Влияние газовых смесей с различным содержанием кислорода на культивируемые эндотелиальные и мезенхимальные стромальные клетки человека

• Автор: Гринаковская, Ольга Сергеевна
• Шифр специальности: 14.00.32
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 154 с. : 30 ил.

Экспериментальные модели для изучения эффектов измененных газовых сред. Эндотелиальные клетки человека морфология и функциональная характеристика. Мезенхимальные стромальные клеткипредшественники человека морфология и функциональная характеристика. Цитокины и молекулы клеточной адгезии как показатели функционального состояния клетки. Гипоксия. Механизмы действия на клеточном уровне. Гипероксия. Механизмы действия на клеточном уровне. Материалы и методы. Культивирование клеток. Химические реактивы, культуральные среды, пластик. Выделение и культивирование эндотелиальных клеток пупочной вены человека. Выделение и культивирование мезенхимальных стромальных клеток человека из липоаспирата. Криоконсервация мезенхимальных стромальных клетокпрсдшественников и эндотелиальных клеток человека. Исследование свойств культивируемых клеток в условиях моделируемой кратковременной и длительной гипоксии и гипероксии. Моделирование гипоксии и гипероксии. Однако, было показано, что количество патологий уменьшалось в 2 раза при этом, микроцефалия не встречалась вовсе в присутствии в газовой среде аргона Солдатов и др.


В работе в шпоксических условиях 4 часа, 5 на растущей культуре ЭК было продемонстрировано достоверное снижение активности тимидинкиназы, а при исследовании активности этого фермента в конфлуэнтном монослое не было обнаружено такого эффекта . МСК и активирует дифференцировку клеток в остеогенном и адипогенном направлениях . В году Грегом Семензой в клетках был идентифицирован транскрипционный фактор I1, и было показано, что при активации этого фактора происходит реализация практически всех эффектов пониженного содержания кислорода в среде . Показано, что при экспозиции в течение 4 часов в газовой среде с 0,5 1 0 эндотелиальных клегок легкого человека белки I и I2. Длительная гипоксия часов вызывала разную реакцию стимуляция белка i исчезла изза уменьшения стабильности се мРНК, а стимуляция I2 . Таким образом, анализ выше приведенных исследований показывает, что эффекты, получаемые при исследовании измененных газовых сред, зависят от концентрации кислорода в среде, длительности воздействия, типа изучаемых клеток. При этом не существует какоголибо единого протокола для оценки влияния сред с измененным содержанием кислорода, который сочетал бы в себе исследование эффектов различной длительности воздействия, его кратности, эффектов последействия. Необходимо отметить, что при постановке экспериментов с клетками необходимо учитывать фазы роста культуры, так как эффект может быть различен на одном и том же типе клеток. Кроме того, создание единой тестсистемы позволит сравнивать эффекты измененных газовых сред на разные клеточные типы, так как ответные клеточные реакции в значительной степени могут зависеть от различных факторов, например от степени дифференцировки.