Усовершенствование методов идентификации вируса бешенства и выявления антирабических антител

• Автор: Тимиргалеев, Руслан Владимирович
• Шифр специальности: 16.00.03, 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2006
• Место защиты: Казань
• Количество страниц: 127 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. И

1.1. Характеристика вирусов группы бешенства

1.2. Методы лабораторной диагностики бешенства

1.2.1. Методы обнаружения антигена возбудителя бешенства и специфических к нему антител

1.2.2. Методы выделения вируса бешенства.

1.2.3. Идентификация штаммов вируса бешенства с помощью моноклональных антител.

1.2.4. Методы обнаружения генома возбудителя бешенства.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Материалы и методы исследований.

2.1.1. Материалы исследований.
2.1.2. Методы исследований.
3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Разработка диагностических препаратов для выявления и идентификации вируса бешенства на основе моноклональных антител МКА
3.1.1. Получение очищенного и концентрированного вакцинного вируса бешенства и его основных структурных белков.
3.1.2. Изыскание оптимальной схемы гипериммунизации белых мышей линии ВАЬВс антигеном возбудителя бешенства
3.1.3. Получение гибридом, продуцирующих МКА к структурным белкам возбудителя бешенства и изучение их свойств
3.1.4. Идентификация полевых штаммов возбудителя бешенства с помощью МКА к глико и нуклеопротеинам ра
бического вируса.
3.2. Применение гликопротеина вируса бешенства для выявления антирабических антител методом ИФА.
4. Обсуждение результатов собственных исследований
ВЫВОДЫ.
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ


Моноклональные антитела к глико и нуклеопротеинам вируса бешенства рекомендуется использовать для идентификации возбудителя бешенства в патологическом материале. Выделенные структурные белки вируса бешенства глико и нуклеопротеины могут быть применены в качестве антигенов для получения высокоспецифичных сывороток при создании более совершенных серологических тестсистем для диагностики и контроля вакцинопрофилактики бешенства. На основании проведенных исследований разработаны и утверждены директором ФГУ ФЦТРБВНИВИ 2 инструкции и 1 наставление по применению. Апробация работы. Ежегодных отчетных научных сессиях ФГНУ ВНИВИ ФГУ ФЦТРБ по итогам НИР за гг. Международной научнопрактической конференции, посвященной летию создания ВНИИВВиМ Ветеринарные и медицинские аспекты зооантропонозов Покров, Международной научнопрактической конференции, посвященной летию факультета ветеринарной медицины УГСА Актуальные проблемы ветеринарной медицины Ульяновск, Всероссийской научнопрактическй конференции посвященной летию ВНИВИ Казань, Международном симпозиуме Научные основы обеспечения защиты животных от экотоксикантов, радионуклидов и возбудителей опасных инфекционных заболеваний Казань, Всероссийской научнопрактической конференции Перспективы агропромышленного производства регионов России в условиях реализации приоритетного национального проекта Развитие АПК Уфа, . Публикация результатов исследований. По теме диссертации опубликовано 7 научных работ. Получение очищенного и концентрированного вируса бешенства и его основных структурных белков глико и нуклеопротеинов. Оптимальная схема гипериммунизации белых мышей линии антигеном вируса бешенства. Идентификация эпизоотических изолятов вируса бешенства методами иммунофлуоресценции и иммуноферментного анализа на основе антинуклеои антигликопротеиновых МКА. Применение гликопротеина рабического вируса для определения специфических антител в сыворотках крови животных, вакцинированных против бешенства, методом ИФА. Объем и структура диссертационной работы. Диссертация изложена на 4 страницах и включает введение, обзор литературы, материалы и методы исследований, результаты собственных исследований и их обсуждение, выводы, практические предложения, список использованной литературы всего 9 источников, в том числе 3 иностранных и 3 ссылки на сайты т1ете1 и приложения. Диссертация иллюстрирована таблицами и 5 рисунками. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 1 Характеристика вирусов группы бешенства В соответствии с классификацией Международного Комитета по таксономии вирусов, возбудитель бешенства РНКсодержащий вирус, относится к семейству vii, порядка vi. Семейство vii объединяет вирусы, выделенные от позвоночных, беспозвоночных и растений, состоит из пяти родов Vivi, vi, vi, vi, vi Vi x, 7, i . К рабдовирусам позвоночных относятся роды и Vivi. Род vi включает вирус бешенства и подобные вирусу бешенства лиссаподобные вирусы, которые характеризуются как общностью основных свойств генома вириона, так и способностью вызывать энцефалит у позвоночных животных. Кроме того, у всех видов рода vi обнаружен общий групповой нуклеокапсидный антиген, который ответственен за продуцирование комплементсвязывающих, преципитирующих антител Шубладзе А. К. и соавт. Павловский В. В. и соавт. Вагапов . . и соавт. ВанагК. А. и соавт. Черкасский Б. Л.,. Установлен генетический полиморфизм гена нуклеопротеина вируса бешенства ii В. Вирионы рабдовирусов имеют пуле или бацилловидную форму, спиральный нуклеокапсид, окруженный белковолипидной оболочкой, с поверхностными выступами. На наружной поверхности вирусной частицы имеются выступы в виде шипов длиной нм, которые прикреплены к двухслойной липидной оболочке Каплан М. М. и соавт, , . При электрофорезе в полиакриламидном геле, содержащем додецилсульфат натрия, в составе вириона выявлены 4 мажорных и I минорный белковые компоненты с общей молекулярной массой 00 кД , , i В, .