Цитогенетические нарушения и состояние прооксидантно-антиоксидантной системы у человека при хроническом воздействии ионизирующей радиации в малых дозах

• Автор: Мадонова, Юлия Борисовна
• Шифр специальности: 03.03.04, 03.02.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Саранск
• Количество страниц: 118 с. : ил.

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Нестабильность хромосом лимфоцитов

1.2. Индуцированная нестабильность хромосом

1.3. Роль оксидантного стресса в повреждении хромосом человека и реализации генетических повреждений в заболевания

1.4. Особенности радиационноиндуцированной нестабильности хромосом

1.5. Анализ экологической обстановки на территории п. Ялга и ее связи с заболеваемостью населения

ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материал и объект исследования

2.2. Описание групп обследуемых лиц

2.3. Методы исследования

2.3.1. Культивирование лимфоцитов периферической крови человека метафазный метод
2.3.2. Сплошная окраска микропрепаратов метафазных хромосом по методу Гимза
2.3.3. Окраска микропрепаратов метафазных хромосом раствором азурэозина по РомановскомуГимза
2.3.4. Требования к качеству препаратов метафазных хромосом
2.3.5. Учет частоты хромосомных аберраций
2.3.6. Культивирование лимфоцитов периферической крови человека анафазный метод
2.3.7. Анализ морфологических аномалий ядра лимфоцитов в культуре клеток периферической крови
2.3.8. Приготовление гематологических мазков периферической крови для микроядерного теста
2.3.9. Анализ цитогенетических нарушений структуры ядра лимфоцитов в гематологическом мазке
2.3 Определение концентрации малонового диальдегида
2.3 Определение активности супероксиддисмутазы
2.3 Определение активности каталазы
2.3 Определение белка по М. Бредфорду
2.3 Определение изоферментного спектра супероксиддисмутазы эритроцитов и плазмы крови человека
2.3 Культивирование лимфоцитов периферической крови людей с высокой хромосомной нестабильностью в среде с повышенным содержанием витаминов
2.3 Культивирование лимфоцитов периферической крови людей с высокой хромосомной нестабильностью в условиях дополнительной гспотоксической нагрузки
2.3 Статистическая обработка данных
ГЛАВА III. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Результаты микроядерного теста с использованием лимфоцитов периферической крови человека
3.2. Результаты исследования хромосомной нестабильности лимфоцитов периферической крови человека
3.3. Результаты исследования проантиоксидантного статуса обследуемых лиц
3.4. Влияние дополнительной генотоксической нагрузки на кариотип обследуемых лиц с повышенной хромосомной нестабильностью и нарушениями проантиоксидантного равновесия
3.5. Влияние антиоксидантоз на митотические параметры лимфоцитов периферической крови обследуемых лиц с повышенной хромосомной нестабильностью и нарушениями проантиоксидантного равновесия
ГЛАВА IV. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
ЛИТЕРАТУРА


Показано, что в лимфоцитах периферической крови людей при хроническом ионизирующем облучении в малых дозах снижена активность супероксиддисмутазы и каталазы, а также повышена интенсивность процессов перекисного окисления липидов. Впервые зарегистрировано резкое снижение активности внеклеточной супероксиддисмутазы в венозной крови у лиц тестируемой группы. Выявлена связь цитогенетических нарушений в периферической крови тестируемых лиц с распространением хронической патологии на территории проведения исследования заболевания костномышечной системы, иммунные заболевания, сердечнососудистые заболевания, онкозаболевания. Научнопрактическая значимость работы. В диссертационной работе исследованы механизмы возникновения хромосомной нестабильности в условиях действия хронического ионизирующего излучения в малых дозах. Данные исследования могут способствовать разработке и внедрению более совершенных цитогенетических тестов для выявления влияния малых доз ионизирующей радиации и оценке их последствий, а так же для выявления скрытой хромосомной нестабильности, в том числе полученной по наследству. Результаты диссертационной работы позволяют оценивать особенности развития хронической патологии у населения Мордовии во взаимосвязи с характером хромосомной нестабильности и действующими факторами загрязнения. Результаты исследования позволяют выявлять группы лиц с высокой хромосомной нестабильностью, как группы риска развития хронических форм патологии, и проводить своевременные профилактические меры, направленные на стабилизацию кариотипа, в условиях хронического действия ионизирующей радиации в малых дозах. ЧАЭС, выявлено наличие хромосомной нестабильности высокая частота хромосомных фрагментов, транслокаций, увеличение частоты нарушений структуры ядра лимфоцитов высокая частота клеток с микроядрами, ядерными нротрузиями, межъядерными мостами, хвостами, атипичными формами ядра, кариорексисом, кариопикнозом, кариолизисом и нарушение процессов деления клеток атипичные митозы и многоядерность. У обследуемых лиц, проживающих в условиях хронического ионизирующего облучения в малых дозах изменен проантиоксидантный статус в сторону повышения активности процессов перекисного окисления липидов при снижении активности основных антиоксидантных ферментов. Высокий уровень апоптоза лимфоцитов в периферической крови тестируемых лиц может влиять на характер течения хронических форм заболеваний на территории мониторинга иммунодефициты, болезни крови, новообразования, болезни систем органов. Апробация работы. Материалы, представленные в диссертации были доложены на международной научной конференции Актуальные проблемы экологической физиологии, биохимии, генетики животных Саранск, в материалах V съезда Российского общества медицинских генетиков Уфа, в материалах VII общероссийской научной конференции с международным участием Успехи современного естествознания Сочи, в материалах международной научной конференции, посвященной 0летию со дня рождения Н. И. Вавилова Киев, в материалах XXIII международной конференции финноугорских студентов, Саранск, на ежегодных Огаревских чтениях научных конференциях Мордовского госуниверситета Саранск , , , , гг. Вторые Ржавитинские чтения, Саранск, международной научной конференции, посвященной 0летию со дня рождения профессора Е. В. Сапожниковой Саранск, IV съезде Российского общества биохимиков и молекулярных биологов Новосибирск, , на Всероссийской заочной научной конференции, посвященной летию со дня рождения профессора Н. Ф. Санаева Саранск, . Публикации. По теме диссертации опубликовано печатных работ, в числе которых 2 статьи в издании, рекомендуемом ВАК МОН РФ. Структура и объем диссертации. Материалы диссертации изложены на 8 страницах машинописного текста. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части, результатов и обсуждения, выводов и списка использованной литературы. Диссертационная работа включает рисунка, 7 таблиц. Список цитируемой литературы состоит из 0 источников, в том числе опубликованных в зарубежных журналах.