УФ абсорбционная спектроскопия спинномозговой жидкости человека и ее аналогов

• Автор: Семибратова, Виктория Александровна
• Шифр специальности: 01.04.07, 03.01.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Иркутск
• Количество страниц: 108 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

Список использованных сокращений

Введение

Современные физические методы исследования спинномозговой жидкости человека

Физикохимические свойства спинномозговой жидкости человека

Существующие методы клиникобиохимического анализа спинномозговой жидкости.

Спектральные методы исследования спинномозговой жидкости

1.3.1. ИК спектроскопия спинномозговой жидкости.

1.3.2. Спектроскопия комбинационного рассеяния спинномозговой жидкости

1.3.3. Хроматография спинномозговой жидкости

1.3.4. ЯМР спектроскопия спинномозговой жидкости

УФ спектроскопия биологических объектов.
1.4.1. Основные принципы УФ спектроскопии.
1.4.2. УФ поглощение белков.
1.4.3. УФ спектроскопия спинномозговой жидкости.
Выводы главы 1
Методы анализа слабоструктурированных спектров поглощения спинномозговой жидкости человека.
Постановка задач исследования.
Изучение УФ спектров поглощения спинномозговой жидкости для нейрохирургических задач
2.2.1. Экспериментальное оборудование.
2.2.2. Методика регистрации спектров.
2.2.3. Методики обработки спектров
2.2.4. Анализ спектров поглощения спинномозговой жид
2.3. Спектроскопия спинномозговой жидкости в видимой об
Выводы главы 2.
Глава 3. Изучение перекисного окисления спинномозговой жидкости человека.
3.1. Хемилюминесценция спинномозговой жидкости при нейрохирургических заболеваниях
3.1.1. Методика измерения окислительной хемилюминесценции
3.1.2. Измерение интенсивности и времени затухания хемилюминесцснции.
3.2. Влияние перекисного окисления на спектр поглощения
спинномозговой жидкости
Выводы главы 3.
Глава 4. Изучение фармакокинетики Эссенциале Н методом
УФ абсорбционной спектроскопии.
4.1. Физикохимические свойства Эссенциале Н. 8
4.2. Методика исследования фармакокинетики Эссенциале Н
4.2.1. Характеристика образцов исследования
4.2.2. УФ спектроскопия надосадочной жидкости крови, содержащей Эссенциале Н.
4.2.3. Определение оптимального времени экспозиции Эссенциале Н
4.3. Сопоставление результатов с клиническими данными
Выводы главы 4.
Заключение.
Список литературы


Идея селективного воздействия фармакологических препаратов на определённые клетки была актуальна всегда, но приблизиться к её разрешению удалось лишь в настоящее время благодаря разработке и внедрению в медицину методов направленного транспорта. Доставка лекарственных препаратов осуществляется клетками крови (эритроцитами, лейкоцитами, тромбоцитами и др. Направленный транспорт лекарственных препаратов в охваченную патологическим процессом зону позволяет, наряду с созданием в ней высокой концентрации вводимого препарата, максимально снизить токсическое воздействие, терапевтическую дозу препарата и кратность введения [, , ]. Гепатопротектор «Эсенциале И» используется в медицинской практике для восстановления функциональной активности печени и снижения токсического действия химиотерапевтических препаратов у больных онкологическими и др. Для стандартных биохимических методик, используемых в медицине, это оказалось недоступно. В связи с этим, предложенная методика, основанная на измерениях с последующим математическим анализом УФ спектров поглощения надосадочной жидкости крови и «Эссенциале Н», позволяет качественно и количественно определять содержание «Эссенциале Н» в крови для решения задач направленного транспорта лекарственных препаратов и повышения эффективности лечения. Цели работы. Спектральные исследования спинномозговой жидкости человека с целью выявления особенностей ее состава при нейрохирургических заболеваниях и в период выздоровления. Изучение эффективности связывания лекарственного препарата «Эссенциале II» с клетками крови человека методом УФ абсорбционной спектроскопии. Задачи исследовании. Выделить и проанализировать перекрывающиеся полосы поглощения соединений, входящих в состав спинномозговой жидкости. Выявить изменения состава спинномозговой жидкости в зависимости от вида и тяжести заболевания на основе спектральных данных. Определить оптимальные условия при экспозиции препарата «Эссенциале Н» с клетками крови методом УФ абсорбционной спектроскопии. Методы исследования. Основным методом исследования являлась УФ абсорбционная спектроскопия. Дополнительно использовался хемилюминес-центный метод. Объекты исследования. Спинномозговая жидкость человека, надоса-дочная жидкость крови человека, лекарственный препарат «Эссенциале Н». Научная новизна. Впервые использована методика исследования слабоструктурированных УФ спектров поглощения спинномозговой жидкости, позволяющая выявлять характерные полосы, связанные с патологией. Впервые изучено изменение УФ спектров поглощения спинномозговой жидкости в зависимости от клинических проявлений различных нейрохирургических заболеваний. Проведено сопоставление спектров поглощения с клиническими проявлениями заболеваний. Впервые использован метод УФ абсорбционной спектроскопии для определения времени экспозиции лекарственного препарата «Эссенциале Н» с клетками крови. Практическая значимость. Предложенная методика, основанная на измерениях УФ спектров поглощения, с последующими обработками на спектрально-вычислительном комплексе, позволяет выявлять изменения в составе спинномозговой жидкости при нейрохирургических заболеваниях. Высокая чувствительность методики даёт возможность использовать её для регистрации малых повреждений центральной нервной системы. Это позволяет более детально оценивать и интерпретировать состояния качественных свойств спинномозговой жидкости у нейрохирургических больных. Результаты исследований могут быть использованы для решения задач направленного транспорта лекарственных препаратов и повышения эффективности лечения. В частности, данная методика позволяет качественно и количественно определять содержание лекарственных препаратов в биологических жидкостях, даже если концентрации препарата ничтожно малы. Основные защищаемые положения. В спектрах поглощения спинномозговой жидкости человека обнаружена характерная структура, связанная с электронными переходами в амидной группе белков. Увеличение поглощения спинномозговой жидкости в области 0-0 нм связано с усилением п0—»л* перехода в амидной группе при изменении структуры белка.