Исследование внутриклеточных процессов методом динамической фазовой микроскопии

• Автор: Никандров, Сергей Леонидович
• Шифр специальности: 05.27.03, 03.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2000
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 167 с. : ил.

Глава I. Глава II. Глава III. Глава IV. Регистрация активности в клетке лука. Глава V. Неинвазивные методы оптической прижизненной микроскопии занимают особое место в арсенале современных средств, поскольку они, в отличие ог сканирующей электронной микроскопии и туннельной микроскопии, допускают исследования на клеточном уровне биообъектов в нативном состоянии. Основные недостатки традиционной оптической микроскопии биообъектов, присущие в различной степени фозоконграстным и конфокальным микроскопам, состоят в ограниченном пространственном разрешении и в необходимости окрашивания объектов для усиления контраста. Конформационные изменения и движения органелл сопровождаются, как правило, заметным изменением оптической разности хода ОРХ в их шггерференционном изображении, в то время как изменение локального поглощения света, регистрируемое в обычных амплитудных изображениях, может быть незначительным и недоступным измерениям. Также хорошо известно, что наблюдение внутриклеточных динамических процессов является источником очень важной информации о митозе, трансмембранном транспорте, формировании цитоскелета и влиянии на клегку внешних факторов.


Световой пучок от лазера 1 проходит через диафрагму 2 и собирающую линзу 3, попадает на входную диафрагму лучевода и, отражаясь от поворотного зеркала 5, проходит через зеркало с отверстием б, на которое поступает световой пучок от осветителя 7, через линзы 8 и 9, входящие в состав конденсора. Далее световой пучок лазера и световой пучок от осветителя проходит линзу , и от светоделительной пластины направляется на
сменный микрообъектив , фокусирующий световой пучок на исследуемую поверхность . Прошедший сквозь светоделительную пластину световой пучок попадает в опорный канал, где проходит компенсационную пластину , объектив опорного плеча и от эталонного зеркала с пьезокорректором отражается в обратном направлении. Световые пучки, отраженные исследуемой поверхностью и эталонным зеркалом , соединяясь на светоделительной пластине , вместе проходят проецирующую оптическую систему, состоящую из линзы проецирующего телескопа , светоделительной пластины и окуляра проецирующего телескопа . Далее, из окуляра проецирующего телескопа световой пучок попадает на поворотное зеркало и увеличенное фазовое изображение исследуемой области попадает в диссектор . Другая часть светового пучка проходит светоделительную пластину и попадает в комбинированную призму , где происходит его повторное деление часть, отражаясь попадает на фокусирующую линзу и затем на телекамеру , а другая часть проходит комбинированную призму и, отражаясь от нижней ее грани, попадает на собирающую линзу . После собирающей линзы световой пучок попадает на поворотное зеркало , затем проходит через фокусирующую линзу и попадает на плоскость визуального наблюдения.