Совершенствование ретроспективной диагностики токсоплазмоза кошек и собак

• Автор: Воробьева, Марина Николаевна
• Шифр специальности: 16.00.03, 03.00.19
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Казань
• Количество страниц: 135 с.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. ТОКСОПЛАЗМОЗ КОШЕК И СОБАК

1.1.1. Характеристика возбудителя

1.1.2. Патогенез заболевания

1.1.3. Эпизоотология токсоплазмоза

1.1.4. Эпидемиология токсоплазмоза

1.1.5. Клинические признаки болезни и патологоанатомические изменения у кошек и собак

1.1.6. Иммунитет при токсоплазмозе

1.2. Лабораторная диагностика токсоплазмоза.

1.2.1. Микроскопические исследования
1.2.2. Копрологические исследования
1.2.3. Выделение и культивирование токсоплазм
1.2.4. Индикация и идентификация антигенов токсоплазм
1.2.5. Генодиагностика токсоплазмоза
1.2.6. Аллергическая диагностика токсоплазмоза
1.2.7. Выявление противотоксоплазменных антител
1.3. Лечение и профилактика токсоплазмоза.
СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. ЭПИЗООТОЛОГИЧЕСКОЕ ОБСЛЕДОВАНИЕ
2.2. Опытные животные, сыворотки и патологический материал
2.3. Индикация возбудителя в клиническом материале
2.4. Серологические реакции.
2.5. Культуры токсоплазм
2.6. Получение токсоилазменного антигена для ИФА
2.7. Электрофоретический анализ полученного антигена
2.8. Иммунизация животных токсоплазменным антигеном.
2.9. Изучение сероконверсии специфических антител у кошек.
2 Полимеразная цепная реакция.
2 Статистическая обработка результатов исследований.
3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. КЛИНИКОЭПИЗООТОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ТОКСОПЛАЗМОЗА КОШЕК И СОБАК
3.2. Разработка иммуноферментной тестсистемы для выявления
ТОКСОПЛАЗМЕННЫХ АНТИТЕЛ.
3.2.1. Подбор метода получения токсоплазменного антигена
3.2.2. Электрофоретические исследования токсоплазменного антигена
3.2.3. Конструирование иммуноферментной тестсистемы для выявления токсоплазменных антител
3.3. Сравнительное изучение эффективности РСК и ИФА для
РЕТРОСПЕКТИВНОЙ ДИАГНОСТИКИ ТОКСОПЛАЗМОЗА У ДОМАШНИХ ПЛОТОЯДНЫХ
3.4. Серологический скрининг домашних плотоядных животных
В ОТПОШЕНИИТОКСОПЛАЗМЕННОЙ ИНВАЗИИ
3.5. Изучение сероконверсии при иммунизации кошек токсоплазменным АНТИГЕНОМ.
3.6. Алгоритм исследования кошек на токсоплазмоз
4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ
5. ВЫВОДЫ
6. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ


Собаки рассматриваются как тупик для токсоплазмоза ооцист они не выделяют и мясо их в пищу, обычно не употребляют. Иными словами, собаки как источник заражения людей токсоплазмами всего лишь домысел 7, , . Но необходимо помнить о том, что собака является не просто домашним животным, для многих собака становится членом семьи и ее болезнь оказывает непосредственное влияние на психику человека. Возбудитель токсоплазмоза x ii условнопатогенный облигатный внутриклеточный паразит из группы цистообразующих кокцидий тип ix, класс , отряд iii, семейство iii, род x ,0. x ii одноклеточный организм, полулунной или дугообразной формы, с одним или двумя заостренными концами. Встречаются паразиты овальной и круглой формы. Ядро овальное или круглое распологается в средней части тела паразита или ближе к концу. x ii хорошо окрашиваются по РомановскомуГимза, при этом ядро приобретает розовую окраску, а цитоплазма голубую различной интенсивности. В гистологических срезах тканей токсоплазмы имеют разнообразную форму округлую, угловатую, полулунную греческое слово x означает арка. При окрашивании препаратов железным гематоксилином возбудитель окрашивается в синеватосерый цвет с более темными хроматиновыми элементами. x ii имеют четырехконтурную оболочку, систему фибрилл, сложную систему митохондрий, коноид. Доказано также наличие лизосом, которые по морфологическому и химическому составу сходны с лизосомами высших животных. Размеры токсоплазм обычно 47 мкм в длину и 24 мкм в ширину, иногда они могут достигать размера мкм. Длина токсоплазм, определяемая в микроскопе, может зависеть, прежде всего, от способа приготовления мазка. Так, в сухих препаратах они больше, чем в приготовленных после влажной фиксации или в гистологических срезах. Кроме того, размеры паразита зависят от штамма. Самым длинным считается штамм , выделенный в США от человека, а самым коротким является штамм СН, выделенный в Норвегии от кур . Наиболее подробно морфология токсоплазм изучена при электронной микроскопии 9, 3, 8. На переднем конце паразита можно различить коноид, состоящий из двух частей наружней круглый полюс и внутренней собственно коноид. Круглый полюс диаметром 0,0,3 мкм, он имеет в центре кратерообразное углубление. Впереди конус свободно вдается в цитоплазму, он имеет высоту 0,20,3 мкм, диаметр 0,20, мкм. Из коноида выходит волокон токсонем. Оболочка паразита имеет толщину мкм и состоит из двух плазматических слоев различной плотности, ядро диаметр 12 мкм расположено в центре, покрыто оболочкой толщиной мкм, в ядре имеется ядрышко диаметром 0,5 мкм. Вблизи центра тела паразита обнаруживается группа митохондрий, которые имеют круглую или овальную форму диаметром 0,0, мкм. В передней части ядра расположен аппарат Гольджи, состоящий из тонких волокон толщиной мкм. В цитоплазме отмечаются особые эндоплазматические сеточки, которые состоят из нитей или тончайших канальцев, а также осмиофильных включения 0. В обычном микроскопе оболочка ядра в сухих мазках незаметна, на препаратах же, окрашенных после влажной фиксации, ядро имеет форму пузырька с ясно заметной оболочкой. Специальных органов движения токсоплазмы не имеют, однако они обладают медленной подвижностью. Движения их скользящего и вращательного типа, особенно при проникновении в клетки хозяина 3. Жгутиков у токсоплазм нет. Структуры, описывающиеся как жгутики, скорее случайные образования из слизи. Считается, что токсоплазмы во время своего филогенетического развития потеряли плефаробласт и жгутиковый аппарат. Относительно способов размножения токсоплазм существует несколько мнений. Большинство авторов склонно считать, что размножаются токсоплазмы путем продольного деления 2. Предполагается возможность шизогонии у токсоплазм. Однако промежуточные стадии шизогонии ни разу не были описаны. Размножение токсоплазм обычно происходит внутриклеточно и довольно интенсивно два или три раза в день, при этом они быстро заполняют протоплазму клеток хозяина.