Разработка средств диагностики бруцеллеза собак, вызываемого brucella canis

• Автор: Михайлова, Юлия Павловна
• Шифр специальности: 16.00.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2000
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 228 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Характеристика возбудителя бруцеллеза собак.

1.1.1. Морфология и тинкториальные свойства В. i.

1. .2. Культуральные и биохимические свойства В. i.

1.1.3. Чувствительность В. i к анилиновым красителям, антибиотикам и действию фагов.

1.1.4. Нуклеотидный состав В. i.

1.1.5. Антигенное строение В. i

1.1.6Питательные среды, применяемые для выделения, культивирования и хранения В. i.

1.2. Характеристика заболевания.

1.2.1. Общие сведения о бруцеллезе собак, вызываемом, бруцелдой вида i.
1.2.2. Восприимчивость к В. i собак разных пород, животных других видов и лабораторных животных.
1.2.3. Восприимчивость человека к В. i.
1.2.4. Источник инфекции и пути передачи возбудителя.
1.2.5. Клиническая картина и патологоанатомические изменения.
1.2.6. Иммунитет при бруцеллезе собак, вызываемом В. i .
1.2.7. Профилактика бруцеллеза собак, вызываемого В. i.
1.2.8. Лечение.
стр.
1.2.9. Диагностика бруцеллеза собак, вызываемого В. i.
1.2.9.1. Бактериологический метод исследования на бруцеллез собак, вызываемый В, i.
1.2.9.2. Серологические метода диагностики бруцеллеза собак, вызываемого В. i.
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Материалы и методы исследований.
2.2. Результат исследований.
2.2.1. Тинкториалыше, морфологические, культуральные, биохимические и агглютинабельные свойства культур бруцелл, выделенных
от собак в различных регионах Российской Федерации.
2.2.2. Белковые профили ДСНлизатов штаммов бруцелл, полученные в полиакриламидном гельэлектрофорезс ПААГЭ.
2.2.3. Результаты изучения антигенной структуры штаммов бруцелл в иммуноблоте.
2.2.4. Результаты подбора сред для культивирования, поддержания
и хранения штаммов В. i.
2.2.5. Разработка метода получения диагностической гипериммун
ной сыворотки антибруцелла канис.
2.2.6. Разработка антигена для диагностики бруцеллеза собак, вызываемого В. i, в реакции агглютинации РА.
2.2.7. Результаты стандартизации антигенов для РА.
2.2.8. Специфичность антигена для РА.
2.2.9. Разработка антигена для диагностики бруцеллеза собак, вызываемого В. саше, в реакции связывания комплемента РСК и реакции длительного связывания комплемента РДСК. 9
стр.
2.2 Стандартизация антигена для РСК РДСК.
2.2 Специфичность антигена для РСК РДСК.
2.2 Изучение сроков годности антигенов для РА и РСК РДСК.
2.2 Результаты производственных испытаний антигенов для диагностики бруцеллеза собак, вызываемого В. i, в РА и РСК РДСК.
3. ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ
4. ВЫВОДЫ
5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
6. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
7. ПРИЛОЖЕНИЕ 3
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность


В зарубежных публикациях встречаются сообщения о слабом лизисе культуры В. О в разведениях, которые были меньше рабочих ,. По данным литературы, некоторые авторы использовали фаги , 0 и С для идентификации бруцеллезных культур i и vi, а также для дифференциации их от других бруцелл, находящихся в шероховатой форме . Нуклеотидный состав В. Культуры В. ДНК. Процентное содержание гуанинцитозин ГгЦ пар у них составляет моль 3, 0. Антигенное строение В. Этот вывод был сделан им на основании результатов двойной диффузии в геле, где было установлено линии преципитации с антигенами из форм и линий преципитации из форм бруцелл. И.И. Дубровская 6, 7, 8, 9, изучая антигены и форм бруцелл установила, что в структуре штаммов обнаруживалось меньше белковых веществ. Аминокислоты форм в отличии от культур не содержали лизина, оксипролина, тирозина, альфааминомасляной кислоты, метионина, фенилаланина. В полисахаридах форм, в отличие от полисахаридов форм, не было обнаружено галактозы и дезоксигектозы, но был выявлен новый компонент ксилоза. В. i. С помощью различных методик авторы получали 3 антигена клеточной стенки липополисахаридной природы 1, 2 и 3 и 4 внутренних антигена, обозначенных 1, 2, 3 и 4. Природа внутренних антигенов была различной антиген 1 был полисахаридом, 2, 3 и 4 белками. Авторы обнаружили, что 3 являлся специфичным для всех форм бруцелл, в частности для В. В. , 2 присутствовал только у В. У внутренних антигенов не было детерминант, подобных таковым у гетероспецифичных антигенов клеточной стенки, но они
были похожи на внулренние антигены других видов и бруцелл. Подобные данные были опубликованы другими авторами , 6. К настоящему времени у В. ЛПС, два родственных полисахарида нативный гаптен I и В Бполисахарид, а также около белковых или гликопротеиновых антигенов 0. ЛПСантигсны локализуются на поверхности микробной клетки, тогда как большинство белковых антигенов располагаются внутри бруцелл. Жирные кислоты ЛПС идентичны таковым у ЛПС. Сахара, обнаруженные в составе ЛПС, включают в себя глюкозу, маннозу в меньших количествах, чем в ЛПС, 2кетоЗдезоксиоктанат КДО и глюкозамин. Л 1 отличается от ЛПС отсутствием квиновозамина. Внешние белки мембраны были выделены и охарактеризованы в ые годы. У В. Да и к Да. Одна из этих групп к Да была идентифицирована как порил в процесс функционального анализа, другая гручша кДа содержит углеводы. В состав внешних белков мембраны входят также 3 минорных протеиновых группы кДа, кДа и кДа. В. i соотношение протеинов кДа к поринам кДа больше, чем у штаммов форм бруцелл 0. В. i и ii i, мукоидных штаммов i и некоторых серотипов i , 0, 8. Питательные среды, применяемые для выделения, культивирования и хранения В. Неоднозначность оценки различными авторами, морфологических, культуральных и некоторых других свойств В. Так, i и в работе, характеризующей свойства нового вида бруцелл В. Изоляты, полученные из образцов других органов, сохранялись на бруцеллаагаре Лльбими или в лиофилизированном виде. В большинстве случаев для культивирования В. Однако, было замечено, что на агаре Альбими культура дает более обильный рост . Эту среду и стали использовать для выделения и поддержания штаммов. В. i к диссоциации. Предварительные результаты показали два отличных по своим характеристикам типа колонии, которые различались по патогенности и антигенному составу. Наблюдение в проходящем свете колоний, полученных в результате более, чем пассажей в триптозном бульоне, а затем высеянных на глюкозоглицериновый агар, позволило обнаружить преимущественно мукоидные колонии, которые были более зернистыми шероховатыми по сравнению со вторым гладкомукоидным вариантом. В культурах, выделенных на агаре Альбими, тип колоний превалировал и они, как было впоследствии показано, обладали более выраженным антигенными свойствами. При культивировании на бульоне, тип всегда давал тягучий, рыхлый осадок, в то время, как вариант давал рост, характерный для других видов бруцелл. После нескольких пересевов на жидкой питательной среде, варианты частично реверсировали в тип.