Усовершенствование лабораторной диагностики энтерококковой инфекции птиц

• Автор: Иващук, Марина Александровна
• Шифр специальности: 16.00.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2006
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 140 с. : ил.

Введение

1. Обзор литературы.

1.1. Общая характеристика энтерококков.

1.2. Факторы вирулентности энтерококков

1.3. Антибиотикорезистентность энтерококков

1 АМикрофлора пищеварительного тракта животных.

1.5. Лабораторная диагностика энтерококковой инфекции

2. Собственные исследования .

2.1. Материалы и методы исследования.

2.2. Результаты собственных исследований

2.2.1. Эпизоотическая ситуация в России по стрептококковой инфекции птиц.

2.2.1.1. Эпизоотическая ситуация в России по бактериальным
болезням птиц
2.2.1.2. Объемы исследований на стрептококкоз, проведенных лабораториями РФ с г. по г. по видам продуктивных животных
2.2.1.3. Распространенность стрептококкоза в популяциях птиц и
других продуктивных животных в среднем за гг
2.2.1.4. Оценка эпизоотической ситуации по стрептококковой инфекции
птиц за г. на уровне субъектов РФ.
2.2.2. Сравнительная оценка ростовых свойств двух коммерческих
плотных питательных сред для выделения энтерококков
2.2.2.1. Скорость раста энтерококков на испытуемых питательных
средах.
22. Сохранение стабильности биологических свойств энтерококков
при культивировании на испытуемых питательных средах
Ф 2.2.2.З. Сравнение чувствительности испытуемых питательных сред.
2.2.2. Выход бактериальных клеток на 1 мл испытуемой питательной
среды .
2.2.2.5. Ингибирующее действие испытуемых питательных сред на
рост гетсрологичных видов микроорганизмов
2.2.3. Мониторинговые исследования по выделению энтерококков
из патологического материала от птиц
2.2.3.1. Характеристика выборки
2.2.3.2. Алгоритм бактериологического исследования.
2.2.3.3. Распространенность энгерококкоза в популяциях
промышленной птицы
2.2.3.4. Характеристика ассоциаций в случае смешанной инфекции
2.2.4. Изучение антибиотикочувствительности энтерококков
иэшерихий
2.2.5. Исследование помета птиц
2.2.5.1. Высеваемость энтерококков из содержимого кишечника птиц.
2.2.5.2. Количественное исследование помета птиц.
2.2.5.3. Изучение тина взаимоотношений между бактериями рода
и эшерихиями
II 2.2.5.3.1. Наблюдение за микрофлорой кишечника птиц в динамике
2.2.5.3.2. Изучение антагонистического действия . i на бактерии
рода i vi
2.2.5.3.3. Изучение антагонистического действия бактерий рода
ч на . i i vi.
2.2.6. Изучение патогенных свойств культур энтерококков, выделенных
из патологического материала от птиц.
2.2.6.1. Изучение патогенности энтерококков на белых линейных
мышах.
2.2.6.2. Изучение патогенности на куриных эмбрионах
Ф 3. Обсуждение результатов 4
Выводы
Список литературы


Разработаны Методические указания по лабораторной диагностике энтерококковой инфекции у птиц, которые могут быть использованы в работе врачамибактериологами лабораторий птицефабрик и бактериологических отделов ветеринарных лабораторий. Апробация работы. Публикации. Материалы диссертации отражены в пяти опубликованных печатных работах. Таксономия. Энтерококки, согласно Определителю бактерий Берджи , относятся к группе грамположительных факультативных анаэробных кокков. Впервые энтерококки были описаны ii и в году. Раньше энтерококки систематизировали как стрептококки группы по i, но с года они были выделены в отдельный род i i . Поводом для выделения стало открытие уникального группового антигена глицеринтейховой кислоты, содержащей аланин и глюкозу. В то время только два вида входили в этот род . Е. i. В дальнейшем в него были включены и некоторые другие стрептококки . Согласно обзору литературы Билимовой С. И. , в настоящее время род включает более видов , М. М., i , , , i , Таблица 1. Морфология. Энтерококки представляют собой клетки сферической или овальной формы диаметром 0,,0 х 0,,5 мкм. Это грамиоложительные бактерии, иногда подвижные за счет немногих жгутиков, четкие капсулы отсутствуют. В жидкой питательной среде энтерококки формируют корогкие цепочки либо располагаются попарно Определитель бактерий Берджи, . Энтерококки факультативные анаэробы, лучше растущие в анаэробных условиях Шуляк Б. Ф., . Однако эти микроорганизмы являются аэротолерантными, что связано с продукцией псевдокаталазных ферментов М. Р., ivii . А., Е. НАДФпероксидаза, пользуясь водой, как акцептором электронов, обеспечивает защиту бактерии от стресса, связанного с накоплением перекиси водорода. НАДФоксидаза катализирует восстановление кислорода в воду и служит акцептором электронов в аэробных процессах метаболизма , . Перечень видов, включенных в род . Vx . Е. сесогит ii . Е. i . V . Энтерококки являются мезофилами, растут в широком диапазоне температур от С до С оптимальная температура С. Одна из важных
особенностей энтерококков состоит в их способности к росту на средах с от 4,6 до 9,6, в присутствии 6,5 и желчи. Отличительные признаки энтерококков от родственных родов. Согласно обзору литературы Билимовой С. И. , энтерококки отличаются от родствешгых родов совокупностью признаков, включающих биохимические, серологические и культурологические особенности , i , , Таблица 2. Факультативно анаэробные, каталазоотрицательные, грамположительные кокки. Пояснения V ванкомицин пирролидонилариламилаза лейцинаминопептидаза аргинин положительная реакция отрицательная реакция вариабельная реакция чувствительность резистентность. Примечание 1 . Однако, несмотря на кажущуюся простоту этого этапа идентификации, возможны ошибки, возникающие при использовании теста с ванкомицином, в котором энтерококки рассматриваются как ванкомицинчувствитсльные микроорганизмы, в то время как наибольшую опасность представляют именно ванкомици1фезистентные штаммы , . Для быстрой идентификации ванкомицинрсзистентных энтерококков применяется метод, разработанный . С., , ii . Этот метод основан на использовании теста на гидролиз эскулина и толерантность к желчи, а также тест на устойчивость к ванкомицину в концентрации мкгмл, что позволяет дифференцировать высокорезистентные фенотипы энтерококков от фенотипа с низким уровнем резистентности к антибиотику. На практике чаще всего основной задачей является дифференциация энтерококков от стрептококков, а не от других представителей грамположитсльных факультативных анаэробных кокков. В настоящее время существует множество селективных сред для выделения энтерококков. В качестве селективных компонентов могут быть использованы азид натрия, теллурит, желчь, неомицин, твин, таурохолят, селенит натрия, хлористый натрий, этиловый спирт, фенилэтил и таллий Шуляк Б. Ф., . Би охими чески е свой ства. Энтерококки имеют целый ряд физиологических и биохимических особенностей. Так, по типу питания они характеризуются как хемоорганотрофы с метаболизмом бродильного типа. В процессе жизнедеятельности сбраживают разнообразные углеводороды с образованием в основном молочной кислоты, но не газа, снижая до 4,,6.