Селекция бактериофагов и фагоустойчивых аттенуированных штаммов Salmonella Typhimurium для производства лечебно-профилактического препарата против сальмонеллеза кур

• Автор: Дрогалина, Наталья Александровна
• Шифр специальности: 16.00.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2008
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 134 с. : ил.

1. Обзор литературы

1.1 Биологические свойства сальмонелл

1.2 Сальмонеллез кур, эпизоотологические данные

1.3 Клинические признаки и патологоанатомические изменения у

кур при сальмонеллезе

1.4 Бактериофаги, их выделение и биологические свойства

1.5 Взаимодействие фага с бактериальной клеткой

1.6 1 фактическое применение препаратов бактериофагов и критерии

отбора производственных штаммов для их изготовления

1.7 Специфическая профилактика сальмонеллеза птиц

1.8 Заключение по литературному обзору

2. Собственные исследования
2.1 Материалы и методы
2.2 Результаты исследований
2.2.1 Этиологическая структура сальмонеллеза птиц в Российской Федерации
2.2.2 Выделение фагов . ii
2.2.3 Биологические свойства фагов . ii
2.2.3.1 Морфология негативных колоний фагов
. ii
2.2.3.2 Морфология вирионов фагов . ii
2.2.3.3 Определение способности фагов . ii к образованию литичсского фермента
2.2.3.4 Спектр литической активности фагов
2.2.3.5 Адсорбционные свойства фагов . ii
2.2.3.6 Характеристика фагов . ii в цикле одиночного развития
2.2.3.7 Серологические свойства фагов
Стр.
2.2.3.8 Изучение расселения и сроков персистирования бактериофагов в организме лабораторных животных 8
2.2.3.9 Лечебная эффективность бактериофага
. ii на лабораторных животных
2.2.4 Аттенуированные фагоустойчивые штаммы
. ii
2.2.4.1 Изучение расселения и сроков персистирования аттенуированных фагоустойчивых штаммов .ii в орган изме лабораторных живот плх
2.2.5 Испытание эффективности экспериментального сальмофага в лабораторных условиях
3. Обсуждение результатов
4. Выводы
5. Практические предложения
6. Список литературы
Приложение 1
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность


Деление на подвиды имеет определнное эпидемиологическое значение, так как естественным резервуаром сальмонелл I подвида служат теплокровные животные, а для представителей остальных подвидов холоднокровные животные и окружающая среда. Культуральные свойства. Сальмонеллы являются факультативными анаэробами. Большинство сальмонелл хорошо растет на обычных питательных средах, образуя колонии диаметром мм, однако некоторые серовары . Оптимальная температура роста С, среды 7,0 7,2, однако они могут расти и при ниже 7,0 и выше 8,0. Хорошо растут на обычных питательных средах МГ1А, МПБ, средах Эндо, Левина, Плоскирева, висмутсульфитном агаре и др. На мясопептонном бульоне через часа роста при температуре С сальмонеллы образуют равномерное помутнение, а через часа на дне пробирки выпадает небольшой осадок, лепсо разбивающийся при встряхивании в равномерную взвесь. Отдельные штаммы сальмонелл, свежевыделенные из органов павших животных, при росте в бульоне образуют легко разбивающуюся пленку ,. На питательном агаре колонии прозрачные, нежные, голубоватые на среде Эндо розоватые, прозрачные на среде Плоскирева бесцветные, но выглядят более плотными и мутноватыми. На агаре с эозиномметиленовым синим сальмонеллы растут в виде прозрачных колоний, иногда с фиолетовым оттенком. На висмутсульфит агаре почти все сальмонеллы образуют черные колонии с характерным металлическим блеском, при этом наблюдается прокрашивание среды под колонией в черный цвет, исключение составляют . А и некоторые другие серовары, которые па этой среде образуют светлые, нежные зеленоватые колонии. В качестве сред накопления используют селенитовую, магниевую, среды Кауфмана, Мюллера, Киллиана. По данным ВОЗ, наиболее эффективной селективной средой для изоляции и обогащения сальмонелл является среда РаипопортаВассил иади. Сальмонеллы хорошо окрашиваются водными растворами анилиновых красок, по Граму окрашиваются отрицательно. В мазках из культур, выделенных от павших животных, возможно биполярное окрашивание микробов 6,. Ферментативные свойства. В современной системе идентификации сальмонелл среди других представителей семейства i используют ряд биохимических тестов, основанных на метаболических особенностях бактерий ,. Сальмонеллы не ферментируют сахарозу, не разлагают лактозу, адонит, не расщепляют салицин и мочевину, не образуют индола, образуют сероводород, реакция ФогесаПроскауэра отрицательная, реакция с метиловым красным поло
жительная. Глюкозу ферментируют все типы сальмонелл с образованием газа, однако встречаются штаммы . Ферментативные свойства сальмонелл разнообразны не только у представителей отдельных подвидов, но могут варьировать в пределах одного и того же серовара. Такая вариабельность в ферментации отдельных углеводов позволяет выявить в пределах отдельных сероваров стабильные биохимические варианты или биовары . Такая дифференциация по биохимическим признакам целесообразна, прежде всего, в отношении наиболее широко распространенпьix на той или иной территории сероваров сальмонелл, к числу которых, в первую очередь, можно отнести . Для подразделения этого серовара на биовары необходим набор тестов, по которым их удается дифференцировать. Так, известна укороченная схема, позволяющая быстро подразделить . Также существует подразделение сальмонелл на фаговары. Оно основано на одном из самых важных свойств бактериофагов специфичности по отношению к микробухозяину. Сальмонелла в окружающей среде. Сальмонеллы способны длительно сохраняться во внешней среде, при этом при соответствующей температуре, и влажности они могут не только в ней переживать, но и размножаться. Так, в воде открытых пресных водоемов микроорганизмы выживают до 0 дней, в морской воде до месяца, в водопроводной и сточной воде месяцы. В пищевых продуктах возбудители сальмонеллеза живут и размножаются в течение длительного времени в частности, в мясе и колбасе от 2 до 6 мес и более, в молоке, молочных продуктах, сливочном масле 1, мес, в яйцах, сырах год и более, в помете и фекалиях месяцы и годы .