Результаты изучения генотипического разнообразия вируса лейкоза крупного рогатого скота и особенности эпизоотологического и гематологического проявления лейкоза

• Автор: Дробот, Елена Викторовна
• Шифр специальности: 16.00.03, 03.00.23
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Новосибирск
• Количество страниц: 110 с. : ил.

Содержание
ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Распространение вирусного лейкоза крупного рогатого скота в Российской Федерации и за рубежом.

1.2.Характеристика вируса лейкоза крупного рогатого скота.

1.3. Диагностика вируса лейкоза крупного рогатого скота.

1.4. Генотипическое разнообразие вируса лейкоза крупного рогатого скота.

1.6. Заключение по обзору литературы.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материалы и методы исследования.

2.2. Результаты исследований.

2.2.1. Формирование выборок для молекулярногенетического
анализа.
2.2.2. Выделение ДНК из биологических жидкостей в скрининговом формате и возможность ее использования для постановки полимеразной
цепной реакции
2.2.2.1. Выделение ДНК из крови животных в скрининговом
формате.
. Оптимизация условий выделения ДНК из сыворотки
2.2.2.З. Выделение ДНК из молока коров.
2.2.3. Влияние условий хранения ДНК на ее качество.
2.2.4. Генотипическое разнообразие популяции вируса лейкоза крупного рогатого скота на территории Новосибирской области.
2.2.4.1. Генотипирование ВЖРС по гену v
2.2.4.2. Изучение полиморфизма гена x
2.2.5. Эпизоотологический мониторинг по лейкозу крупного рогатого скота в Новосибирской области с учетом генотипирования ВЖРС
2.2.6. Характеристика гематологических показателей ужвотных инфицированных разными генотипами ВЖРС.
3 .ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ
ВЫВОДЫ.
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.
БИБЛИОГРАФИЯ


Если изучение этиологических, патогенетических и биологических аспектов иммунологические, биохимические, цитогенетические вируса лейкоза крупного рогатого скота достаточно подробно представлены в научных трудах, то гетерогенность вируса лейкоза крупного рогатого скота и его возможное влияние на эпизоотическое и гематологическое проявление лейкоза изучены недостаточно. Более глубокие научные познания в этой области позволят эффективнее проводить оздоровительную работу. Цель исследований изучить генотипическое разнообразие ВЛКРС в хозяйствах Новосибирской области и оценить его влияние на отдельные гематологические показатели инфицированных животных. Определить генотипическое по генам v и x разнообразие вируса лейкоза крупного рогатого скота, циркулирующего на сельскохозяйственных предприятиях Новосибирской области. Изучить эпизоотическую ситуацию по лейкозу крупного рогатого скота на сельскохозяйственных предприятиях Новосибирской области с учетом генотипирования ВЖРС. Провести сравнительные исследования отдельных показателей крови у крупного рогатого скота, инфицированного ВЛКРС разной генотипической принадлежности. Научная новизна. Изучено генотипическое разнообразие ВЖРС в стадах Новосибирской области с разной степенью инфицированности вирусом лейкоза. Выявлена циркуляция двух известных генотипов ВЖРС по гену v первого и шестого. Выявлена ранее не описанная генотипическая гетерогенность не менее трех генотипов популяции вируса по гену x. Установлен факт циркуляции ВЖРС в популяциях крупного рогатого скота как в моноварианте 6й генотип, так и в биварианте 1й и 6й генотипы, причем с преобладанием в одних случаях шестого, в других первого генотипа. Установлено, что первый генотип по гену ассоциирован с одним из генотипов x, в то время как 6 ой генотип со всеми нами обнаруженными. Экспериментально установлена возможность использования биологических жидкостей крови, сыворотки крови и молока для постановки ПЦР с исследовательской целью в малых количествах не более 0 мкл биологической жидкости. В специальных исследованиях установлено, что ДНК, выделенная в нашей модификации, может храниться как минимум 35 лет время наблюдения в режиме охлаждения С. ВЛКРС. Теоретическая и практическая значимость. Генотипическое разнообразие I и результаты сравнительного исследования, в контексте их эпизоотической значимости в неблагополучных по лейкозу стадах, открывают новые методические подходы в разработке научнообоснованных схем оздоровления неблагополучных по лейкозу стад. Установление принадлежности I к определенному генотипу может служить основанием для расширения исследований в данном направлении, в проведении исследований в выявлении патогенетических особенностей развития лейкозного процесса как в экспериментальном, так и в спонтанном вариантах. Апробация работы. Новосибирск, , Международной научнопроизводственной конференции Экологобиологические проблемы повышения продуктивного долголетия животных Екатеринбург, . Публикации результатов исследований. По теме диссертационной работы опубликовано 9 научных работ. Структура и объем диссертации. Диссертационная работа изложена на 7 страницах и состоит из введения, обзора литературы, заключения по обзору литературы, материалов и методов, собственных исследований, обсуждения результатов исследований, выводов, практических предложений, списка использованной литературы и приложения. Работа иллюстрирована таблицами и рисунками. Список использованной литературы включает 0 источников, в том числе 1 зарубежных авторов. Внедрение результатов исследований. Результаты исследований использованы при разработке методической рекомендации Генотипирование ВЛКРС методом полимеразной цепной реакции с последующим анализом полиморфизма длин рестрикционных фрагментов ПДРФ рассмотрены и утверждены на научнометодическом Совете ФГОУ ВПО ИВМ НГАУ протокол 4 от0г. Результаты использования сыворотки крови и молока крупного рогатого скота в ГЦР с исследовательской целью в малых количествах. Генотипическое разнообразие популяции вируса лейкоза крупного рогатого скота в нескольких сельскохозяйственных предприятиях Новосибирской области по генам v и x.