Иммунологические методики в комплексном анализе микрообъектов судебно-биологической экспертизы

• Автор: Александрова, Вера Юрьевна
• Шифр специальности: 14.00.24
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2008
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 188 с. : 4 ил.

1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1 Основные иммунологические методы для установления групповой

принадлежности по системе АВО.

1 Использование моноклональных антител в традиционных и новых методах СМЭВД.

1.3 Выявление антигенов системы АВО в различных объектах СМЭВД.

2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1 Моноклональные антитела.

2.2Получение глобулиновой фракции с помощью высаливания сульфатом аммония.

2.3 Получение глобулиновой фракции гельфильтрацией.

2.4Получение антител, меченных флуоресцсином

2.5Получение конъюгата МКА с пероксидазой хрена.

2.6Объекты исследования.
2.7Иммунологические методики
2.7.1 Методика дотИФА.
2.7.2 Основная схема РАЭ.
3 УСТАНОВЛЕНИЕ ГРУППОВЫХ СВОЙСТВ ЯТЕН КРОВИ С
ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ.
3.1 Выбор модификации РАЭ для выявления АВН антигенов в следах крови
с использованием МКА
3.2Изучение возможности использования гельфильтрации для исследования серийных образцов крови
4 ИССЛЕДОВАНИЕ МИКРОСЛЕДОВ СЛЮНЫ В СИСТЕМЕ
КОМПЛЕКСНОГО АНАЛИЗА
4.1 Одностадийный дотИФА для выявления i антигенов.
4.2Раздельное выявление АВН антигенов в клеточном осадке и жидкой
части слюны методом РАЭ.
4.3Стандартизация условий проведения иммунологических реакций
5 ВОЗМОЖНОСТИ ИССЛЕДОВАНИЯ ЧАСТИЦ ПЕРХОТИ ИММУНОЛОГИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ
6 МЕТОДИКА ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИГЕНОВ СИСТЕМЫ АВО В МИКРОФРАГМЕНТАХ ВОЛОС.
6.1 Подбор МКА, методов их очистки, условий хранения и необходимых
титров для исследования волос.
6.собенносги пробоподготовки и проведения РАЭ при выявлении антигенов системы АВО в микрофрагментах волос
7 МЕТОДИКА ДОТРИФ ДЛЯ ЭКСПРЕССАНАЛИЗА МИКРООБЪЕКТОВ
8 ОПРЕДЕЛЕИЕ МЕСТА ИММУНОЛОГИЧЕСКИХ МЕТОДОВ В КОМПЛЕКСНОМ АНАЛИЗЕ ОБЪЕКТОВ СМЭВД.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ


Некоторые авторы отмечали, что традиционные серологические методы в данном случае часто дают неспецифические результаты . Более стабильные и надежные результаты получают при типировании антигенов системы АВО методом твердофазного иммуноферментного анализа ИФА , который стал применяться в судебной медицине с года . Если в реакции прямой гемагглютинации, КРА, РСА и РАЭ комплекс антигенантитело выявляют с использование эритроцитов по наличию реакции микрогсмагглютинации, то ИФА основан на ином способе детекции данного комплекса. Регистрация произошедшего иммунного взаимодействия осуществляется с использованием конъюгата иммунореагента с молекулами фермента, который можно выявить по образованию окрашенных продуктов катализируемой им реакции. Такая система регистрации иммунных комплексов, также как и эритроцитарная, обладает высокой чувствительностью и специфичностью. Е несомненными преимуществами являются воспроизводимость, технологичность и быстрота проведения анализа , , 2. К сожалению, в отечественной практике судебнобиологической экспертизы метод ИФА не нашел широкого применения, вероятно, вследствие отсутствия доступных реактивов. За рубежом изучалась возможность применения ИФА для выявления антигенов АВН в объектах СМЭВД. Широкое распространение получил гетерогенный ИФА твердофазный ИФА, I, при постановке которого антиген или антитело используют в иммобилизованном состоянии и формирование специфического иммунокомплекса проходит на твердой фазе. Первоначально был использован вариант ИФА, где в качестве твердой фазы использовали планшеты. В работах . Т. i, .