Применение реакции иммунофлюоресценции для диагностики ротавирусной диареи новорожденных телят

• Автор: Нди, Кристофер
• Шифр специальности: 16.00.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1984
• Место защиты: Киев
• Количество страниц: 141 c. : ил

1. КЛАССИФИКАЦИЯ РОТАВИРУСОВ

2. ЭПИЗООТОЛОГИЯ РОТАЗИРУСНОЛ ИНФЕКЦИИ

3. БИОЛОГИЯ РОТАВИРУСОВ

4. ПАТОГЕННОСТЬ И АНТИГЕННЫЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ

МЕаДУ РОТАЕИРУСАМИ

5. ИММУНИТЕТ ПРИ РОТАВИРУСЯОЛ ИНФЕКЦИИ

6. ДИАГНОСТИКА РОТАВИРУСНОН ИНФЕКЦИИ

7. ПРИМЕНЕНИЕ ИШУНОФЛШРЕСЦЕНЦИИ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ РОТАВИРУСНОЯ ИНФЕКЦИИ ТЕЛЯТ

ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИИ

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

I. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ

1.1. Приготовление первичнотрипсинизированной
культуры клеток почек эмбрионов коров ПЭК
1.2. Получение сублиний клеток почек эмбрионов коров ПЭК и изучение изменений морфологии клеток в монослое под воздействием различных факторов
1.3. Отработка методики культивирования лабораторного штамма ротавируса А II в монослоях клеточных культур ПЭК и СПЭВ, выращенных на покровных стеклах
1.4. Обнаружение специфического ротавирусного антигена в клеточных культурах ПЭК и СПЭВ на покровных стеклах, инфицированных лабораторным штаммом ротавируса обезьян ЕА II
1.5. Гипериммунизащя коз
1.6. Гипериммунизавдя морских свинок
1.7. Гипериммунизация кроликов
1.8. Прямой метод реакции иммунофлюоресценции
1.9. Непрямой метод реакции иммунофлюоресценции
.Ю. Обнаружение ротавирусного антигена при помощи РИФ в материалах, отобранных от больных и павших с признаком диареи новорожденных телят
1 Приготовление мазков из фекалий в полевых условиях
1 Приготовление мазков из фекалий в лаборатории
1 Приготовление мазков со слизистой прямой кишки больных диареей телят
1 Обнаружение ротавируса в фекалиях больных диареей телят на культурах клеток ПЭК и СПЭВ в РИФ
1 Приготовление мазковотпечатков из слизистой тонкого отдела кишечника павших от диареи новорожденных телят
1 Приготовление гистосрезов стенки тонкого отдела кишечника павших от диареи телят для исследования в РИФ
1 Выяснение возможности титрования ротавируса в суспензии клеток СПЭВ при помощи РИФ
1 Исследование возможности использования РИФ при титровании ротавируса и постановке реакции виру снейтрализации
11. Титрование в РИФ ротавируса А II
12. Постановка реакции нейтрализации на клетках
ПЭК и СПЭВ по ЩД и РИФ
2. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЫЕДОВАНМ
2.1. Приготовление первичнотрипсинизированной культуры почек эмбрионов коровы ПЭК
2.2. Получение сублиний ПЭК я изучение изменений морфологии клеток в монослое под воздействием различных факторов
2.3. Отработка методики культивирования лабораторного штамма ротавируса А II в монослоях клеточных культур ПЭК и СПЭВ
2.4. Обнаружение специфического ротавирусного антигена в клеточных культурах ПЭК и СПЭЗ на покровных стеклах, инфицированных лабораторным штаммом ротавируса обезьян БА II
Результаты исследований в РИФ материалов от больных и павших с диареей новорожденных телят
Исследование возможности использования реакции иммунофлюоресценции при титровании ротавируса и постановке реакции вируснейтрализации
ОБСУЖДЕНИЕ МАТЕРИАЛОВ
Практические предложения
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Некоторые ученые эти вирусы предлагали называть дуовирусами , признавая двуслойный капсид л дуоденальный источник не
которых штаммов вируса у человека. Впервые и сотр. Г i i . США. Но они не были ЯСНО охарактеризованы. Наблюдали внутриядерные включения лишь в одном поколении мышат, а цитоплазматические включения были связаны с заболеванием 5 и обнаруживались только в эпителии тонкого отдела кишечника. Заболевание протекало тяжело и наблюдалось в основном осенью и в начале зимы. Инфекция передавалась путем скармливания фильтрата суспензии содержимого кишечника. Саше ранние исследования ротавирусной инфекции у животных проводили i , ВЫЗЫВЭЯ ДИЭреЮ У ТвЛЯТ При помощи фекальных фильтратов от больного диареей ребенка. В году было доказано, что данный вирус является ротавирусом 5. Было доказано также, что возбудителем эпизоотической
диареи мышат 2 является РНКсодержащий ротавирус 3. Обезьяный вирус АII 4 является ротавирусом, который патогенен для телят и поросятгнотобиотов 6. Современные исследования ротавирусов начались с выделения возбудителя от диарейных телят в США, и затем от детей и телят в Великобритании и Австралии, которыми установлено, что возбудитель ЭТОЙ болезни ОТНОСИТСЯ К ivii С рОДОвым названием ротавирус 9 0. С тех пор, когда моъцз и сотр. Канаде, Австралии, Великобритании, Северной Ирландии, Франции, ФРГ 9, Венгрии 1, Болгарии 2, Индии 0, Финляндии 2, Бельгии 7, Кении 8 и ЮАР 5. Самойлов и соавт. Естественно протекающая ротаЕирусная диарея установлена у мышат, человека, крупного рогатого скота, свиней, лошадей, овец, антилоп, кроликов, оленей 7 и собак . Наряду с этим обнаруживали вирусспецифические к ротавирусу антитела у бурых медведей и морских свинок. Ротавирусная диарея наблюдается в основном у новорожденных и молодых 7, но нередко и у взрослых людей и животных. Экспериментально доказана перекрестная видовая инфекция между ротавирусами детей, крупного рогатого скота и свиней 7. В странах с умеренным климатом
наблюдается ротавирусная диарея в холодное время года, в то время как в тропических и субтропических странах она наблюдается в любое время года 7. Однако к и сотр. По данным ii i. Несмотря на то, что гибель от ротавирусного гастроэнтерита наблюдается редко, эффективная ротавирусная вакцина помогла бы снизить высокую заболеваемость, вызываемую этими вирусами. В развивающихся странах тяжесть диарейных заболеваний весьма ощутима. Недавно было установлено, что в странах Азии, Африки и латинской Америки ежегодно наблюдается 3,5 миллиона случаев диареи, из них около миллионов случаев гибели от диареи, хотя до сих пор не удалось оценить роль ротавирусов при такой высокой заболеваемости и смертности. Выделение ротавирусов от молодых диарейных животных чаще всего удается в период от рождения до отъема, а у детей в течение первых трех лет жизни 7. Данная возрастная группа глубже всего изучена ввиду тяжелого характера и частоты синдрома. Однако инфекция встречается и у взрослых людей и животных 2 0 0. До того, как ротавирусная диарея новорожденных детей была установлена в году, трудно сказать сколько времени существует это заболевание и какими путями оно передавалось детям. Исследованиями ii и сотр. И v . Этиология диареи телят сложная и часто включает несколько инфекционных агентов и ряд факторов, в состав которых входят кормовые, иммунологические и условия окружающей среды. ЕТЕС и ротавирус . Уже доказана роль ротазируса как возбудителя диареи у телят 3 9 0 7, и у других млекопитающих 0. Серологические исследования показали, что антитела против ротавируса очень часто обнаруживаются у животных 2 0 7. Известно, что в этих фекалиях находились ротавирусы 3. В результате ряда опытов разных авторов было установлено, что острый гастроэнтерит у детей вызывается ротавирусами 9 4 4. Диарея новорожденных телят является актуальной и наиболее сложной проблемой при современном промышленном животноводстве. Ротавирус крупного рогатого скота часто обнаруживается в кале поносящих телят, но роль этого вируса продолжает дискуссироваться, поскольку известно, что он может обнаруживаться и у здоровых животных 1 8. Кроме того. КиГЬу и сотр.