Изыскание и сравнительная оценка экспрессных методов бактериологической диагностики туберкулеза

• Автор: Жмуров, Николай Николаевич
• Шифр специальности: 16.00.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2008
• Место защиты: Воронеж
• Количество страниц: 163 с. : ил.

Микобактерии харакгеризуются высоким содержанием липидов в клетках и особенно клеточных стенках около имеются воскосодержащие растворимые в хлороформе миколовые кислоты с удлиненными разветвленными цепями около атомов углерода. Диффундирующий пигмент редок. Колонии некоторых видов постоянно или иногда бывают желтыми или оранжевыми, обычно изза каротиноидных пигментов, для образования которых может в некоторых случаях требоваться экспозиция на свету. Вследствие этого медленно воспринимают анилиновые красители. Окрашивание их достигается с применением карболовой кислоты при подогревании фуксин Циля. При таком способе окраски патогенные микобактерии особенно прочно ее удерживают при воздействии разведенных кислот, щелочей, спирта, чем и отличаются от других микроорганизмов. На этом основан метод окраски по Циль Нильсену. По методу Грама окрашиваются нелегко, но обычно рассматриваются как грамположительные. Нет эндоспор, конидий капсул. В настоящее время для быстрого обнаружения микобактерий в различных биоматериалах используют люминесцентный метод, в основе которого лежит способность микобактерий окрашиваться люминесцентными красителями родаминаурамином и давать золотистожелтый цвет под воздействием ультрафиолетового облучения. Исследование ведется при средних увеличениях, что дает возможность просмотреть большее поле, чем при обычной микроскопии, требующей иммерсии. В электронном микроскопе у микобактерий выявлены клеточная стенка, микрокапсула, цитоплазматическая мембрана. В состав цитоплазматической, мембраны входят липопротеидные комплексы, различные ферментные системы, в том числе и ответственные за окислительновосстановительные процессы. Цитоплазма микобактерий представлена гранулами, вакуолями и полостями, число которых может возрастать в клетках, подвергнутых воздействию химических агентов. В микрокультурах, развивающихся на жидких питательных средах, микобактерии человеческого и бычьего видов образуют косы, жгуты, завитки, скопления, имеющие, как правило, ориентированный рост. Это явление названо кордфактором и связано с целостностью липидных структур, расположенных на поверхности клетки, и присуще только вирулентным микобактериям. Микобактерии птичьего вида и атипичные, за исключением Мус. Баьзн, Мус. По типу дыхания микобактерии аэробы. Патогенные микобактерии развиваются только на соответствующих элективных питательных средах, содержащих в определенных соединениях углерод, азот, водород, кислород. Из минеральных веществ им жизненно необходимы им магний, сера, калий, фосфор и железо. Для осуществления биохимических процессов у микобактерий необходимым условиям является оптимальная температур С для человеческого, С для бычьего и С для птичьего вида. Патогенным микобактериям присущи медленный обмен веществ, а следовательно, они характеризуются замедленным ростом на средах, который проявляется через 0 суток и более. Для микобактерий характерна глициринофильность, это для них источник углерода и энергии. На средах, содержащих глицерин, исследователи отмечают более обильный их рост. Возбудители туберкулеза, особенно птичьего вида, некоторые атипичные и сапрофитные микобактерии при росте на жидких питательных средах имеют как поверхностный, так и донный рост и характеризуются наличием пленки рыхлой, матовой, крошкоподобной или сплошной, морщинистой, блестящие и соответствующего вида. На плотных средах микобактерии растут в виде колоний гладких форм 8форма, крошкоподобных мелких либо крупных, блестящих или матовых в виде единичных обособленных или же сплошных скоплений в виде морщинистого белого налта или белого с желтым оттенком. Разработаны методы ускоренного выращивания микрокультивирование в элективных жидких и плотных питательных средах на стеклах , , 3, 8 и др. МПВМА . Из применяемых четырех основных методов микробиологического исследования наилучшие результаты достигаются при применении метода микрокультур, обладающего явным преимуществом перед остальными тремя методами бактериоскопия, посев на плотные питательные среды, заражение экспериментальных животных.