Влияние клиностатирования на начальные стадии дифференцировки эмбриональных стволовых клеток мыши in vitro

• Автор: Константинова, Наталья Александровна
• Шифр специальности: 14.00.32, 03.00.25
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2008
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 147 с. : ил.

1.2. Влияние гравитации на культивируемые клетки
1.2.1. Влияние мигрогравитации на культивируемые клетки
1.2.2. Влияние гипогравитации на культивируемые клетки
1.3. Влияние гравитации на клеткипредшественники
1.4. Влияние факторов космического полета на эмбриональное развитие
1.5. Характеристика эмбриональных стволовых клеток мыши
1.5.1. Факторы, поддерживающие эмбриональные стволовые клетки в недифференцированном состоянии
1.5.2. Спонтанная и направленная дифференцировка эмбриональных стволовых клеток
1.5.3. Роль ряда транскрипционных факторов ОсМ, Рах6, Ргох1, Р1х2 в процессах дифференцировки
1.5.4. Влияние физических, химических и биологических факторов
на начальные стадии развития эмбриональных стволовых клеток мыши ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. Культивирование эмбриональных стволовых клеток мыши линии Я1 и эмбриональных фибробластов мыши
2.1.1. Химические реактивы, культуральные среды и посуда для культивирования клеток
2.1.2. Культивирование эмбриональных стволовых клеток мыши линии Ш
2.1.3. Выделение и культивирование эмбриональных фибробластов мыши
2.1.4. Криоконсервация эмбриональных стволовых клеток линии Ш и эмбриональных фибробластов мыши
2.2. Характеристики клиностата
2.2.1. Методы культивирования в условиях клиностатирования эмбриональных фибробластов мыши, эмбриональных стволовых клеток мыши линии II
2.3. Методы оценки состояния эмбриональных стволовых клеток мыши линии Ш
2.4. Клииостатирование эмбриоидных тел
2.5. Иммуноцитохимические методы исследования
2.5.1. Иммуноцитохимическое окрашивание кардиомиоцитов антителами к тропонину I
2.5.2. Иммуноцитохимический тест эмбриональных стволовых клеток на нейрональную дифференцировку
2.5.3. Иммуноцитохимия определения транскрипционного фактора ОсМ
2.6. Выявление актинового цитоскелета при помощи окраски специфическими антителами на Бактин
2.7. Микроскопическое исследование полутонких срезов эмбриоидных тел на световом и электронном микроскопе
2.8. Методы статистической обработки
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Влияние клиностатирования на пролиферативную активность и морфологию эмбриональных фибробластов мыши
3.2. Характеристика культивируемых эмбриональных стволовых клеток мыши линии К
3.3. Влияние клиностатирования на образование колоний эмбриональных стволовых клеток мыши линии Ш, культивируемых на подложке из эмбриональных фибробластов мыши
3.4. Влияние клиностатирования на образование колоний эмбриональных стволовых клеток мыши линии Ш, культивируемых в присутствии фактора ЫГ
3.5. Оценка жизнеспособности клеток и образование эмбриоидных тел после действия клиностатирования
3.6. Оценка плюрипотентного статуса эмбриональных стволовых клеток по транскрипционному фактору ОсМ после клинос татирования
3.7. Исследования влияния клиностатирования эмбриоидных тел на последующую дифференцировку клеток и7
3.7.1. Кардиомиоцитарная дифференцировка
3.7.2. Нейрональная дифференцировка
3.8. Изучение морфологии эмбриоидных тел после действия 0 клиностатирования
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
Список используемой литературы


Микро гравитация Перестройка актинового цитоскелета, снижение пролиферации клеток, увеличение индукции генов сГоэ, сох2, активация МАР киназных путей М. Микро гравитация, 4 суток Изменение клеточной морфологии, увеличении продукции простагланлипа, увеличении экспрессии ИЛ6 и инсулиноподобного фактора роста, уменьшение активности щелочной фосфатазы, подавлен уровень синтеза белков матрикса коллаген 1 типа и остеокальцин i . Микрогравитация, ч Подавление роста клеток и возникновение апоптоза, снижение продукции остсокальнина, ТО Р, белка теплового шока, повышение продукции ИД6 i . Тлимфоциты Микрофавитация БрасеаЬ Снижение мигогенной активности, увеличение продукции ИФНу, ИЛ2. Арегация, повреждение клеток, изменение адгезивных свойств. Подавление активации клеток . Линия Эигка1 злокачественные производные Тлимфоцитов Биоспутник Космос 0 ингибирование продукции ИЛ2 i . Взаимодействие ЫКлимфоцнтов человека и клеток линии К2 Микрогравитация, ч Сохраняли цитотоксическую активность к клеткаммишеням в условиях мигрогравитации, продукции ИФИу не менялась Буравкова Л. Б. и др. В., iiv О. Космический полет на 5й, 6й, 8й и й дни полета Нет изменений роста и минерализации костной ткани между полетным образцом и земным контролем . Таким образом, анализируя данные литературы, можно проследить широкий спектр реакции клеток при экспозиции их в условиях микрогравитации. Повидимому, существенность и разнообразность ответной реакции клеток объясняется как разными их типами, так и неодинаковыми сроками эксперимента.