Разработка новых методов генодиагностики болезни Марека и определение их роли в системе противоэпизоотических мероприятий

• Автор: Городов, Владимир Сергеевич
• Шифр специальности: 16.00.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2008
• Место защиты: Новосибирск
• Количество страниц: 115 с. : ил.

1. Разработать метод отбора и хранения материала, обеспечивающие его пригодность для генодиагностических исследований, в условиях птицефабрики.
2. Провести подбор праймеров и оптимальных параметров проведения диагностической ГЩР, определить ее чувствительность и специфичность, типировать соответствующие серотипы вируса при помощи ИЦРГ1ДРФ анализа, а также оценить возможность ее использования при контроле качества вакцинации птицы.
3. Разработать количественную ПЦР в режиме реального времени и определить возможность се использования для предварительной оценки качества вакцинных препаратов.
4. Изучить пригодность методов генодиагностики для оценки эффективности специфической профилактики БМ в эпизоотических очагах, с ассоциированным течением инфекций, вызванных адено и герпесвирусами птиц.
Научная новизна. Разработан метод отбора и хранения материала для генодиагностических исследований, адаптированный к полевым условиям.
Разработана диагностическая ПЦР, где в качестве мишени использована последовательность гена ВБМ, позволяющая определить серотип вируса при помощи ПЦРПДРФ анализа показана возможность ее использования при контроле качества вакцинации птицы.
Разработана количественная ПЦР в режиме реального времени и определена возможность се использования для предварительной оценки качества вакцинных препаратов.
В производственных условиях установлено влияние сочетанного течения адено и герпесвирусных инфекций птиц на интенсивность проявления БМ.

Научная новизна подтверждена патентом Российской Федерации.

Теоретическая н практическая значимость работы. Результаты исследований создают перспективы использования ГИДР не только в диагностике БМ, но и в системе мер противоэпизоотических мероприятий при данной болезни. Полученные данные расширяют современные представления о фак

торах, способствующих снижению уровня эффективности вакцинации птиц против БМ.

Материалы диссертации использованы при составлении методических рекомендаций Оценка эффективности качества вакцинации против болезни Марека с использованием методов генодиагностики, утвержденных ученым советом ГНУ ИЭВСиДВ СО Россельхозакадемии, подсекцией Инфекционная патология животных в регионе Сибири и Дальнего Востока, отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии прот. 1 от .
Разработанная система отбора биоматериала для ПЦР исследований может найти широкое применение в практической деятельности.
Апробация работы. Материалы исследований доложены и обсуждены на Международной научной конференции молодых ученых Проблемы мониторинга и генодиагностики инфекционных болезней животных Владимир, VI Сибирской ветеринарной конференции Актуальные проблемы ветеринарной медицины Новосибирск, III Российской конференции с международным участием Проблемы инфекционной патологии в регионах Сибири, Дальнего Востока и Крайнего Севера Новосибирск, 2
Публикация результатов исследований. По теме диссертации опубликованы 8 научных статей, в том числе 1 статья в журнале, рекомендованном ВАК Минобразования РФ Сибирский вестник сельскохозяйственной науки.
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 5 стр. и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, практических предложений, списка литературы, приложений. Диссертация иллюстрирована рисунками и таблицами, список литературы включает 7 источников.
Внедрение результатов исследований. Материалы диссертации использованы при составлении методических рекомендаций Оценка эффективности вакцинации кур против болезни Марека с использованием методов генодиагностики, утвержденных Ученым советом ГНУ ИЭВСиДВ СО Рос
сельхозакадемии и подсекцией Проблемы инфекционной патологии животных в регионе Сибири и Дальнего Востока секции инфекционной патологии отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии протокол 1 от г
Основные положения, выносимые на защиту
Разработка и оценка возможностей использования методов генодиагностики при контроле эффективности специфической профилактики болезни Марека.
Результаты изучения влияния аденовирусного гепатита и инфекционного ларинготрахеита на проявление болезни Марека у птиц, вакцинированной против БМ, в эпизоотических очагах, в том числе при ассоциированном течении болезней.
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
Введение


Провести подбор праймеров и оптимальных параметров проведения диагностической ГЩР, определить ее чувствительность и специфичность, типировать соответствующие серотипы вируса при помощи ИЦРГ1ДРФ анализа, а также оценить возможность ее использования при контроле качества вакцинации птицы. Разработать количественную ПЦР в режиме реального времени и определить возможность се использования для предварительной оценки качества вакцинных препаратов. Изучить пригодность методов генодиагностики для оценки эффективности специфической профилактики БМ в эпизоотических очагах, с ассоциированным течением инфекций, вызванных адено и герпесвирусами птиц. Научная новизна. Разработан метод отбора и хранения материала для генодиагностических исследований, адаптированный к полевым условиям. Разработана диагностическая ПЦР, где в качестве мишени использована последовательность гена ВБМ, позволяющая определить серотип вируса при помощи ПЦРПДРФ анализа показана возможность ее использования при контроле качества вакцинации птицы. Разработана количественная ПЦР в режиме реального времени и определена возможность се использования для предварительной оценки качества вакцинных препаратов. В производственных условиях установлено влияние сочетанного течения адено и герпесвирусных инфекций птиц на интенсивность проявления БМ. Научная новизна подтверждена патентом Российской Федерации. Теоретическая н практическая значимость работы. Результаты исследований создают перспективы использования ГИДР не только в диагностике БМ, но и в системе мер противоэпизоотических мероприятий при данной болезни. БМ. Материалы диссертации использованы при составлении методических рекомендаций Оценка эффективности качества вакцинации против болезни Марека с использованием методов генодиагностики, утвержденных ученым советом ГНУ ИЭВСиДВ СО Россельхозакадемии, подсекцией Инфекционная патология животных в регионе Сибири и Дальнего Востока, отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии прот. Разработанная система отбора биоматериала для ПЦР исследований может найти широкое применение в практической деятельности. Апробация работы. Публикация результатов исследований. По теме диссертации опубликованы 8 научных статей, в том числе 1 статья в журнале, рекомендованном ВАК Минобразования РФ Сибирский вестник сельскохозяйственной науки. Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 5 стр. Диссертация иллюстрирована рисунками и таблицами, список литературы включает 7 источников. Внедрение результатов исследований. Разработка и оценка возможностей использования методов генодиагностики при контроле эффективности специфической профилактики болезни Марека. Результаты изучения влияния аденовирусного гепатита и инфекционного ларинготрахеита на проявление болезни Марека у птиц, вакцинированной против БМ, в эпизоотических очагах, в том числе при ассоциированном течении болезней. Болезнь Марека БМ является самым распространенным лимфопролиферативным заболеванием кур. Ущерб от болезни Марека в РФ, по данным на г, составляет до , от общего количества павших птиц Р. Н. Коровин и Н. Д. Прибыдайло, . Общемировой ущерб от БМ исчисляется биллионами долларов. Невозможно определить точные экономические потери от заболевания, как вследствие затруднительное и диагностики болезни, так и вследствие укрытия точных данных о заболевшей птице на предприятиях, поскольку во многих странах мира БМ не является обязательной для ветеринарной отчетности инфекцией С. Опосредованными факторами ущерба от БМ является развитие состояния иммуносупрссси на фоне, которого происходит увеличение возникновения различных дополнительных патологий, вызванных как инфекционными, так и не инфекционными агентами i , . I , , . В настоящее время БМ является единственным онкологическим заболеванием, подвергающимся успешной вакцинации в промышленных масштабах М. Увеличение вирулентности полевых вирусов, наблюдающееся с начала х годов XX века. Возникает постоянная потребность в разработке новых профилактических препаратов, а также разработке новых комбинаций использования уже существующих вакцин Р. Н. Коровин и Н. Д. Прибыдайло, . Ii , ii , .