Конструирование и иммунобиологические свойства экспериментальных вакцин против гриппа птиц

• Автор: Борисов, Алексей Васильевич
• Шифр специальности: 16.00.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2009
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 167 с. : ил.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Распространение гриппа птиц в мире

1.2 Характеристика вируса гриппа птиц

1.2.1 Классификация вируса ГП

1.2.2 Молекулярная структура генома и организация основных белков при репликации вирусов

1.2.3 Химический состав и устойчивость к действию физикохимических факторов

1.3 Источники и пути передачи вируса гриппа птиц

1.4 Клинические признаки и патологоанатомические изменения при гриппе птиц

1.5 Лабораторная диагностика гриппа птпц

1.6 Специфическая профилактика гриппа птиц

1.7 Основные принципы конструирования и контроля эмульсионных противогриппозных вакцин
1.7.1 Культивирование вируса риппа птиц
1.7.2 Инактивация вируса и принципы действия инактивантов
1.7.3 Очистка и концентрирование вируссодержащего сырья
1.7.4 Применение адыоваптов в производстве инактивированных вакцин Механизм действия масляных адъювантов
1.7.5 Подбор адъюванта и физические свойства вакцин на основе масляных адъювантов
1.8 Механизм иммунного ответа у птиц и местные тканевые реакции при использовании эмульсионных вакцин
1.9 Заключение по обзору литературы
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1 Материалы и методы
2.1.1 Материалы
2.1.2 Методы
6










2.2 РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
2.2.1 Подбор штаммов вируса ГП дли изготовления экспериментальных вакцин против гриппа птиц
Изучение некоторых биологических свойств штаммов вируса гриппа птиц типа А подтипов Н5Ю, НЖ2, Н7Ш, Н7Ю и Н9Ы
2.2.2 Выбор метода очистки и инактивации ВГП
2.2.3 Конструирование экспериментальных моновалентных инактивированных эмульсионных вакцин против ГП из штаммов АуткаПриморский Н5М2, АцыиленокУзбекский Н7Ш, АиндюкВисконсин НЧ
Стабильность эмульсии опытных образцов инактивированных вакцин прошв ГП на основе масляного адъюванта Моп1ашс1е А УО. Диспсрсиопношъ вакцинной эмульсии изготовленной на основе масляного адъюванта Могйашбс 1вА УО
Антигенная акгивность и рсактогенные свойства экспериментальных моновалентных образцов вакцин
Кинетика гемагглютинирующей активности антигена вируса ГП при хранении вакцин в условиях повышенных температур
2.2.4 Испытание различных масляных адъювантов для производства экспериментальных вакцин против ГП
Физические свойства вакцин на основе различных масляных адъювантов Изучение реактогенности вакцин, изготовленных на основе различных адъювантов
Дисперсность вакцинных эмульсий, изготовленных на основе различных масляных адъювантов
2.2.5 Математическое моделирование зависимости уровня антитсльного ответа от концентраций антигенов гриппа птиц в вакцине из штаммов АУуткаПрнморский Н5Ш, АцыпленокУзбекскийН7Ш и АиндюкВисконсин НЧ
2.2.6 Комиссионные испытания антигенной и протективной активности опытных образцов моновалентных и полиштаммных инактивированных эмульсионных вакцин против ГП








Оценка иммуногешюсти инактивированной эмульсионной вакцины против вируса гриппа птиц типа Л подтипа Н5Ы2 в остром опыте Антигенная активность полинггаммных инактивированных вакцин против ГП на основе штаммов ЛуткаПриморский,
АцьншенокУзбекский, ЛиядюкВисконсин
Иммуногсшюсть полинггаммных инактивированных вакцин на основе
исследуемых штаммов против высокопатогенного вируса ГП Иммунный ответ вакцинированных цыплят после контрольного
контактного заражения
2.2.7 Выделение вируса гриппа от привитых цыплят после их контрольного заражения
2.2.8 Продолжительность иммунного ответа у птиц, привитых
экспериментальными вакцинами из штаммов АуткаПриморский,
АцыпленокУзбекский, АиндюкВисконсин
3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛ ЕДОВАНИЙ
4. ВЫВОДЫ
5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
6. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЯ 0
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность


Затем заболевание диких водоплавающих и домашних птиц было выявлено в Алтайском крас, Омской, Тюменской, Курганской и Челябинской областях. В конце августа грипп обусловленный подтипом Н5Ж ВГП диагностировали у диких птиц в Калмыкии. В октябре грипп вызвал падеж домашней птицы в частных хозяйствах Тульской и Тамбовской областей, в ноябре декабре зафиксирована массовая гибель лебедей шипунов в нижнем поясе дельты Волги Республика Калмыкия, Астраханская область. Весной года эпизоотия ВПГП охватила И регионов Южного Федерального округа. В это же время о вспышках ВПГП Н5Ж в МЭБ сообщили ряд Европейских и Африканских стран. В феврале эго же года заболевание было зафиксировано в Египте, странах Ближнего Востока, Судане, Нигерии и охранах экваториальной Африки Берег Слоновой Кости, Буркана Фасо, Гана. Кроме того заболевание отмечено в ряде стран Азии Ирак, Джибути, Иран, Афганистан, Пакистан, Индия 3. В летний период года в Европе вспышки ВПГП были зафиксированы в балканских странах, Румынии, Германии, Дании, Украине и Венгрии 6, 7. В России летом года случаи ВПГП отмечены в республике Тыва, в году в январе и аыусте в Краснодарском крас и Ростовской области, Республике Адыгея, Калужской области, а в феврале на рынке живой птицы в Москве. На протяжении всего года продолжалось появление вспышек ВПГП штамма Н в Африке, Азии и Европе. Новая вспышка произошла в Индии, Кувейте и Малайзии. В сентябре сотрудники португальской службы здоровья животных сообщили о вспышке гриппа птиц обусловленной низкопатогенным вирусом НПВГП подтипа Н5Ы2 в стадах охотпичьспромысловых птиц. В том же месяце Служба продовольственной инспекции Канады СР1А официально объявила о выявлении ВПВГП штамма Н7ЫЗ. Численность пораженной популяции стада составила 0 голов. Не уменьшаюлось количество вспышек ВПГП и в году. Так, с начала года были зафиксированы случаи распространения на территории Египта, Германии, Гонконга, Израиля, Индии, Ирана, Китая, Кореи, Нигерии, Пакистана, Саудовской Аравии, Турции, Украины, Вьетнама, Швейцарии. По данным МЭБ начиная с года, по общему числу вспышек явно доминировал азиатский континент. По степени патогенности различают две разновидности вирусов Н5Ы1. Так, популяции высокопатогенных штаммов с1ас1е 1 циркулируют среди птиц в странах Индокитая Вьетнаме, Лаосе, Камбодже и Таиланде. Именно здесь развивались массовые эпизоотии и эпидемические осложнения гриппа птиц. Слабопатогенные штаммы Н5Ы1 с1асе 2 обнаруживались как бы но периферии этой зоны в Китае, Корее, Казахстане, России, Индонезии, Филиппинах. Территориальное распространение основных серотипов вируса гриппа птиц в мире в период с год представлено на рис. На сегодняшний день основными переносчиками вирусов гриппа птиц считаются дикие минирующие утки, которые не болеют даже при заражении высокопатогенными штаммами вируса гриппа птиц. В период мшрации почти у уток удавалось обнаруживать вирусы гриппа птиц 4. Однако в последнее время выделены некоторые штаммы вируса Н5Ы1, которые могут вызывать гибель уток 0. В целом, направление и сроки распространения заболевания совпадают с направлением и сроками осеннего перелета и зимовки перелетных водоплавающих птиц 3, 3, 0. Рис. Поскольку вирус у уток размножается в кишечнике, возбудитель с фекалиями попадает в водоемы, откуда она через домашних водоплавающих птиц может передаваться к домашней птице. Вирусы гриппа птиц удавалось выделять как из фекалий уток, так и из воды, причем вирусы сохраняют инфекционность в фекалиях до дней при 4С и до 7 дней при С. Заболевание может протекать и как скрытая инфекция в виде подострой формы болезни, вызывающей только снижения яйценоскости у кур и индеек, а также как опустошительная эпизоотия, сопровождающаяся высокой смертностью до 0. Вирусы гриппа сохраняются в организме птиц в течение некоторого периода выздоровления, но полностью длительность носительства неизвестна. За последние несколько лет, с момента выхода вируса ВПГП за пределы восточной и юговосточной Азии, были определены нуклеотидные последовательности, и проведен филогенетический анализ последовательностей нескольких сот изолятов вируса3, 5, 2.