Усовершенствование средств и методов диагностики и профилактики туберкулеза крупного рогатого скота

• Автор: Донченко, Николай Александрович
• Шифр специальности: 16.00.03, 16.00.04
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2008
• Место защиты: Новосибирск
• Количество страниц: 329 с. : ил.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Социальноэкономическое значение туберкулеза.

1.2. Культивирование микобактерий на питательных средах

1.3. Молекулярногенетические методы диагностики туберкулеза .

1.4. Химиопрофилактика туберкулеза животных.

1.5. Иммуномодуляторы в животноводстве и ветеринарии

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Материал и методы исследований.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. Эпизоотологическая характеристика туберкулеза крупного

рогатого скота.

2.1.1. Эпизоотическая ситуация в РФ.
2.1.2. Влияние возрастной структуры стада коров на сроки
оздоровления хозяйств от туберкулеза.
2.1.3. Роль ареактивных к туберкулину телят в эпизоотологии
туберкулеза
2.1.4. Снятие ограничений по туберкулезу на фоне неспецифической реактивности крупного рогатого скота
к туберкулину. .
2.1.5. Автоматизированная система эпизоотологического
мониторинга
2.2. Совершенствование методов и средств диагностики
туберкулеза крупного рогатого скота
2.2.1. Разработка плотных экспериментальных питательных сред
для культивирования микобактерий.
2.2.2. Разработка жидкой питательной среды для культивирования
микобактерий
2.2.3. Метод седиментации при обработке биоматериала от животных для бактериологического исследования на туберкулез 6
2.2.4. Электронный журнал учета культур микроорганизмов.
2.2.5. Усовершенствование молекулярногенетического метода исследования ПЦР на туберкулез
2.2.5.1. Модификация методики постановки ПЦР для индикации возбудителя туберкулеза из биоматериала от животных
2.2.5.2. Генетические праймеры для предварительной дифференциации микобактерий туберкулеза от атипичных на основе геномного полиморфизма длин фрагментов рестрикции ампликонов.
2.2.6. Электронный кутиметр для оценки аллергической реакции
при введение туберкулинов.
2.3. Совершенствование методов и средств профилактики туберкулеза крупного рогатого скота.
2.3.1. Туберкулостатический препарат Ниазон в системе оздоровительных мероприятий при туберкулезе крупного рогатого скота.
2.3.1.1. Состав и общая характеристика
2.3.1.2. Токсикологическая характеристика.
2.3.1.3. Фармакокинетика в сыворотке крови .
2.3.1.4. Бактериостатическая активность.
2.3.1.5. Аллергизирующие свойства, влияние на аллергическую реактивность, образование Ьформ и ультраструктуру микобактерий туберкулеза
2.3.1.6. Средство снижения токсичности противотуберкулезных препаратов ГИНК.
2.3.1.7. Производственное испытание ниазона в системе оздоровительных мероприятий при туберкулезе крупного рогатого
скота.
2.3.2. Повышение протективных свойств вакцины БЦЖ с помощью
иммуномодуляторов
2.3.2.1. Иммуномоделирующие препараты РНК
2.3.2.2. Производственное испытание сочетанного применения вакцины БЦЖ и РНКиммуномодуляторов при туберкулезе молодняка крупного рогатого скота.
2.4. Экономическая оценка системы противотуберкулезных мероприятий
2.4.1. Экономический ущерб, причиняемый туберкулезом 0
2.4.2. Затраты на оздоровительные мероприятия
2.4.3. Экономическая эффективность оздоровительных
мероприятий
3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ
4. ВЫВОДЫ
5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
6. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ.
7. ПРИЛОЖЕНИЯ 6

ВВЕДЕНИЕ


Таким образом, исходя из анализа научной литературы, социальноэкономическое значение туберкулеза трудно переоценить. Огромным социальным потерям общества от этой инфекции, сопровождающимся преждевременной гибелью населения и потерей их трудоспособности, сопутствует и большой экономический урон в животноводстве. Основы бактериологической диагностики туберкулеза разработаны еще в е годы прошлого столетия в медицине. В дальнейшем эти методы стали широко использовать в ветеринарной бактериологической практике. Микобактерии туберкулеза аэробы, но могут развиваться и в относительно анаэробных условиях микроаэрофилы. Размножение происходит очень медленно период генерации составляет часов типичные бактерии делятся каждые мин. Возбудитель туберкулеза принадлежит к
числу наиболее вяло реплицирующихся микобактерий. Большинство сапрофитов растет быстрее, но их рост заметно отстает от роста других прокариот и хорошо заметен через дней. Выделение микобактерий из патологического материала связано с определенными трудностями в силу биологических и таксономических особенностей возбудителя туберкулеза. Одной из причин замедленного размножения микобактерий является их выраженная гидрофобность, связанная с высоким содержанием липидов в клеточной стенке Р. В. Тузова, Т. В. Коронелли, Т. В. Калюжная, . Микобактерии туберкулезного комплекса являются внутриклеточными патогенами, способными также к сапрофитному типу питания и развития А. Н. Маянский, . Культуральный метод исследования является весьма надежным и достоверным, позволяющим решать широкий круг вопросов бактериологии туберкулеза. С использованием этого метода представляется возможным не только получить чистую культуру микобактерий, но и провести их идентификацию, определить вирулентность, биологические и биохимические свойства Н. М. Макаревич с соавт. Л.П. Бараускене, А. Н. Маянский, Н. В.Г. Ощспков, . Чувствительность культурального позволяет получить положительный результат при наличии в 1 мл материала даже 0 микобактерий М. К. Вилькер, О. Н. Бронштейн с соавт. Р.О. Драбкина, А. З. Смолянская, И. И. Румачик, В. И. Голышевская, . Впервые чистая культура микобактерий получена Р. Кохом в г. С бычьей сыворотке крови. Через дней после посева патологического материала Кох наблюдал под лупой на поверхности среды маленькие полупрозрачные колонии Р. О. Драбкина, . Однако этот метод не сразу нашел признание, гак как на этой питательной среде, наряду с микобактериями туберкулеза, бурно росла посторон
няя банальная микрофлора, заглушающая рост медленнорастущих туберкулезных колоний i. В г. Эдмон Нокар и Эмиль Ру впервые обнаружили у микобактерий туберкулеза, впоследствии оказавшееся весьма важным явление глицеринофильности vi. Глицерин оказался лучшим источником углерода для микобактерий, а аммонийные соединения и аспарагин источником азота Н. Д. Иерусалимский, , П. И. Притулин, Ф. К. Черкес, . Добавление этих ингредиентов к простым питательным средам мясопептонному бульону, агару или сыворотке крови делает их исключительно благоприятными для роста микобактерий. Для культивирования микобактерий используют, исходя из физической консистенции, плотные, жидкие и полужидкие питательные среды но композиционному составу синтетические и полусинтетические. В.А. По другой классификации, все среды, используемые в настоящее время, можно разделить на три основных типа яичные Огавы, Левенштейна
Иенсена, Гельберга и др. Миддлеброка . Сотона, 1. Для бактериологической диагностики туберкулеза в медицинской и ветеринарной бактериологической практике наиболее часто используют плотные яичные питательные среды, обладающие высокими диагностическими показателями П. С. Кульговеня, Г. К. Ковалев, Г. К. Ковалев с соавт. Э.Р. Финн, Е. А. Финкель с соавт. М. , , . Яичные среды отличаются сложным композиционным составом, неоднородностью и различным соотношением белка и желтка куриных яиц. Так, среды И. С. Виноградова и i в своем составе содержат белок и желток, среды ЛевенштейнаЙенсена и Гельберга помимо цельных яиц содержат некоторые количество желтка. По мнению Л.