Альтернативный метод контроля иммуногенности вакцин против синдрома снижения яйценоскости - 76(ССЯ-76) и совершенствование способа культивирования вируса

• Автор: Кочеткова, Екатерина Сергеевна
• Шифр специальности: 16.00.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 146 с. : ил

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1.1. Общие сведения об аденовирусной инфекции кур

1.1.2. Характеристика вируса ССЯ

1.1.3. Особенности эпизоотологии ССЯ

1.1.4. Патогенез заболевания.

1.1.5. Клинические признаки и

патологоморфологические изменения.

1.1.6. Антигенная активность и антигенное взаимоотношение штаммов вируса ССЯ

1.1.7. Культивирование вируса ССЯ.

1.1.8. Диагностика болезни.
1Л .9. Иммунитет и специфическая профилактика ССЯ
1.1 Основные принципы конструирования вакцин
против ССЯ.
1.2. Адъюванты и их использование в составе вакцин.
1.2.1. Минеральные адъюванты.
1.2.2. Масляные адъюванты
1.2.3. Механизм действия адъювантов
1.3. Принципы контроля иммуногенности противовирусных препаратов.
1.4. Заключение по обзору литературы
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.
2.1. Материалы и методы.
2.1 Л. Характеристика используемых материалов
2.1.2. Характеристика применяемых методов
2.2. Результаты исследований
2.2.1. Разработка метода обнаружения специфического ГА
антигена в эмульсионных моновалентных вакцинах
против ССЯ
2.2.2. Разработка метода выявления ГАантигена вируса ССЯ в инактивированных поливалентных эмульсионных вакцинах.
2.2.3. Отработка методики определения количества гемагглютинина в сорбированных вакцинах
против ССЯ
2.2.4. Влияние количества ГАантигена в составе инактивированных вакцин на их антигеную активность.
2.2.5. Оценка эффективности эмульсионных инактивированных вакцин против ССЯ по количеству действующего начала в прививной дозе.
2.2.5.1. Определение протективного уровня поствакцинальных антител, обеспечивающих защиту цыплят от заражения вирусом ССЯ
2.2.5.2. Гистологические изменения в репродуктивных органах птиц привитых препаратами с различным содержанием ГАантигена вируса ССЯ.
2.2.6. Зависимость антигенной активности сорбированных вакцин от содержания Г Аантигена вируса ССЯ
2.2.7. Сравнительная оценка методов контроля биофабричных серий вакцин против ССЯ по количеству ГАантигена и
антительному ответу.
2.2.8. Адаптация вируса ССЯ к культуре клеток эмбрионов птиц.
3. ОБСУЖДЕНИЕ
4. ВЫВОДЫ
5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
6. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ.
7. ПРИЛОЖЕНИЯ
ПЕРЕЧЕНЬ УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ ССЯ синдром снижения яйценоскости
НБ ньюкаслская болезнь
ИББ инфекционная бурсальная болезнь птиц
КЧС классическая чума свиней
СПФ свободные от патогенного фактора
ФЭУ фибробласты эмбрионов уток
ПЭК культура печени эмбрионов кур вм внутримышечно
ГЛА гидролизат лактоальбумина
ЦПД цитопатическое действие
ЭИД5о эмбриональная инфекционная доза
ГА гемагглютинирующий антиген
ГАЕ гемагглютинирующая еденица
РГА реакция гемагглютинации
РТГА реакция торможения гемагглютинации
ИФА иммуноферментный анализ
РСК реакция связывания комплемента
ГОА гидроокись алюминия
ПАВ поверхностноактивные вещества
НД нормативная документация
ТУ технические условия.
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность


Во вторую группу включены вирусы с наличием группоспецифического преципитирующего антигена, отличающегося от такового первой группы вирусы геморрагического энтерита индеек, болезни мраморной селезенки фазанов. К третьей группе шносшся единственный возбудитель синдрома снижения яйценоскосги ССЯ, обладающий гемагглютинирующим антигеном и имеющий общий с первой группой преципитирующий антиген 5,,,9,0. Особенностями аденовирусной инфекции является то, что переболевшая птица остается вирусоносителем практически в течение всей жизни. Доказано наличие вертикального и горизонтального путей распространения инфекционного начала. Некоторые авторы не поддерживают мнение о преобладании трасовариальной передачи возбудителя и указывают на большее значение горизонтального пути распространения болезни. Считают, что если и происходит вертикальная передача инфекции, то это может быть только в течение очень
непродолжительного времени, вероятно, в первые несколько дней после заражения 5,,,,0. Носительство птицей одного серотипа вируса не предохраняет от проникновения в ее организм аденовирусов других серотипов. Количество серотипов аденовирусов, которые можно выделить от птиц, возрастает пропорционально увеличению их возраста. В популяции птиц одного хозяйства могут персистировать все или многие серотипы аденовирусов. Причем, аденовирусная инфекция вызываемая возбудителем одного серотипа может протекать латентно или остро в зависимости от вида птиц. Например, установлено, что утки и гуси являются латентными носителями аденовируса способного вызывать острое заболевание у кур синдром снижения яйценоскости . Это заболевание известное с г. Синдром снижения яйценоскости поражает кур, преимущественно на пике яйцекладки и, проявляется резким снижением яйценоскости, истончением, депигментацией и деформированием скорлупы или полным ее отсутствием 5,7,,,,,,4,6,5,8,0,1, 2,9,0,9. Заболевание было впервые зарегистрировано в Нидерландах и описано голландским ученым V с сотр. Болезнь быстро распространилась во многих странах мира с интенсивным выращиванием кур Великобритании, США, Франции, Бельгии, Италии, Дании, Японии, Аргентине, Ираке, СССР и др. В начале возникновение нового заболевания связывали с действиями нескольких факторов, имеющих инфекционную и нсинфекционную этиологию. К инфекционным факторам относили ньюкаслскую болезнь, инфекционный бронхит и респираторный микоплазмоз, к неинфекционным отравления пестицидами, фунгицидами, солыо, витамином Дз, влияния антикокцидийных средств никарбозин, монензин зоотехнические ошибки
наличие эктопаразитов пухопероедов, вшей и эндопаразитов кокцидиоз ,,6. В настоящее время доказано, что этиологическим фактором возникновения и развития ССЯ является утиный аденовирус, обладающий гемагглютинирующими свойствами в отношении эритроцитов кур, уток, гусей и крыс. Особенность его заключается в том, что он не является патогенным для этого вида птиц ,,8,1. Впервые возбудитель ССЯ был выделен КВ. МсРеггап в Северной Ирландии, из слизистой оболочки носовой полости и гортани кур, у которых отмечалось снижение продуктивности. В настоящее время он известен как штамм 7 5. Вахепс1а1е изолировал из лейкоцитов кур вирус серологически идентичный штамму 7, который был назван ВС ,. В Венгрии из клоачных смывов и содержимого толстого отдела кишечника кур выделили штамм В8 вируса ССЯ, который в настоящее время наиболее широко используется для получения инактивированных вакцин 4. В последующие годы в различных странах мира так же выделяли различные штаммы вируса ССЯ в Великобритании Д и Д 6, в США Корнелл 3, во Франции 1, в Италии Е 9, в Мексике М 8, в Японии 1РА1 6. В России штамм Б был выделен из патматериала от больных кур с признаками ССЯ в одного из хозяйств ЗАО Братцевское . Принадлежность вируса ССЯ к утиным аденовирусам подтверждалась его способностью болсс интенсивно репродуцироваться в клетках эмбрионов уток, чем в эмбрионах других видов птиц, поэтому утиные эмбрионы и клеточные культуры, полученные из них, являются оптимальной системой для его культивирования ,,,,2. Исследования сывороток крови разных пород уток в серологических реакциях в Венгрии и других странах показали наличие специфических антигемагглютининов к вирусу ССЯ.