Характеристика надмолекулярных комплексов поверхностных антигенов лимфоцитов человека

• Автор: Кротов, Григорий Иванович
• Шифр специальности: 14.00.36
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 145 с. : ил.

ГЛАВА 1. Введение. Комплексы цитозольных белков. Структурная организация 2, 3 и доменов. Комплексы, образуемые тетраспанинами. Комплексы молекулы 4. Протоонкоген белковая тирозин киназа . Ассоциация между 4, и цитоскелетом. Латеральные ассоциации белка 4. Тирозинфосфатаза и его ассоциация с 4 рецепторным комплексом. Тклеточный рецепторный комплекс . Внеклеточные растворимые лиганды. Иммуиопреципитация. Эпитопнос маркирование i i. Метод вылавливания глутатионтрансферазы . Флуоресцентные методы детекции белков
1. Постэлектрофоретическая окраска белков. Предэлекгрофоретическая окраска белков. Идентификация белков но массспектрометрическим данным. ГЛАВА 2. Материалы. Клетки и их источники. Растворы, использованные в работе. Мечение флуоресцентными красителями. Хлорофорэтанольная экстракция белков. Приготовление клеточного лизата. Иммунопреципитация. Иммуноблоттинг. Массспекгромстрический анализ белков
взаимодействующие белки выделяют из клеточного лизата с помощью иммобилизованных антител, распознающих эпитоп на одном из известных компонентов комплекса, а затем, как правило, с помощью иммуноблоттинга выявляют ассоциированные белки , .


Взаимодействующие домены были первоначально обнаружены в белках, образующих каскады пулей передачи сигнала, но впоследс твии были идентифицированы в белках, которые регулируют многие другие аспекты клеточного поведения. Как правило, длина доменов взаимодействия составляет от до 0 аминокислотных остатков и домены свернуты таким образом, что их Д и Сконцы находятся на одной стороне, а их лигандсвязывающая поверхность на противоположной поверхности домена и экспонирована на поверхности белка. В настоящее время описано несколько десятков взаимодействующих модульных доменов Раиздп, . Эти домены распознают специфические сайты в структуре их белковых партнеров, включая фосфорилирование, богатые пролином участки, Сконцевые мотивы и заряженные головки фосфолипидов и аминокислот рис. Обычно, взаимодействующие домены распознают некий специфический пептидный мотив и фланкирующую его последовательность. Константы ассоциации доменов находятся в области от нано молярных, до молярных значений. Структурная организация ЯШ, 8НЗ н доменов. Домен взаимодействия ЗИ2 впервые был охарактеризован как некаталитический домен тирозинпрогеинкиназ семейства 8гс . В геноме человека закодировано порядка 5 БШ доменов РаБОп, . Домены БШ предназначены для распознавания коротких фосфотирозин рТуг содержащих пептидов, которые обнаруживаются в активированных рецепторных протеинкиназах Кипуап, РаУ5оп, . Домены БН2 состоят приблизительно из 0 аминокислотных остатков, которые сворачиваются в структуру с центральным рлистом, разделяющим домен на два связывающих кармана, один для фосфотирозииа и второй для С концевого фланкирующего пептида Уак5тап, .