Разработка технологии производства набора реагентов для выявления антител к вирусу трансмиссивного гастроэнтерита свиней иммуноферментным методом

• Автор: Баландина, Марина Владимировна
• Шифр специальности: 16.00.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2006
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 123 с. : ил.

Разработать технологию производства и применения ИФАнабора с определением стабильности его компонентов при хранении. Провести испытание ИФАнабора по выявлению антител к вирусу ТГС в практических условиях с использованием сывороток крови свиней полученных от иммунных и неиммунных животных различных половозрастных групп. Научная новизна работы. Разработан принцип и определены условия адсорбции очищенного вируса ТГС с помощью моноклональных антител в лунках полистироловых микропанелей. На основе иммунохимически охарактеризованных специфических реагентов разработан метод непрямого твердофазного ИФА для выявления антител к вирусу ТГС в биологических жидкостях организма свиней и оптимизированы условия его проведения при исследовании сывороток крови животных взятых в одном разведении. В сравнительных исследованиях показана высокая чувствительность и специфичность разработанного теста и установлена положительная корреляция результатов, полученных с помощью разноплановых методов оценки ВТГС специфического гуморального иммунного ответа. Разработана оптимальная комплектация и технология производства ИФАнабора. Установлена возможность длительного хранения компонентов ИФАнабора и его диагностическая эффективность в лабораторных исследованиях, направленных на выявление антител к вирусу ТГС. Практическая значимость исследований. На основании результатов исследований разработан и внедрен в ветеринарную практику диагностический ИФАнабор ТГССЕРОТЕСТ, который целесообразно использовать при проведении массовых скрининговых исследований свинопоголовья для эпизоотологического мониторинга коронавирусной инфекции и контроля эффективности вакцинных препаратов. Кроме того, данный набор может служить дополнительным средством ретроспективной диагностики трансмиссивного гастроэнтерита свиней. На изготовление и применение ИФАнабора ТГССЕРОТЕСТ разработана нормативнотехническая документация, утвержденная в установленном порядке. Основные положения, выносимые на защиту. ИФА в экспериментальных и практических условиях. Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены на Международной научной конференции Актуальные проблемы патологии животных, посвященной летию ФГУ ВНИИЗЖ г. Владимир, 1м Всероссийском совещании директоров ветеринарных лабораторий субъектов Российской Федерации г. Брянск, научнопроиз
водственных совещаниях сотрудников ЗАО НПО НАРВАК г. Публикации. По материалам диссертации опубликовано три научные работы. Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 1 стр. Материалы диссертации иллюстрированы таблицами и рисунками. Список литературы включает 3 источника отечественных и 4 зарубежных авторов. ТГС высококонтагиозная вирусная болезнь, характеризующаяся катаральногеморрагическим гастроэнтеритом, рвотой, тяжелой диареей и высокой летальностью 0 среди поросят до 2недельного возраста. Несмотря на то, что свиньи всех возрастных групп чувствительны к этому вирусу, гибель поросят старше 5недельного возраста обычно невысокая Собко А. И., Краснобаев Е. А., . ТГС впервые был описан американскими исследователями в г. Сюрин В. Н. и др. В дальнейшем ТГС был широко распространен во многих странах мира с развитым свиноводством. Частота вспышек заболевания возрастала в крупных свиноводческих хозяйствах Притулин П. И., Ястребов , , i , . В нашей стране ТГС впервые зарегистрирован в свиноводческих хозяйствах Ленинградской области в г. Притулин П. И., . Возбудителем болезни является РНКсодержащий вирус, относящийся к роду vi семейства vii порядок ivi. Вирус ТГС, вместе с вирусом эпизоотической диареи свиней, коронавирусами человека, собак и кошек вирус инфекционного перитонита кошек входят в антигенную группу I i . В настоящее время во многих странах Восточной Европы почти во всех исследованных свиноводческих хозяйствах выявлены серопозитивные животные. Это связано с появлением и широким распространением в х годах прошлого века природно аттенуированного, респираторного варианта вируса ТГС РКВС, который появился, вероятно, в г. Европы, но также на государства Северной Америки и Азии М.