающих при С резистентностью к поглощению гранулопитами крови человека и не вызывающих интенсивной воспалительной реакции на месте альтерации. Это возможно является причиной быстрого распространения этого микроорганизма с места его внедрения во внутренние оргйны Vi . Однако, факторы вирулентности ii . Vi . В последние годы объектом интенсивного изучения является механизм, с помощью которого реализуется i viv синергический бактерицидный эффект активных радикалов кислорода и содержимого лизосомальных гранул лейкоцитов в очаге воспаления.