ВОССТАНОВЛЕНИЕ ПЕЧЕНИ ПРИ ЕЕ МАССИВНОЙ РЕЗЕКЦИИ И ТОКСИЧЕСКОМ ПОВРЕЖДЕНИИ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ

• Автор: Кочергин, Максим Вадимович
• Шифр специальности: 14.00.27
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2009
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 153 с. : 4 ил.

Оглавление

Список сокращений и обозначений

Введение.
Глава 1. Восстановление печени при действии супернатантов из крови и печени животных обзор литературы

1. История вопроса

1.1 Опыты на животныхпарабионтах.

1.2 Опыты с перекрестным кровообращением

1.3 Опыты с аутотрансплантацией ткани печени

1.4 Опыты с введением сыворотки или плазмы животных после резекции

Г.5 Опыты, с введением экстракта печени.

2. Понятие о факторах роста.

2.1. Основные факторы роста.
2.2. Восстановление печени в отсутствие отдельных факторов
3. Супернатанты и способы их очистки от балластных веществ
3.1. Принцип получения супернатанта.
3.2. Супернатант изсыворотки плазмы крови
3.3. Супернатант из печени после ее резекции или химического повреждения.
3.4 Подходы к очистке супернатантов от балластных веществ.
4. Модели для изучения возможности восстановления печени под действием различных супернатантов.
4.1. Модели i vi
4.2. Модели i viv.
5. Методы оценки восстанавливающего действия супернатантов на печень
5.1. Оценка синтеза ДНК.
5.2. Оценка числа митозов.
5.3. Оценка повреждения печени по активности ферментов
5.4. Оценка функции печени
6. Заключение.
Глава Материал и методы
1. Получение супернатантов
1.1. Забор печени после ной резекции
1.2 Забор печени после ее токсического повреждения
1.3. Забор печени неонатального поросенка.
1.4 Приготовление супернатанта
2. Разработка модели повреждения печени.
2.1 Модель с резекцией печени крысы.
2.2 Модель с токсическим повреждением печени крысы.
2.3 Модель с токсическим повреждением печени мыши
3. Методы оценки состояния печени
3.1 Оценка состояния печени по активности и 1 в сыворотке крови
3.2 Разработка метода оценки состояния печени по остаточной
концентрации ИЦЗ в крови.
3.3. Сравнение методов оценки состояния печени по активности и I и по остаточной концентрации ИЦЗ в крови
4. Оценка возможности восстановления печени при действии супернатантов
5. Статистическая обработка данных.
7. Расчет индексов повреждения и восстановления печени
Глава 3. Разработка модели повреждения печени
3.1 Опыты на крысах
3.1.1 Модель резекции печени.
3.1.2 Модель токсического повреждения печени ТАА.
3.2 Опыты на мышах.
Глава 4. Восстановление поврежденной печени при действии различных
супернатантов
4.1 Восстановление печени при действии супернатанта из печени крысы после резекции.
4.1.1 Действие супернатанта на модели резекции печени крысы.
4.1.2 Действие супернатанта на модели токсического повреждения р
печени крысы.
4.1.3 Действие супернатанта на модели токсического повреждения печени мыши
4.2 Восстановление печени при действии супернатанта из печени крысы после ее повреждения ТАЛ.
4.3 Восстановление печени при действии супернатанта из печени неонатального поросенка
Заключение
Выводы.
Приложение. Активность и I в крови экспериментальных животных
Литература


Материалы диссертации доложены на Всероссийской научной конференции с международным участием Успенские чтения (Тверь, ). Апробация работы проведена на совместном заседании курса хирургической гепатологии при кафедре хирургии ФППОВ ММА им. И.М. Сеченова и отдела хирургии печени НИЦ ММА им. И:М'. Сеченова. Диссертация иллюстрирована таблицами и рисунками. Глава 1. Восстановление печени после ее повреждения вызывает большой интерес с давних времен. Еще Эсхил в своей трагедии- «Прикованный Прометей» описал этот феномен. В научной литературе первые сообщения о возможности восстановления, печени после ее резекции появились в -х годах [9]. В' году G. М. Higgins и R. М. Anderson впервые количественно описали процесс регенерации печени и предложили модель резекции печени, которая легла в основу многих работ по изучению данного процесса [3]. С тех пор множество исследований было посвящено изучению морфологических, биохимических и молекулярных изменений, имеющих место в процессе регенерации. Параллельно шел поиск веществ, способных стимулировать, процесс восстановления печени. И после многочисленных экспериментов стало понятно, что источником таких веществ может выступать сама печень. В опытах на крысах-парабионтах A. S. Wenneker и др. N. L. R. Bucher и др. В'то же время в работах Л. Е. Rogers и др. Данные первых двух работ свидетельствовали об изменениях в крови, стимулом для которых служит резекция печени. Однако небольшое число работ и противоречивость их результатов не позволяли сделать обоснованных выводов. Были необходимы дальнейшие эксперименты с использованием другой модели. В году F. L. Moolten и N. L. R. Bucher [9] провели опыты с перекрестным кровообращением у крыс. Одной- из крыс в паре выполняли резекцию печени в различном объеме, после чего начинали перекрестное кровообращение. В результате было отмечено увеличение синтеза ДНК в печени ингактной крысы, которое авторы связали с увеличением концентрации стимулятора или уменьшением концентрации ингибитора’ в крови. Попытки других исследователей воспроизвести результаты данной работы не увенчались успехом []. В году A. Sakai [1] также опубликовал результаты экспериментов с перекрестным кровообращением у крыс. Было выявлено выраженное увеличение синтеза ДНК в печени интактных животных после резекции печени у второго животного, хотя это увеличение было достоверно меньшим, чем отмечаемое в резецированной печени. Полученные данные также свидетельствовали в пользу гуморальных изменений в крови. Однако вопрос об увеличении уровня стимулятора или снижении уровня ингибитора в крови оставался открытым. В: году В. Fisher и др. F. L. Moolten и др. Одной из крыс в. У одиночных крыс после % и % резекции печени отмечалось усиление и снижение синтеза ДНК соответственно по сравнению с интактными крысами. Перекрестное кровообращение интактной крысы и крысы после резекции печени приводило к достоверному увеличению синтеза ДНК в печени интактной крысы, причем синтез увеличивался пропорционально объему резекции печени и достигал максимума при гепатэктомии. Авторы также предположили появление в крови стимулятора регенерации печени. Однако так как ответ был наиболее выраженным после гепатэктомии, авторы заключили, что стимулирующий фактор производится не в резецированной печени. Несколько позже этот вывод был опровергнут J'. U. Levi и др. Таким образом, работы с перекрестным кровообращением более убедительно показывали, что после резекции печени в крови появляются вещества, которые приводят к усилению синтеза ДНК как в самой* резецированной печени [], так и в печени интактных животных [, 9, 1]. Это свидетельствовало о том, что способность печени к восстановлению значительно уменьшается при достижении определенной критической массы остаточной паренхимы. В. Sigel и др. У животных контрольной группы отмечалось развитие атрофии трансплантата. У животных после резекции печени авторы отметили достоверное увеличение среднего относительного веса аутотрансплантатов » по сравнению с контролем. Тем не менее, размер аутотрансплантатов был меньше исходного, что свидетельствовало о неполном обращении атрофии. G. F. Leong и др.