"Молекулярные механизмы апоптоза при окислительном стрессе

• Автор: Часовских, Наталия Юрьевна
• Шифр специальности: 14.00.16
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2009
• Место защиты: Томск
• Количество страниц: 191 с. : 28 ил.

1.1. Окислительная регуляция и дизрегуляция клеток

1.2. Феномен программированной клеточной гибели.

1.3. Регуляция апоптоза.

1.3.1. Редоксчувствительные механизмы регуляции апоптоза.

Заключение

Глава 2. Материал и методы исследования.

2.1. Материал исследования

2.1.1. Клиническая характеристика пациентов с острым воспалением

2.2. Методы исследования

2.2.1. Выделение и культивирование мононуклеарных лейкоцитов крови .

2.2.1.1. Выделение мононуклеарных лейкоцитов крови

2.2.1.2. Культивирование мононуклеарных лейкоцитов крови с перекисью водорода
2.2.1.3. Культивирование мононуклеарных лейкоцитов крови с ингибитором ЛЧК БРбОО 5.
2.2.1.4. Культивирование мононуклеарных лейкоцитов крови с ингибитором р МЬ .
2.2.2. Оценка продукции активных форм кислорода мононуклсарными лейкоцитами крови методом проточной лазерной цитофлуориметрии
2.2.3. Оценка реализации апоптоза мононуклеарных лейкоцитов крови с использованием метода проточной лазерной цитофлуориметрии.
2.2.4. Определение апоптотически измененных мононуклеарных лейкоцитов с использованием Т1Л4ЕЬметода.
2.2.5. Оценка изменения митохондриального трансмембранного потенциала мононуклеарных лейкоцитов крови методом проточной лазерной цитофлуориметрии.
2.2.6. Оценка количества ТЫРЯ 1положительных мононуклеарных лейкоцитов крови методом проточной лазерной цитофлуориметрии
2.2.7. Оценка продукции мононуклеарными лейкоцитами крови методом иммуноферментного анализа
2.2.8. Оценка продукции I8 и I мононуклеарными лейкоцитами крови методом иммуноферментного анализа
2.2.9. Оценка экспрессии мРНК генов белковрегуляторов апоптоза в мононуклеарных лейкоцитах крови методом ПЦР в реальном времени
2.2 Оценка содержания киназ, факторов транскрипции, белковрегуляторов апоптоза и их фосфоформ в мононуклеарных лейкоцитах крови методом вестернблоттинга
2.2 Статистический анализ результатов
Глава 3. Особенности реализации апоптоза мононуклеарных лейкоцитов крови в условиях окислительного стресса.
3.1. Моделирование окислительного стресса мононуклеарных лейкоцитов крови i vi
3.2. Закономерности реализации летальной программы мононуклеарных лейкоцитов при окислительном стрессе
1 лава 4. Роль МАРкиназ в регуляции апоптоза при окислительном стрессе
Глава 5. Участие редоксчувствительных транскрипционных факторов в реализации программы апоптоза при окислительном стрессе
5.1. Про и антиапоптогенная функция р. Роль р в регуляции апоптоза при окислительном стрессе
5.2. Функции ядерного фактора кВ и программированная клеточная смерть.
Глава 6. Состояние системы белковрегуляторов апоптоза при окислительном стрессе
Заключение.
Выводы.
Список литературы


К другим механизмам воздействия Н2О2 на клетки относится снижение активности альдегиддегидрогеназы и количества лактата, уменьшающее интенсивность гликолиза 4, а также индукция процессов иерекисного окисления липидов, изменяющих структуру и свойства в том числе проницаемость клеточных мембран. При этом увеличение внутриклеточной концентрации Са2 приводит к активации фосфоинозитидного обмена , а истощение запасов АТФ к гибели клетки 3 4. Согласно данным Н. К. Зепкова и еоавт. С.Ю. Банниковой , возможна перекисьиндуцированная инактивация i viv одного из ферментов антиоксидантной защиты каталазы и ингибитора протеиназ. Активация перекисью водорода сывороточных белков системы комплемента по альтернативному пути увеличивает содержание хемоаттрактапта С5а 6. Помимо генерации АФК, важную роль в регуляции редокспроцессов в клетке играет антиоксидантная система. Ее ферментативные компоненты включают супероксиддисмутазу, каталазу, глутатиопзависимые пероксидазы и трансферазы. Действие данных ферментов, направленное против определенных АФК, строгоспецифично для различных типов клеток, органов и используемых металловкатализаторов железо, селен, цинк, медь, марганец. Неферментативная антиоксидантная защита клетки включает глутатион, хелаторы железа, витамины С и Е . Ведущую роль в обеспечении антиоксидантной защиты в клетке играют пептиды с содержащими аминокислотами цистеин, цистин, метионин и, в частности, глутатионтрипептид, образованный аминокислотами цистеином, глутаминовой кислотой и глицином. В организме человека присутствуют окисленная около 3 общего количества и восстановленная формы глутатиона. Антиоксидантное действие глутатиона обусловливается его функцией как субстрата для глутатионпероксидазы и глутатионтрансфсразы .