Использование иммуноферментного анализа для выявления вируса инфекционного ринотрахеита и антител к нему у крупного рогатого скота

• Автор: Непоклонова, Ирина Владимировна
• Шифр специальности: 16.00.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1984
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 112 c. : ил

1.1. Краткие сведения об инфекционном ринотрахеите . .

1.2. Диагностика инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота .

1.3. Новые методические подходы в лабораторной диагностике инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота.
1.3.1. Использование иммуноферментного анализа для выявления локализации антигенов гистохимический вариант.

1.3.2. Иммуноферментный анализ с использованием твердой фазы

1.3.3. Методы твердофазного иммуноферментного анализа ЕЫБА

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

ГЛАВА П. ПОЛУЧЕНИЕ ИММУНОПЕРОКСИДАЗНЫХ КОНЪЮГАТОВ И ОТРАБОТКА ПОСТАНОВКИ ИММУНОФЕРМЕНТНОГО АНАЛИЗА .

ПЛ. Литературная справка

П.1.1. Ферменты и субстраты, используемые в иммуно

ферментном анализе

П.1.2. Методы получения ишунопероксидазных конъюгатов
П.2. Материалы и методы
П.З. Результаты исследований .
П.3.1. Получение специфической сыворотки. Выделение
гаммаглобулинов
П.3.2. Очистка пероксидазы и получение ишлунопе
роксидазных конъюгатов.
П.3.3. Сравнительное изучение различных субстратов для пероксидазы.
П.3.4. Определение активности, специфичности, чувствительности полученных конъюгатов, отработка БЫ Б а теста для выявления вируса
ИРТ
ГЛАВА Ш. ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ТВЕРДОФАЗНОГО ИММУНОФЕРМЕНТНОГО
АНАЛИЗА ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ ВИРУСА ИРТ И АНТИТЕЛ К НЕМУ
1.1. Литературная справка
1.2. Материалы и методы
1.3. Результаты исследований.
Ш.3.1. Выявление вируса ИРТ иммуноферментным методом при использовании в качестве твердой
фазы культуры клеток.
Ш.3.2. Использование ЕЫЗАтеста для обнаружения вируса ИРТ в материале от экспериментальнозараженных животных и в полевом материале Ш.3.3. Использование метода еыба для определения антител к вирусу ИРТ крупного рогатого скота
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ.
ВЫВОДЫ. .
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРИЛОЖЕНИЯ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


По изучению возможности использования иммуноферментного анализа для обнаружения и идентификации вируса ИРТ крупного рогатого скота и антител к нему в материале от экспериментально зараженных и естественно больных животных. ГЛАВА . I.I. Инфекционный ринотрахеит ИРТ крупного рогатого скота острая контагиозная бояезнь вирусной этиологии, проявляющаяся главным образом поражением респираторного и генитального трактов, иногда центральной нервной системы. В хозяйствах нашей страны болезнь, повидимому, существовала многие десятки лет и проходила под диагнозом пузырьковая сыпь, инфекционный вульвовагинит, острая катаральная пневмония телят, острый катар дыхательных путей рогатого скота и т. Истинная природа болезни была установлена лишь в году I . И др. Калифорния, м. Колорадо 9. В ГОДУ , а также . С года по предложению эта болезнь стала именоваться инфекционным ринотрахеитом пустулезным вульвовагинитом крупного рогатого скота и рассматриваться как разные формы течения одной и той же болезни. У нас в стране ИРТ крупного рогатого скота впервые был диагностирован Крюковым в г. Г.А. Ивановой с соавт. В настоящее время инфекционный ринотрахеит крупного рогатого скота широко распространен в ряде стран США, Канаде, Англии, ФРГ, Италии, Нидерландах, Чехословакии, Польше, Болгарии, Югославии, Франции,
Венгрии, Японии, Иране, СССР и др. Посяе первых сообщений отечественных исследователей о данной инфекции в СССР , в последующие годы и до настоящего времени опубликовано большое число работ 8, 9, , , , , свидетельствующих о широком распространении этого заболевания в различных географических зонах нашей страны. В естественных условиях заражение вирусом инфекционного ринотрахеита происходит при контакте главным образом аэрогенным путем. Инкубационный период и процент заболевших значительно варьируют и составляют 0 6, смертность среди взрослых животных невелика 0 , 4, однако среди молодняка она может достигать . У крупного рогатого скота известны пять форм клинического проявления болезни поражение верхних дыхательных путей, вагиниты, энцефалиты, коньюктивиты и артриты . Кроме того у телят в откормочных хозяйствах можно наблюдать пневмонию, особенно при наличии стрессовых воздействий 4. При хронической серозногнойной пневмонии погибает до телят . Генитальная форма характеризуется поражением половых органов, у коров развивается эндометрит, у быков баланопостит, что может стать причиной бесплодия. Аборты и гибель плода в утробе матери отмечаются через 3 недели после заражения, что совпадает с повышением титра специфических антител в крови матери. Повидимому, с этим свойством вируса связана его длительная персистенция в тканях и склонность инфекции к латентному течению . У животных, больных ИРТ чаще выражен респираторный синдром,в то время как генитальная форма протекает незаметно . Респираторная форма инфекции обычно характеризуется внезапным повышением температуры тела до , гиперемией слизистой оболочки носа, носоглотки и трахеи, угнетением, сухим болезненным кашлем, обильным серознослизистым истечением из носа ринитом . По мере развития болезни слизь становится густой, в дыхательных путях образуются пробки и очаги некроза. При тяжелом течении болезни отмечаются признаки асфиксии . У молодняка иногда диагностируют энцефалиты , 3, 8, у более взрослых животных они регистрируются исключительно редко. У молодняка в этих случаях болезнь начинается внезапным возбуждением, признаками буйства и агрессии, нарушением координации двинений, однако температура тела при этом остается нормальной 7. При вскрытии животных, убитых в период клинического проявления болезни обычно отмечают цианоз и гиперемию слизистой оболочки носовых раковин, скопление гнойного экссудата в виде тяжей в носовых ходах. Конъюнктива гиперемирована, отечна, частично покрыта саловидным налетом и мелкой сыпью сероватого цвета , , , 7. На слизистой гортани видны точечные кровоизлияния на слизистой трахеи те же изменения и пенистая жидкость. Легкие увеличены в объеме, в верхушечных долях небольшие участки ателектазов.