Вакцина против инфекционной бурсальной болезни из штамма "Винтерфилд 2512"

• Автор: Норкина, Светлана Николаевна
• Шифр специальности: 16.00.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 173 с. : ил

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Историческая справка

1.2. Характеристика вируса ИББ.

1.2.1. Таксономическое положение.

1.2.2. Морфология и химический состав

1.2.3. Антигенная структура и вариабельность.

1.2.4. Устойчивость

1.2.5. Культивирование.

1.3. Эпизоотические особенности ИББ

1.4. Клинические признаки ИББ
1.5. Патологоанатомические и гистологические изменения.
1.6. Методы диагностики
1.6.1. Выделение и идентификация вируса, обнаружение ви
русного генома
1.6.2. Серологические методы обнаружения антител и антигена
вируса ИББ
1.7. Иммунитет и профилактика .
1.7.1. Особенности и проблемы специфической профилактики
ИББ.
1.7.2. Живые вирусвакцины против ИББ.
1.7.2.1. Вакцины из мягких и промежуточных
штаммов
1.7.2.2. Вакцины из жестких штаммов
1.7.3. Инактивированные вакцины
1.7.4. Новые направления в иммунопрофилактике ИББ
1.8. Заключение по обзору литературы.
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.
2.1. Материалы и методы.
2.2. Результаты исследований
2.2.1. Сравнительное изучение иммунобиологических свойств
вакцинных штаммов вируса ИББ.
2.2.1.1. Репродукция в эмбрионах птиц.
2.2.1.2. Репродукция в культурах клеток
2.2.1.3. Определение реверсибельности и безвредности
2.2.1.4. Изучение иммуносупрессивного действия
штаммов.
2.2.1.5. Стабильность иммунобиологических свойств
штаммов.
2.2.1.6. Антигенная активность .
2.2.1.7. Иммуногенность.
2.2.2. Структура и морфология штамма Vii
ВИББ.
2.2.3. Нуклеотидное секвенирование генома.
2.2.4. Разработка технологии изготовления, контроля и схемы
применения вакцины против ИББ из штамма Винтерфилд.
2.2.4.1. Изучение параметров промышленного культиви
рования.
2.2.4.2. Отработка методов стабилизации и лиофилизации
2.2.4.3. Длительность хранения
2.2.5. Изучение свойств опытных серий вакцины.
2.2.5.1. Определение иммунизирующей дозы.
2.2.5.2. Безвредность
2.2.5.3. Антигенная активность, иммуногенность, сроки на
ступления иммунитета.
2.2.5А Определение схем иммунизации и продолжитель
ности иммунитета.
2.2.5.5.Изучение эффективности вакцины в производствен
ных условиях.
3. ОБСУЖДЕНИЕ.
4. ВЫВОДЫ.
5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.
6. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
7. ПРИЛОЖЕНИЯ.
ПЕРЕЧЕНЬ УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ
БГ болезнь Гамборо
ИББ инфекционная бурсальная болезнь птиц
ВБГ вирус болезни Гамборо
реакция нейтрализации
ВНА вируснейтрализующие антитела
МА материнские антитела
КЭ куриные эмбрионы
РЭК развивающиеся эмбрионы кур
РЭП развивающиеся эмбрионы перепелов
РЭУ развивающиеся эмбрионы уток
СПФ свободные от патогенного фактора
ФЭК фибробласты эмбрионов кур
ФЭП фибробласты эмбрионов японских перепелов
ФЭУ фибробласты эмбрионов уток
ПКЭ культура клеток почки куриного эмбриона
ГЛА гидролизат лактоальбумина
ТЦЦ тканевая цитопатическая доза
ЦПД цитопатическос действие
ЦПЭ цитопатический эффект
МПА мясопептонный агар
МПБ мясопептонный бульон
МПГ1Б мясопептонный печеночный бульон
ПЭГ полиэтиленгликоль
РТГА реакция торможения гемагглютинации
ИФА иммуноферментный анализ
ОТПЦР обратнотранскриптазная полимеразная цепная реакция
А.о. аминокислотный остаток
П.н. пар нуклеотидов
ГФ Государственная Фармакопея
НД нормативная документация
Дц РНК двухцепочечная рибонуклеиновая кислота ВВ штаммы высоковирулентные штаммы ВНПР вирус некроза панкреатической железы рыб УХО вирус X дрозофил к ДНК ДНК копия с РНКматрицы
ДСН додецилсульфат натрия
ДТТ дитиотреитол
ДНТФ с1ЫТР дезоксирибонуклеотидтрифосфат
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность


Однако, детальное изучение вируса ИББ показало, что диаметр его меньше, чем у аденовирусов и реплицируется он в цитоплазме инфицированных клеток, а не в ядре 1. От реовирусов его отличало наличие только одной оболочки, состоящей из более мелких, чем у реовирусов, капсомеров 0. В г после детального изучения структуры генома, биофизических и биохимических характеристик было предложено объединить вирус ИББ и еще четыре не классифицированных вируса животных в одно новое семейство В1таутс1ае ОоЬоб, 9, 0. Основным признаком, по которому была создана новая таксономическая группа вирусов, явилась структура генома, представленная двумя сегментами двухцепочечной РНК дцРНК В1 ЯЫА. Официально новое семейство было объявлено в г. Международной комиссией по таксономии вирусов на очередном конгрессе в Сендае Япония . Кроме вируса ИББ, сюда отнесли уже известные возбудители некроза поджелудочной железы рыб ВНПР, теллинавирус V, вирус двустворчатых моллюсков и вирус X дрозофил XV. В настоящее время семейство разделено на три рода viivi, к которому относится вирус инфекционного бурсита птиц, ivi и ivi 0. Достаточно хорошо изучен представитель рода ivi вирус некроза поджелудочной железы рыб ВНПР. Впервые он был изолирован в Канаде в г на рыбоводческих фермах от представителей семейства форелевых Ф. Ф.радужная. Внутри рода определено серотипов. Природный хозяин ВНПР семга, хотя вирус был выделен и от других видов пресноводных и морских рыб, а также от ракообразных и морских моллюсков. Вирус выделяется из организма больных особей с мочой, фекалиями, секретом гонад, передается как горизонтально, так и вертикально векторы не известны и распространен повсеместно. Иногда в рыбных хозяйствах он является причиной эпизоотий, сопровождающихся высокой смертностью мальков и молоди до 6месячного возраста. Вирус вызывает некроз поджелудочной железы и обнаруживается в других внутренних органах. У инфицированных взрослых рыб клинические признаки заболевания не проявляются. Переболевшие особи становятся пожизненными вирусоносителями и потенциальным источником инфекции , , 7, 2. Вирус с характеристиками, свойственными семейству бирнавирусов, был изолирован от европейских угрей с клиникой стоматопапилломатоза и уровнем смертности , однако, этиологическая роль его в возникновении опухолей не доказана 8. Представитель рода ivi вирус X дрозофилы VX случайно выделен у фруктовых мушек i , а также в популяциях комаров ii . Инфицированные дрозофилы становятся
чувствительными к . Тип передачи горизонтальный. Органымишени, гистопатология и распространение неизвестны , , 4, 5, 6, 1. Происхождение вируса ИББ связывают с мутацией аквабирнавируса ВНТТР, так как в месте первичной вспышки в рацион птиц вводили рыбную муку, приготовленную из пород рыб, подверженных этой инфекции 2. Гипотетически возможен факт сохранения терморезистентного вируса в процессе термической обработки рыбного сырья, что удавалось обнаруживать при исследовании кормов методом ПЦР . Дальнейшие исследования структурных белков с использованием метода кросснейтрализации и триптидного анализа меченых изотопом йода Т вирусных белков подтвердили тесную взаимосвязь только между вирусами рода ivii. ВИББ и VX имели дифференцируемые отличия , 9. Рассматривался вопрос о возможности мутации вируса рода ivi, резервуаром которого являются насекомые. Однако, прямых доказательств найдено не было i, , 9. Существовало мнение, что вирус ИББ до года циркулировал на птице, не проявляя патогенности. Возможные изменения антигенной структуры явились причиной возникновения заболевания. Косвенным подтверждением этого факта служит появление высоковирулентных штаммов вируса в х годах , 4. Были описаны единичные случаи выделения бирнаподобных агентов у млекопитающих в фекальных пробах человека, свиней, крыс и морских свинок. Они отличались от истинных бирнавирусов размерами вириона, длиной геномных фрагментов и значением плавучей плотности, в связи с чем получили обозначение пикобирнавирусы. Этиологическая роль их во вспышках диарреи не установлена 8, 6. МОРФОЛОГИЯ И ХИМИЧЕСКИЙ СОСТАВ. Вирусы, входящие в семейство ivii, охарактеризованы сравнительно недавно.