Оптимизация условий культивирования вируса чумы мелких жвачных для получения диагностических и вакцинных препаратов

• Автор: Капускин, Егор Вадимович
• Шифр специальности: 16.00.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2008
• Место защиты: Владимир
• Количество страниц: 155 с. : ил.

1.ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Распространенность чумы мелких жвачных

1.2. Характеристика возбудителя чумы мелких жвачных

1.2.1. Таксономическое положение вируса

1.2.2. Морфология вируса.

1.2.3. Белковый состав вириона.

1.2.4. Транскрипция и репликация вируса

1.2.5. Культивирование вируса

1.2.7. Устойчивость вируса.

1.3. Эпизоотические особенности болезни

1.4 Эпизоотическая ситуация но ЧМЖ в мире

1.5. Патогенез.
1.6. Локализации вируса.
1.7. Клинические признаки
1.8 Патологоанатомические изменения.
1.9. Гистологические изменения.
1 Диагностика болезни
1 Иммунитет и специфическая профилактика.
1 Меры борьбы
1 Заключение.
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАН ИЯ
2.1. Материалы.
2.1.1. Вирус.
2.1.2. Животные
2.1.3. Культуры клеток.
2.1.4. Реактивы и растворы.
2.2. Методы исследований.
2.2.1. Культивирование культур клеток.
2.2.2. Культивирование вируса.
2.2.3. Подбор чувствительных культур клеток для культивирования вируса ЧМЖ
2.2.4. Определение биологической активности вирусов.
2.2.5. Определение уровня вируснейтрализующих антигел к
вирусу ЧМЖ
2.2.6. Изготовление живой лиофилизированной вакцины.
2.2.7. Определение стерильности, безвредности и антигенной активности вирусвакцины.
2.2.8. Проведение качественного анализа риска заноса возбудителя ЧМЖ на территорию РФ
2.2.9. Статистическая обработка результатов.
3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Качественный анализ риска заноса ЧМЖ на территорию России
3.1.1. Идентификация опасности
3.1.2. Анализ эпизоотической ситуации.
3.1.3. Плотность распространения восприимчивых к ЧМЖ животных
3.1.4. Приграничная торговля и миграция населения.
3.1.5. Возможные пути заноса ЧМЖ на территорию России
3.2. Идентификации вируса ЧМЖ штамма ВНИИЗЖ
3.3. Усовершенствование условий культивирования вакцинного вируса ЧМЖ штамма ВНИИЗЖ.
3.3.1. Изучение чувствительности различных клеточных систем
к вирусу ЧМЖ
3.3.2. Накопление вируса ЧМЖ в культуре клеток СИ при разной множественности инфицирования
3.3.3. Влияние системы культивирования на репродукцию
вируса.
3.3.4. Влияние посевной концентрации, возраста культуры и плотности монослоя на репродукцию вируса.
3.3.5. Накопление вируса в зависимости от вида питательной
среды
3.3.6. Зависимость репродукции вируса ЧМЖ от вида сывороток
в поддерживающей среде.
3.3.7. Влияние компонентного состава поддерживающей среды
на репродукцию вируса
3.3.8. Влияние способа заражения на репродукцию вируса ЧМЖ .9. Влияние приема замораживанияотгаивания на
биологическую активность вируса
3.3 Влияние среды на репродукцию вируса.
3.4. Изучение иммунобиологических свойств вакцинного вируса ЧМЖ штамма ВНИИЗЖ.
3.4.1. Изучение безвредности и реактогенности вируса ЧМЖ
3.4.2. Изучение антигенных свойств вируса ЧМЖ
3.4.3. Реверсибельность и контагиозность вируса ЧМЖ штамма ВНИИЗЖ.
3.4.4. Стабильность биологических свойств вируса ЧМЖ штамма ВНИИЗЖ при пассировании в культуре клеток СЬ.
3.5. Устойчивость вакцинного вируса ЧМЖ штамма ВНИИЗЖ.
3.5.1. Устойчивость в нативном виде вируса ЧМЖ штамма ВНИИЗЖ при хранении
3.5.2. Устойчивость вируса ЧМЖ штамма ВНИИЗЖ при лиофилизации.
3.5.3. Устойчивость лиофилизированных материалов вируса ЧМЖ штамма ВНИИЗЖ
3.5.4. Устойчивость вируса ЧМЖ штамма ВНИИЗЖ после
восстановления из лиофилизированного состояния
3.6. Технология изготовления вирусвакцины против ЧМЖ культуральной сухой
3.7. Результаты комиссионных испытаний вакцинного вируса ЧМЖ штамма ВНИИЗЖ.
3.8. Концентрирование и очистка вируса ЧМЖ штамма ВНИИЗЖ и получение гипериммунных сывороток.
3.8.1. Концентрирование и очистка вируса ЧМЖ.
3.8.2. Гипериммунизация животных.
4. ОБСУЖДЕНИЕ
5. ВЫВОДЫ
6. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Первоначально ЧМЖ регистрировалась в странах Западной Африки, в последующем ее стали отмечать в Центральной и Восточной Африке, а с года и на Аравийском полуострове. Сейчас это заболевание имеет широкое распространение на африканском континенте и в Азии. Расширению ареала распространения этой инфекции могут способствовать не только социальноэкономические, но и природные факторы. ЧМЖ в РФ не регистрируется. В связи с вышеизложенными обстоятельствами, все это делает целесообразным изучение этой важной экзотической болезни, представляющей угрозу для животноводства РФ, с цслыо иметь возможность, при необходимости, наработать соответствующие диагностические и вакцинные препараты. Целью исследований являлось усовершенствование технологических параметров культивирования вируса чумы мелких жвачных для получения диагностических и вакцинных препаратов. ЧМЖ в мире в гг. Изучена эпизоотическая ситуация по ЧМЖ в мире за период гг. РФ. Изучены иммунобиологические свойства оригинального вируса чумы мелких жвачных штамма ВНИИЗЖ. Исследована чувствительность различных клеточных культур к вирусу ЧМЖ, в результате чего подобрана оптимальная система культивирования. Усовершенствована технология культивирования вируса ЧМЖ, обеспечивающая высокое накопление вируссодержащего материала для изготовления диагностических препаратов и вирусвакцины против чумы мелких жвачных. Получены экспериментальные серии вирусвакцины против чумы мелких жвачных и проведены испытания их иммунобиологических свойств. На основании проведенных экспериментальных исследований разработана технология культивирования вируса ЧМЖ штамма ВНИИЗЖ для производства вакцин против ЧМЖ и изготовления диагностических препаратов. СТО на изготовление вирусвакцины против чумы мелких жвачных культуральной сухой. Результаты исследований по теме диссертации были опубликованы и доложены на Международной научной конференции по проблемам животноводства, ветеринарии и кормопроизводства, мая г. Бишкек, КиргНИИЖВиП на Международной научнопрактической конференции молодых ученых Достижения молодых ученых в ветеринарную практику апреля г. Владимир, и на заседаниях ученого совета ФГУ ВНИИЗЖ в гг. По материалам диссертации опубликовано 5 научных работ, из них две статьи в изданиях, по перечню ВАК. Объем и структура диссертации Диссертация изложена на 5 страницах, иллюстрирована таблицами и рисунками. Список используемой литературы включает 7 источников, из которых 4 иностранных. Диссертационная работа выполнена автором самостоятельно. Отдельные этапы диссертации проводились совместно с к. Щербаковым раздел Идентификация вируса ЧМЖ штамма
ВНИИЗЖ изучение идентичности вируса ЧМЖ штамма ВНИИЗЖ методом полимеразной цепной реакции с д. А.П. Пономаревым раздел Идентификация вируса ЧМЖ штамма ВНИИЗЖ электронномикроскопическое исследование с к. Марковым Г. В. и к. Онищенко Р. М. раздел Устойчивость вируса ЧМЖ штамма ВНИИЗЖ при лиофилизации. Диссертационная работа выполнена в ФГУ Федеральный центр охраны здоровья животных в гг. Чума мелких жвачных ЧМЖ высококонтагиозное, остро или подостро протекающее вирусное заболевание овец и коз, характеризующееся лихорадкой, язвенными поражениями слизистой оболочки ротовой полости, геморрагическим гастроэнтеритом, поражением лимфоидной системы и пневмонией , , , , 0, 9, 5, 8, 0, 9, 9, 6. ЧМЖ наносит большой экономический ущерб овцеводству и козоводству в Центральной Африке, Аравийском полуострове, в странах Ближнего Востока и Азии. Первые упоминания о чуме среди мелких жвачных относятся к XIX веку. В гг. Сенегале, Гвинее и Нигерии, сходной с чумой КРС, вызываемой вирусом чумы КРС , 0, 9. В г. ЧМЖ впервые была описана . А. в КотдИвуаре и первоначально названа блютангом, а затем язвенным стоматитом. В г. Вскоре ЧМЖ обнаружили в Дагоме , . В г. Р. 2 и в г. Р. наблюдали ЧМЖ в Сенегале. В годыгг. ЧМЖ сопровождалась большой смертностью. В эти года болезнь из Сенегала распространилась на территории Мавритании и Гамбии. В г. ЧМЖ была зарегистрирована в Нигерии. В г. Р. подтвердили, что это была ЧМЖ 2, 4, 6, 3. В г.